《CN201310024053.2A 啤酒花有效部位用于制备预防及改善焦虑症及其临床症状的药物的应用 1-10》由会员分享，可在线阅读，更多相关《CN201310024053.2A 啤酒花有效部位用于制备预防及改善焦虑症及其临床症状的药物的应用 1-10（10页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、(10)申请公布号 CN 103285087 A(43)申请公布日 2013.09.11CN103285087A*CN103285087A*(21)申请号 201310024053.2(22)申请日 2013.01.23A61K 36/60(2006.01)A61P 25/22(2006.01)(71)申请人中日友好医院地址 100029 北京市朝阳区樱花东街2号(72)发明人张维库 续洁琨 李平(54) 发明名称啤酒花有效部位用于制备预防及改善焦虑症及其临床症状的药物的应用(57) 摘要本发明涉及一种啤酒花(Humunus Lupulus L)有效部位制备方法，特别是涉及了以啤酒花有效部位用
2、于制备预防和改善焦虑症及该疾病引起的各种临床症状的药物制剂。本发明中啤酒花有效部位的活性成分主要由酸、酸和黄酮组成，动物实验表明啤酒花有效部位能够降低小鼠自主运动强度，明显增加应激大鼠在迷宫开臂处逗留的时间百分比和探求开臂次数，同时还能够降低大鼠应激所致的血浆皮质醇水平、去甲肾上腺素和5-羟色胺水平。说明啤酒花有效部位能用于预防和改善焦虑症及该疾病引起的各种临床症状。(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书7页 附图1页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书7页 附图1页(10)申请公布号 CN 103285087 ACN 103285087 A1/
3、1页21.啤酒花有效部位用于制备预防和改善焦虑症及该疾病引起的各种临床症状药物的用途，所述的啤酒花有效部位的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将干燥啤酒花粉碎，加入提取溶剂进行回流提取，合并提取液，过滤，减压浓缩至无有机溶剂味后，再加入乙醇，静置过夜，取上清液，浓缩，得无有机溶剂味的浓缩液；(2)将上述浓缩液，经大孔树脂色谱柱吸附，用溶剂进行梯度洗脱，收集合并含有啤酒花有效部位的洗脱液，减压浓缩，干燥，即得啤酒花有效部位。2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(1)中使用的提取溶剂选自水、乙醇、甲醇、丙酮或它们的混合物；提取溶剂的用量为啤酒花重量的6至12倍；提取温度为60至提取溶剂的沸
4、点温度；提取次数为2至4次；每次的提取时间为1至4小时。3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(2)中所述大孔吸附树脂类型为D101、AB-8、HP-20、HPD-100、X-5、DA-201、DM-301或NKA-8；洗脱液选自醇与水的混合溶液或酮与水的混合溶液；使用的干燥方式为减压真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。4.根据权利要求1至3任意一项所述的方法，其中得到的啤酒花有效部位，其特征在于：所述的啤酒花有效部位含有活性成分酸、酸和黄酮。5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的啤酒花有效部位含有活性成分酸，主要由化合物葎草酮(humulone)、类葎草酮(cohumulone)、聚葎草
5、酮(adhumulone)组成，每克啤酒花有效部位中该3种成份含量之和不少于100毫克。6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的啤酒花有效部位含有活性成分酸，主要由化合物蛇麻酮(lupulone)、类蛇麻酮(colupulone)、聚蛇麻酮(adlupulone)组成，每克啤酒花有效部位中该3种成份含量之和不少于100毫克。7.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的啤酒花有效部位含有活性成分黄酮，主要由化合物黄腐酚(xanthohumol)和脱甲基黄腐酚(desmethylxanthohumol)组成，每克啤酒花有效部位中该2种成份含量之和不少于200毫克。8.权利要求1所述的啤
6、酒花有效部位在制备预防及改善焦虑症及其临床症状的药物中的应用。所述的药物包括有效治疗剂量的啤酒花有效部位，以及药学上可接受的载体包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、滴丸、微丸、注射剂等。权 利 要 求 书CN 103285087 A1/7页3啤酒花有效部位用于制备预防及改善焦虑症及其临床症状的药物的应用 技术领域0001 本发明涉及天然植物提取及应用，具体是涉及啤酒花(Humunus Lupulus L)有效部位用于制备抗焦虑症及其临床症状的药物的应用。 背景技术0002 焦虑症是一种常见的精神疾病，主要表现为情绪低落，兴趣减低，悲观，思维迟缓，缺乏主动性，自责自罪，饮食、睡眠差，担心自己患有各
7、种疾病，感到全身多处不适，严重者可出现自杀念头和行为。焦虑症发病率非常高，几乎每7个成年人中就有1个焦虑症患者。焦虑症目前已成为给人类造成严重负担的第二位重要疾病，对患者及其家属造成的痛苦，对社会造成的损失是其他疾病所无法比拟的。在我国，焦虑症发病率约为35，目前生活在大城市的白领们在高压力高竞争的环境下迅速成为此病的高发人群。因此，从身体健康及生活习惯角度出发，一种可以长期服用而且安全性高的用于预防及改善焦虑症的药物的研制为人们所期待。 0003 啤酒花(hops)，别名忽布、蛇麻花、香蛇麻花、酒花、野酒花，为桑科(Moraceae)葎草属植物啤酒花(Humulus lupulus L.)的
8、雌花序，原产欧洲，我国新疆有野生，东北、华北、山东等地有栽培。人类利用啤酒花的历史已有2000多年，最初是作为助消化的药品、香料和观赏植物。公元8世纪初，德国开始将啤酒花用于啤酒生产，能赋予啤酒特有的香味、爽快的苦味，并能增加啤酒的防腐能力和非生物稳定性。清代末年，啤酒花被引入我国，开始种植栽培。 0004 啤酒花亦是一种传统药用植物，性苦、平，具有健胃消食、抗菌消炎、安神利尿、抗结核等药用功效，用于治疗消化不良、浮肿、小便淋痛、失眠、痢疾、结核、麻风等。中国药典1977年版上记载酒花的乙醇浸膏用于治疗肺结核病和麻风病等症。啤酒花的化学成分主要有树脂、挥发油、黄酮及鞣质等。 0005 近年来，
9、对啤酒花提取物或其中含有的化合物药理作用研究的报道多集中在抗菌、抗肿瘤、抗氧化、镇静和雌激素样作用等方面，临床应用主要在结核病、麻风病和内分泌紊乱方面，但以酸、酸和黄酮为活性成分的啤酒花有效部位对预防和改善焦虑症及其临床症状的作用尚未报道。 发明内容0006 本发明的一方面提供了一种从啤酒花中提取制备啤酒花有效部位的方法和以啤酒花有效部位为原料的药物在预防、改善焦虑症及其临床症状方面的新用途。 0007 本发明的另一方面涉及包含啤酒花有效部位的药物制剂。 0008 本发明的又一个方面涉及包含啤酒花有效部位的药物制剂的制备方法。 0009 为解决本发明的技术问题，本发明采用如下技术方案： 001
10、0 一种从啤酒花中提取啤酒花有效部位的方法，其特征在于包括以下步骤： 说 明 书CN 103285087 A2/7页40011 (1)将干燥啤酒花粉碎，加入提取溶剂进行回流提取，合并提取液，过滤，减压浓缩至无有机溶剂味后，再加入乙醇，静置过夜，取上清液，浓缩，得无有机溶剂味的浓缩液； 0012 (2)将上述浓缩液，经大孔树脂色谱柱吸附，用溶剂进行梯度洗脱，收集合并含有啤酒花有效部位的洗脱液，减压浓缩，干燥，即得啤酒花有效部位。 0013 在一个优选的实施方式中，步骤(1)中使用的提取溶剂选自水、乙醇、甲醇、丙酮或它们的混合物；优选为水、乙醇、甲醇或它们的混合物，提取溶剂的浓度为优选50至100
11、；提取溶剂的用量为啤酒花重量的6至12倍；提取温度为60至提取溶剂的沸点温度；提取次数为2至4次；每次的提取时间为1至4小时；加入乙醇，使得乙醇浓度优选40至80。 0014 在另一个优选的实施方式中，步骤(2)中所述大孔吸附树脂类型选自D101、AB-8、HP-20、HPD-100、X-5、DA-201、DM-301或NKA-8等；优选D101、AB-8或HP-20大孔吸附树脂；洗脱液选自不同浓度的醇与水的混合溶液或酮与水的混合溶液；优选为不同浓度的乙醇-水或甲醇-水溶液；大孔树脂色谱柱采用梯度洗脱，先用1030乙醇-水或1030甲醇-水洗脱除去杂质后，再用95乙醇-水或95甲醇-水洗脱，即
12、得啤酒花有效部位；得到啤酒花有效部位的干燥方式选自减压真空干燥、冷冻干燥、喷雾干燥。 0015 本发明所述的啤酒花有效部位包括酸、酸和黄酮，其中酸主要由化合物葎草酮(humulone)、类葎草酮(cohumulone)、聚葎草酮(adhumulone)组成，酸主要由化合物蛇麻酮(lupulone)、类蛇麻酮(colupulone)、聚蛇麻酮(adlupulone)组成，黄酮主要由化合物黄腐酚(xanthohumol)和脱甲基黄腐酚(desmethylxanthohumol)组成。 0016 本发明还涉及以啤酒花有效部位为原料药制备的药物制剂，所述制剂包括啤酒花有效部位以及药学上可接受的载体和/
13、或辅料，所述制剂可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、滴丸、微丸、注射剂等药学上可以接受的药物制剂形式。 0017 所述包含啤酒花有效部位的药物制剂可以利用本领域公知的方法制备得到。 0018 本发明还以小鼠自主活动实验，以及以束缚应激(restraint stress)负荷小鼠作为应激实 验模型，以高架十字迷宫评价啤酒花有效部位对小鼠行为学及血浆皮质醇，脑中单胺类神经递质的影响。结果显示，啤酒花有效部位具有较明显的镇静作用，且对应激负荷诱发的小鼠焦虑行为、血浆皮质醇升高及脑中单胺类神经递质的变化表现出统计学上有意义的改善效果。基于上述结果，确认本发明所述的以酸、酸和黄酮为有效成分的啤酒花有效部
14、位的新用途的成立。 0019 根据上述实验可以证明本发明提供啤酒花有效部位是一种安全性高，源于天然，具有预防和改善焦虑症及其临床症状效果的植物提取物，可以用于制备可以长期服用、安全无毒副作用的药物。 0020 说明书附图 0021 图1为啤酒花有效部位的HPLC图，其中测定方法为：检测系统：Aglient1260；色谱柱：Phenomenex Luna C18(4.6250mm，5m)；流动相：0.1甲酸水(A)-甲醇(B)，洗脱条件为0-3min(AB5545)；3-32min(AB5545AB595)；32-37min(AB595)；37-45min(AB595AB5545)；45-47m
15、in(AB5545)；进样量：10L；流速：1.0mL/min；检测波长：370nm；柱温：25。 0022 图2是啤酒花有效部位对正常小鼠自主活动的影响结果图。 说 明 书CN 103285087 A3/7页5具体实施方式0023 下面的实施例用于进一步说明本发明，但这并不意味着对本发明的保护范围的任何限制。 0024 实施例1啤酒花有效部位的制备 0025 将干燥啤酒花粉碎，加入6倍的50乙醇回流提取4次，每次提取的时间依次为4，3，2，1小时，合并提取液，过滤，减压浓缩至无醇味，加95乙醇，边加边搅拌，至乙醇浓度为50，静置过夜，取上清液，减压浓缩至无乙醇味，上D101型大孔树脂色谱柱吸
16、附，分别用20、95乙醇洗脱，收集95乙醇洗脱液，减压回收有机溶剂，减压干燥，即得啤酒花有效部位。 0026 实施例2啤酒花有效部位的制备 0027 将干燥啤酒花粉碎，加入10倍的80乙醇回流提取3次，每次提取的时间依次为4，3， 2小时，合并提取液，过滤，减压浓缩至无醇味，加95乙醇，边加边搅拌，至乙醇浓度为70，静置过夜，取上清液，减压浓缩至无乙醇味，上AB-8型大孔树脂色谱柱吸附，分别用15、95乙醇洗脱，收集95乙醇洗脱液，减压回收有机溶剂，喷雾干燥，即得啤酒花有效部位。 0028 实施例3啤酒花有效部位的制备 0029 将干燥啤酒花粉碎，加入12倍的95甲醇回流提取3次，每次提取的时间依次为4，3，2小时，合并提取液，过滤，减压浓缩至无醇味，加95乙醇
