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1、生物科学与工程系生物化学实验教学研究室,实验一 DNA的琼脂糖凝胶电泳,指导老师:苏 乔 副教授 电话:84706356-606,生物科学与工程系生物化学实验教学研究室,概 述,1、迁移方向 2、影响迁移率的主要因素: (1)DNA的分子大小 (2)琼脂糖的浓度 (3)DNA的构象 (4)电场强度,生物科学与工程系生物化学实验教学研究室,3、 未知DNA片段的大小计算线性双链DNA分子,其迁移距离与碱基对数目以10为底的对数值成反比,生物科学与工程系生物化学实验教学研究室,已知分子大小的DNA标准物(DNA Marker) 可根据电泳样品预计的片段大小选择使用。,生物科学与工程系生物化学实验教
2、学研究室,4、上样缓冲液(loading buffer)的使用 (1)倍数 (2)上样量少的时候可适当补充缓冲液或ddH2O 5、常用的电泳缓冲液及其组成,生物科学与工程系生物化学实验教学研究室,技术要点及注意事项,1、使用1TAE配胶,50mL/2块 2、煮胶要充分,减少蒸发、避免糊底,稍凉即可加入Goldview(5-10L/100mL) 3、倒胶时要避免产生气泡 4、待胶凝固完全后再拔出梳子 5、电泳槽一定不能短路,生物科学与工程系生物化学实验教学研究室,思 考 题,总结本实验操作的关键环节 经典失误集锦 1、使用50TAE配胶 2、将DNA Marker误用做loading buffer,生物科学与工程系生物化学实验教学研究室,再 见 !,