疫学基础-免疫学检测与防治(全科医生培训)剖析

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1、免疫学的临床应用,免疫学诊断 免疫学防治,Ag,浆细胞,致敏T细胞,Ab,Th1细胞,Tc细胞,T,免疫学诊断,释放细 胞因子,直接杀伤 靶细胞,测抗体 (定性或定量),测抗原 (定性或定量),测细胞因子,测T细胞总数及亚群,测T细胞功能 淋巴细胞转化试验,细胞 免疫,体液 免疫,免疫学诊断,抗原或抗体的检测,免疫细胞及其功能检测,一、抗原或抗体的检测,(一) 检测的原理,1. 已知抗体测抗原(多用于定性),2.已知抗原测抗体(多用于定量),(二)常见抗原抗体反应的种类,1.凝集反应,直接凝集反应,间接凝集反应,间接凝集抑制试验,协同凝集试验,细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团

2、块称凝集反应。,2.沉淀反应,可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀物称沉淀反应。,单向免疫扩散,免疫比浊法,双向免疫扩散,对流免疫电泳,3.中和反应 如抗“O”试验,4.免疫标记技术,用荧光素、酶、同位素等标记抗体或抗原用以测定相应抗原或抗体的技术称为免疫标记技术。常用方法有免疫荧光技术、酶免疫技术、放射免疫检测技术等。 特点:敏感、特异、快速,能定性、定量、定位。,免疫印迹法,斑点金结合试验,放射免疫测定法,酶免疫测定法(ELISA),免疫荧光技术,渗滤法、层析法,二、淋巴细胞的测定,(一)T细胞总数及亚群的测定,(二)T细胞功能的测定,1.淋巴细胞增殖试验 形态学方法、3H-TdR掺入法等。

3、,2.细胞毒试验,3.细胞因子测定,三、免疫学检测的应用,(一)协助诊断感染性疾病,(三)协助诊断免疫系统疾病,(四)进行免疫学监测,(二)协助诊断肿瘤,免疫学防治,免疫预防,免疫治疗,机体特异性免疫力获得方式:,自动免疫,被动免疫,自然自动免疫:患传染病、隐 性感染,自然被动免疫:母体IgG经胎盘 进入胎儿体内,人工自动免疫:接种疫苗、 类毒素,人工被动免疫:注射抗毒素、 丙球,Ag,浆细胞,致敏T细胞,Ab,Th1细胞,Tc细胞,T,免疫学防治的基本原理,释放细 胞因子,直接杀伤 靶细胞,输入抗体 (人工被动免疫),输入抗原 (人工主动免疫),输入细胞因子,输入效应性淋巴细胞 过继免疫,细

4、胞 免疫,体液 免疫,一、人工免疫的概念及种类,人为地给机体输入抗原 以增强机体的免疫功能,或直接输入免疫血清、细胞免疫制剂 等,使机体获得某种特异性免疫力,从而达到预防或治疗某些疾病的方法称为人工免疫。,人工免疫主要包括人工自动免疫、人工被动免疫和过继免疫三大类。,二、人工自动免疫,(一)概念:是用人工接种的方法给机体输入疫苗、类毒素等抗原物质,通过刺激机体产生免疫应答,使机体获得特异性免疫力的方法。,(二)特点:免疫力出现慢、维持时间长,常用于传染病的特异性预防。,(三)常用人工自动免疫制剂,死疫苗 是用物理或化学方法将病原微生物杀死后制成的制剂。,活疫苗 是用减毒或无毒的病原微生物制成的

5、制剂。,类毒素 是用细菌的外毒素经0.3%0.4%甲醛处理后,其毒性消失但保留免疫原性故称为类毒素。,亚单位疫苗 应用化学方法提取病原微生物中有效成分制成的纯化疫苗。,基因工程疫苗或DNA重组疫苗,新研制的疫苗,合成疫苗 用人工合成多肽抗原连接适当载体与佐剂制成的疫苗。,(四)计划免疫,1.概念 根据特定传染病的疫情监测和人群免疫状况分析,按照规定的免疫程序有计划地进行人群预防接种,以提高人群免疫水平,控制或消灭相应传染病。,2.我国儿童计划免疫程序(表),三、人工被动免疫,(一)概念:是人为的给机体输入抗毒素、免疫血清等免疫效应物质,使机体立即获得特异性免疫力的方法。,(二)特点:免疫力出现

6、快、维持时间短,可用于传染病的特异性治疗和紧急预防。,(三)常用人工被动免疫制剂,抗毒素 用细菌类毒素多次给马注射,待其产生大量抗体后,放血并分离马血清经提纯后制成的制剂。,胎盘球蛋白 从胎盘血中提取的免疫球蛋白(IgG)。,血浆丙种球蛋白 从正常人血中提取的免疫球蛋白(IgG、IgM)。,是指给患者转输具有在体内继续扩增效应细胞的一种疗法。,四、过继免疫治疗,五、免疫增强剂和免疫抑制剂,1.免疫增强剂 微生物制剂:BCG、短小棒状杆菌、酵母多糖等。 化学合成药:多聚核苷酸等。 多糖类物质:黄芪、人参、灵芝等提取物。 细胞因子:IL-2、IFN、TNF等。,2.免疫抑制剂,化学合成药:激素、烷

7、化剂等。 真菌代谢产物:环孢素A、FK-506等。 单克隆抗体:抗T细胞单抗。 中草药及其有效成分:如雷公藤多甙等。,凝集反应原理图解(一),凝集反应原理图解(二),凝集反应原理图解(三),单向琼脂扩散试验,双向琼脂扩散试验,对流免疫电泳,测吸光度,抗体,抗原,免疫复合物的浓度与透射光的衰减呈正相关,免疫比浊法原理,免疫荧光技术,酶联免疫吸附试验(ELISA-间接法),斑点金免疫渗滤试验,A,D,C,B,阴性(未怀孕),阳性(怀孕),加尿样,除去滤器,加胶体金标记抗体,加洗涤液,兔抗鼠IgG,鼠抗HCG单抗,金标鼠抗HCG单抗,尿液浸湿标志线,手持端,斑点金免疫层析试验(一),斑点金免疫层析试

8、验(二),尿样,阳性,弱阳性,阴性,无效,质控线,测试线,免疫印迹法图解,SDS裂解病毒,聚丙酰胺凝胶电泳,-,+,95 68 45 12KD,电转印至NC膜上,置待测血清中,漂洗;加酶标抗抗体,漂洗;,加底物 显色,120 41 24KD,抗凝血,分层液,抗凝血,血浆,白膜层,红细胞,离心,淋巴细胞的分离,T细胞亚群的检测花环法(一),T细胞亚群的检测花环法(二),死疫苗与活疫苗的特点比较,区别要点 死疫苗 活疫苗 制剂特点 强毒株制成 弱毒或无毒株制成 接种方式 多为皮下注射 多模拟自然感染途径 接种剂量次数 量较大,23次 量较小,多为1次 副作用 较大 较小 免疫效果 较差,维持 较好,维持35年 数月数年 或更长 疫苗保存 较易保存 不易保存,

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