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1、实验十三：VC含量的测定 （2, 6-二氯靛酚法）,1. 引言 维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。,维生素C是一种水溶性维生素，在酸性介质中很稳定，既使加热也不破坏；但在碱性介质中不稳定，易于分解，特别在碱性条件下加热，可大部分或全部破坏。它们易受空气、光、热、酶、金属离子等的影响。,维生素C具有较强的还原性，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性，进一步水解则生成2, 3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。,还原型,氧化型,2. 实验原理 还原型抗坏血
2、酸能还原染料2, 6-二氯酚靛酚，本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2, 6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色 。一旦溶液中的VC全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的VC刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。,2, 6-二氯靛酚： 氧化态：深蓝色 还原态：无色 碱 性：深蓝色 酸 性：浅红色,3. 实验材料、仪器与试剂 材料：枣 仪器：三角瓶、研钵、移液管、漏斗、铁架 台、容量瓶，滴定管、分析天平 试剂： 2%草酸溶液 标准抗坏血酸溶液（0.2mg/mL） 0.02% 2, 6-二氯靛酚,4. 实验步骤 （1）样品处理：称取1g枣，放在研钵中
3、，加入少许2%草酸溶液研碎，再转入100mL容量瓶中，加2%草酸定容至刻度，过滤，弃去初滤液，用干燥的烧杯收集滤液备用。,（2）2, 6-二氯靛酚溶液的标定：取1mL标准抗坏血酸溶液于100mL三角瓶中，加入9mL 2%草酸溶液，用2, 6-二氯靛酚溶液滴定至微红色，且15s不褪色。记录消耗2, 6-二氯靛酚溶液的体积，平行操作三次，取其平均，计算出1mL染料相当于抗坏血酸的毫克数。另取2%草酸溶液10mL做空白。,滴定度T（mg/mL）=,T：每mL2, 6-二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数 C：抗坏血酸的浓度，mg/mL V：吸取抗坏血酸的体积，mL V1：滴定抗坏血酸消耗染料的体积，m
4、L V2：滴定空白消耗染料的体积，mL,（3）样品溶液的测定：吸取滤液5mL于100mL三角瓶中，加入5mL2%草酸溶液，用已标定的2, 6-二氯靛酚溶液滴定至出现微红色，且15s不褪色为止，记录消耗染料的体积，平行操作三次，取其平均。同时，取10mL2%草酸做空白实验。,5. 结果计算,T：滴定度（mg/mL） W：样品的质量（g） V1：滴定样品消耗染料的体积（mL） V2 ：滴定空白消耗染料的体积（mL） V3 ：滴定时吸取样品溶液的体积（mL） V4 ：样品定容的体积（mL）,6. 注意事项 （1）所有试剂配制最好用重蒸水。 （2）某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。 （3）提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留取上清液进行滴定。,（4）整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化，滴定过程一般不超过2min。滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL，如果样品含抗坏血酸太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。,（5）若样品滤液颜色较深，影响滴定终点观察，可加入白陶土再过滤。 （6）若样品中含有Fe2+、Cu2+、 Sn2+、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等还原性杂质时，会使结果偏高。在提取过程中，可加入EDTA等螯合剂。,
