《颌前突与正常人群中nell1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《颌前突与正常人群中nell1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究（35页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究,专 业： 口腔正畸学 导 师： 王小琴 教授 研 究 生： 赵 华,前言 材料与方法 结果 讨论 结论,目录,前言,Allwright and Bundred通过流行病学调查显示在亚洲人群中下颌前突(Mandibular Prognathism,MP) 患病率较其他地区相对较高，大约为8-40% 但是其致病原因至今仍不清楚。,MP有家族聚集倾向,MP可能为常染色体显 性遗传病 局部因素,有一个影响MP的主基 因且符合孟德尔遗传 多因素影响,Gheriani Marazita,许多学者,Ricardo Silvie
2、ne,2003年,2007年,19世纪,2007年，余兴华等人对MP患者和正 常下颌患者进行了生长激素受体基因单 核苷酸多态性分析。,另外还有许多学者在研究与下颌骨 发育有关的基因，比如ShhNell-1 Ptc等。,结果发现了一个位于第10外显子的 1673位SNP位点碱基突变类型为腺嘌呤 (A)胞嘧啶(C)。,国内研究现状,Nell-1基因,目前对 Nell-1 基因的研究主要集中在骨组 织工程学方面，基因改变研究未见报道。,本实验对105例（实验组60例，对照组45例）受试者的Nell-1基因SNP位点rs61150458进行了初步研究。,SNP位点,基因,G,C,蛋白质,Glu,Asp
3、,天冬氨酸,谷氨酸,研究目的,探讨Nell-1基因单核苷酸多态性 位点rs61150458在下颌前突与正 常人群之间的差异 为下颌前突的病因学机制提供理 论基础。,材料与方法,实验试剂与仪器,研究对象,满足以下条件的进行头颅侧位片测量： 均为汉族人，且没有异族通婚史 双侧颌面对称，无面部畸形 无不良习惯及替牙障碍 均为成年人，无外伤史，无手术史,纳入标准,对照组(正常)：SNA 、SNB、 ANB、上颌长、 上颌位置、MP-FH 在正常范 围之内， 2ANB4,实验组( MP ) ：SNA、上颌长、上颌位置、 MP-FH在正常范围之内， ANB0。,实验组60人,对照组45人,采静脉血5ml,
4、提取全部DNA,设计相应目的基因的引物,PCR扩增目的基因,Hinf 酶切,统计学分析,实验步骤,DNA提取采用TKM血细胞DNA快 速提取法,DNA提取,目的基因引物的设计,引物的设计采用Printer 3.0软件 上游引物：gcttccagggtggagtttta 下游引物：cacagagttttggacccatgt,50LPCR反应体系,PCR反应参数,1 SspI aat|att13 1 tctttccctaatatttggcttccagggtggagttttagtaaaaattacagaaatgtgtcc 61 MboII n|nnnnnnntcttc84 61 NdeII |gat
5、c83 61 MboI |gatc83 HinfI g|antc101 61 tcctttgaactgctcagaaaaggatcacattcttcctgagaatcagtgctgccgtgtctg 121 MboII n|nnnnnnntcttc167 121 tagaggtaagtgggcttggtggtgggccatgcgtggggtgaggctggggctggtcttctg 181 gggcatgagattttaatgaatagtatgataataacatgggtccaaaactctgtgcgctgc,酶的确定,Hinf ,5 G A N T C 3 3 C T N A G 5,统计学
6、分析,比较各组间等位基因频率和基因型分 布，采用卡方检验。 对两组研究对象的基因型分布进行 Hardy-Weinberg遗传平衡性检验 所有统计学检验采用SPSS 17.0软件完 成，以P0.05代表有统计学差异,结 果,电泳结果 目的基因扩增产物,200bp,Marker,目的基因,实验组酶切后凝胶电泳图,100bp,200bp,GG型酶切后片段长度：83bp、134bp； CC型酶切后片段长度：217bp GC型酶切后片段长度：83bp、134bp 、 217bp,对照组酶切后凝胶电泳图,100bp,200bp,GG型酶切后片段长度：83bp、134bp； CC型酶切后片段长度：217bp
7、 GC型酶切后片段长度：83bp、134bp 、 217bp,等位基因频率分析,注：P0.05，即实验组与对照组之间等位基因频率差异无显著性。,基因型分析,注：P0.05，即实验组与对照组之间的基因型分布差异无显著性。,讨 论,可单独引起成骨细胞的分化 可以通过操纵一些成骨相关基因的下游途径来影响其他信号通路而促进成骨细胞的分化 Cowan 研究表明Nell-1蛋白只作用于颅颌面的成骨细胞 ，特别是对下颌骨的成骨有其特异性,Nell-1基因的特点,MP的致病原因与Nell-1基因无关。,由于样本量有限，其代表性有限。,MP的致病原因与Nell-1的该SNP位点的 变异无关。,结果分析,结论,由
8、于实验组与对照组的病例有限，对Nell-1基 因与MP患者的内在联系需增加样本量做进一步 的研究，对其它位点及二者之间的内在联系仍 需深入探讨。,Nell-1基因的rs61150458多态性位点在中国汉族MP人群与正常人群之间的等位基因频率及基因型分布差异无显著性，尚不能认为MP的致病原因与该位点的变异有关。,1,2,主要参考文献,1 Alexander AE,McNamara JA Jr,Franchi L,et al.Semilongitudinal cephalometric study of craniofacial growth in untreated Class III malo
9、cclusion J. Orthod Dentofacial Orthop,2009,135(6):1-14 2 Baccetti T,Rey D,Oberti G,et al.Long-term outcomes of Class III treatment with mandibular cervical headgear followed by fixed appliances J.Angle Orthod,2009.79(5):828-234 5 Watanabe M,Suda N,Ohyama K.Mandibular prognathism in Japanese families
10、 ascertained through orthognathically treated patientsJ. Orthod Dentofacial Orthop,2005,128(4):466-470 6 Chang HP,Tseng YC,Chang HE.Treatment of mandibular prognathism J. Formos Med Assoc,2006, 105(10):781-790 7 T. Yamaguchi, S.B. Park, A. Narita,et al. Genome-wide Linkage Analysis of Mandibular Pro
11、gnathism in Korean and Japanese PatientsJ .Dent Research, 2005,84(3):255-259 8 Frazier BS,Rincon RR,Zhou J, et al.Evidence of linkage in a Hispanic cohort with a Class dentofacial phenotypeJ .Dent Res,2009,88(1):56-60 9王豫蓉,余兴华,戴红卫,等.生长激素受体基因单核苷酸多态性在下颌前突与正常人群中的分布研究J.2008,33(12):1522-1524 10 Cowan CM,
12、Cheng S, Ting K, et al .Nell-1 induced bone formation within the distracted intermaxillary suture J. Bone,2006,28(1):48-58 11 Zhang X,Kuroda S,Carpenter D, et al.Craniosynostosis in transgenic mice overexpessing Nell-1J.Clin Invest,2002,112(6):861-870 12 Cowan CM,Shi Y Y,Aalamioo, et al .Adipose-der
13、ived adult stromal cells heal critical-size mouse calvarial defectsJ.Nat Biotechnol,2004,22(5):560-567 12 Zhang X,Carpenter D,Bokui N, et al .Overexpression of Nell-1,a craniosynostosis-associated gene, induces apoptosis in osteoblasts during craniofacial developmentJ. Bone Miner Res,2003,18(12): 21
14、26-2134,13 Lieberm an JR,Daluiski A,Einhom TA.The role of growth factor in the repair of bone.Biology and clinical applicationsJ. Bone Joint Surg,2002,84-A(6):1032-1044 14 A.A. El-Gheriani, B.S. Maher, A.S. El-Gheriani, et al. Marazita Segregation Analysis of Mandibular Prognathism in Libya J. Dent
15、Research 2003, 82(7):523-527 15 Ricardo Machado Cruz,Henrique Krieger, Ricardo Ferreira, et al. Major Gene and Multifactorial Inheritanceof Mandibular Prognathism J .American Medical Genetics ,2008,146A(1):71-77 16 Stockton DW,Das P,Goldenberg M, et al.Mutation of Pax9 is associated with oligodontia
16、J.Nat Genet.2000,24(1):18-19 17 Zhou J, Lu Y, Gao XH, et al. The growth hormone receptor gene is associated with mandibular height in a Chinese populationJ. Dent Res, 2005,84(11):1052-1057 18 Zhang X, Kuroda S, Carpenter D, et al .Craniosynostosis in transgenic mice overexpressing Nell-1 J. Clin Invest,2002
