需氧革兰阳性杆菌检验

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1、第13章 需氧革兰阳性杆菌,芽胞杆菌属炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌 李斯特菌属产单核李斯特菌 丹毒丝菌属红斑丹毒丝菌 加特纳菌属阴道加特纳菌,第一节 炭疽芽胞杆菌,引起动物和人类炭疽病 是人类历史上第一个被发现的病原菌,俗称炭疽杆菌,一、临床意义,1.致病物质 荚膜 抗吞噬,有利于细菌在组织内繁殖扩散 炭疽毒素 保护性抗原、致死因子、水肿因子,2. 所致疾病 炭疽病: 传染源:患病食草动物及其制品或被污染物 传播途径:接触皮肤炭疽 食用肠炭疽 吸入肺炭疽 可并发败血症,死亡率极高 3. 免疫力 持久性免疫力,二、生物学特性,形态与染色 致病菌中最大的G+粗大杆菌,两端平切、排列呈竹节状 有毒株有

2、荚膜 芽胞在有氧条件下形成,呈椭圆形,小于菌体,位于菌体中央 无鞭毛,培养特性 需氧 营养要求不高 在普通培养基中生长旺盛 菌落直径2mm4mm 灰白色、无光泽、不透明、扁平、边缘不整齐的粗糙型 在低倍镜下观察菌落边缘呈“卷发状” 在液体培养基中呈絮状沉淀生长 明胶培养管371824h表面液化成漏斗状,由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成“倒松树状”。,抗原性 细菌性抗原 菌体多糖抗原 荚膜多肽抗原 芽胞抗原 炭疽毒素 保护性抗原 致死因子 水肿因子,抵抗力很强 耐高温 干燥土壤、皮毛中存活数年至几十年 对碘和氧化剂敏感 对青霉素等敏感,三、微生物学检验,检验程序 见图13-2 标本的采集与处理 皮

3、肤炭疽:病灶深部标本/分泌物 肺炭疽:痰、血液 肠炭疽:粪便、呕吐物 脑血炭疽:脑脊液、血液 其它:内脏、耳、舌尖、淋巴结、污染物等,标本直接检查 1、直接镜检 2、荚膜荧光抗体染色 荧光显微镜 3、核酸检测 PCR、核酸杂交,分离培养与鉴定 1、分离培养 血琼脂平板 普通琼脂平板 2、鉴定 形态学特征 生化反应 见表13-1 噬菌体裂解试验,串珠试验 青霉素串珠试验:炭疽杆菌在含微量(0.050.5U/ml)青霉素的培养基上, 37 6h,细胞壁合成受阻,细胞膜受胞质压力膨出,其形态变异为大而均匀的圆球形,呈串珠状排列。 类炭疽无此现象,青霉素抑制试验 炭疽芽胞杆菌一般在含5U/ml的青霉素

4、平板上仍能生长,在含10、100U/ml青霉素的平板上受到抑制而不生长。 串珠和青霉素抑制联合试验 荚膜肿胀试验等,荚膜肿胀试验,1 ) 待测菌 待测菌 2)炭疽荚膜抗血清 兔血清 3) 1%亚甲蓝 1%亚甲蓝 4)加盖玻片,湿盒,室温510min 5)镜检:蓝色细菌周围可见厚薄不等、边界清晰的环状物为阳性,主要引起食物中毒 以夏秋季最为多见 引起的食物中毒有两型:腹泻型和呕吐型,一、临床意义,第二节 蜡样芽胞杆菌,二、生物学特性,1、形态染色 革兰阳性大杆菌,两端较钝圆 多呈链状排列 可形成芽胞 引起食物中毒的菌株多为周毛菌 不形成荚膜,2、培养特性 营养要求不高 形成较大、灰白色、粗糙似毛

5、玻璃状或白蜡状的菌落 在血琼脂平板上呈溶血,三、微生物学检验,检验程序 见图13-5 标本采集 排泄物、呕吐物和可疑食物 标本直接镜检,分离培养与鉴定 1、活菌计数 涂布法 倾注平板法 细菌数大于105个/克或大于105个/毫升,即有 发生食物中毒的可能,2、分离培养 普通琼脂平板 血琼脂平板 3、鉴定 依据形态、染色、菌落特点、生化反应、血 清学试验等 药敏试验,第四节 阴道加特纳菌,一、临床意义 在正常妇女阴道内也可检出 可引起细菌性阴道病 也能引起新生儿败血症和软组织感染,二、生物学特性 革兰染色性视菌株和菌龄不同而异 易呈多形性 营养要求较高 形成圆形、光滑、不透明,针尖大小的菌落,三

6、、微生物学检验 1、检验程序 见图13-8 2、标本采集 阴道分泌物,3、标本直接检查 湿片镜检、染色镜检、pH测定、胺试验 4、分离培养与鉴定 5、药敏试验,第三节 产单核细胞李斯特菌和红斑丹毒丝菌,一、产单核细胞李斯特菌 1、临床意义 传染源:健康带菌者 传播途径:粪-口途径、胎盘、产道、直接接触 致病物质:溶血素、菌体表面成分 引起疾病:传染性单核细胞增多症、脑膜炎、菌血症、食物中毒,2、生物学特性 革兰阳性短小杆菌,成双排列,有鞭毛 营养要求不高,菌落小,呈灰白色 耐盐、耐碱,对酸、热、消毒剂敏感,3、微生物学检验 检验程序 见图13-6 标本采集 血液、脑脊液、分泌物、咽喉拭子、羊水

7、和动物内脏等 直接镜检 分离培养与鉴定 药敏试验 检验结果分析与报告,二、红斑丹毒丝菌(俗称丹毒杆菌) 1、临床意义 是猪和其他动物的致病菌,人接触感染动物或皮革而感染。主要感染疾病为类丹毒(是一种急性的但进展缓慢的皮肤疾病),常发部位:手部。 有时可引起关节炎、急性败血症、心内膜炎和食物中毒。,2、生物学特性 革兰阳性细小杆菌,成单、成对或小丛状排列。 在固体培养基上可形成光滑型和粗糙型两种菌落。,3、微生物学检验 检验程序 见图13-7 标本采集 病灶渗出液、血液、关节滑膜、心瓣膜等 直接镜检 分离培养与鉴定,胞内寄生菌: 沙门氏菌、结核杆菌、麻风杆菌、 嗜肺军团菌 细菌引起的食物中毒: 葡萄球菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、 产气荚膜杆菌、肉毒杆菌 噬菌体基因编码的毒素: 猩红热毒素、志贺毒素、肉毒毒素、 白喉毒素,

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