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1、(10)申请公布号 CN 102864079 A(43)申请公布日 2013.01.09CN102864079A*CN102864079A*(21)申请号 201210054219.0(22)申请日 2012.02.29C12N 1/06(2006.01)A23L 1/22(2006.01)C12R 1/865(2006.01)C12R 1/23(2006.01)C12R 1/07(2006.01)(71)申请人珠海市康益达生物科技有限公司地址 519000 广东省珠海市金湾区金海岸大道（金海岸生物科技园）15号(72)发明人董燕声 周宁 莫东琰(74)专利代理机构广东秉德律师事务所 4429
2、1代理人杨焕军(54) 发明名称一种对啤酒酵母进行破壁的方法(57) 摘要本发明涉及一种对啤酒酵母进行破壁的方法，包括以下步骤：(1)洗涤过筛除杂；(2)调制酵母液；(3)加热灭菌；(4)自然降温；(5)添加水解酶；(6)恒温水解破壁；(7)加热灭酶。本发明方法具有以下特点：酵母细胞壁破壁率达到90，而且，破壁的主流程时间缩短为7h左右，相对以往的方法，时间较短。(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书4页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 4 页1/1页21.一种对啤酒酵母进行破壁的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)通过加水搅拌、离心脱
3、水的流程，将啤酒酵母下脚料洗涤至无啤酒味，然后过70目筛，得经洗涤、过筛的啤酒酵母泥；(2)往水解罐中加入经洗涤、过筛的啤酒酵母泥及干净的水，啤酒酵母泥与水的重量比例为14，开动搅拌机，100转/Min搅拌0.5小时；(3)启动加热装置，在0.3小时-0.5小时内将水解罐中内容物均衡加热到90，然后保持水解罐中内容物的温度900.5小时；(4)自然降温至52；(5)往内容物添加多元水解酶，多元水解酶的重量比内容物的重量为0.011，其中，每克多元水解酶含有：酶活力为10-500U的酵母细胞溶解酶、酶活力为100-8000U的木瓜水解蛋白酶、酶活力为10-500U的淀粉酶、酶活力为100-300
4、U的葡聚糖酶；(6)保持50恒温5.5小时；(7)升温90，保持0.5小时。2.一种对啤酒酵母下脚料进行处理以使可再利用的方法，其特征在于，包括破壁步骤和益生菌发酵步骤，其中，所述破壁步骤包括：(101)通过加水搅拌、离心脱水的流程，将啤酒酵母下脚料洗涤至无啤酒味，然后过70目筛，得经洗涤、过筛的啤酒酵母泥；(102)往水解罐中加入经洗涤、过筛的啤酒酵母泥及干净的水，啤酒酵母泥与水的重量比例为14，开动搅拌机，100转/Min搅拌0.5小时；(103)启动加热装置，在0.3小时-0.5小时内将水解罐中内容物均衡加热到90，然后保持水解罐中内容物的温度900.5小时；(104)自然降温至52；(
5、105)往内容物添加多元水解酶，多元水解酶的重量比内容物的重量为0.011，其中，每克多元水解酶含有：酶活力为10-500U的酵母细胞溶解酶、酶活力为100-8000U的木瓜水解蛋白酶、酶活力为10-500U的淀粉酶、酶活力为100-300U的葡聚糖酶；(106)保持50恒温5.5小时；(107)升温90，保持0.5小时；所述益生菌发酵步骤包括：(201)对步骤(107)得到的溶液进行控温至37，调整PH值至4.5-6；(202)接菌种：加入菌液，菌液的体积与酵母溶液的体积之比为0.1-1，菌液的活菌由数量各占一半的嗜酸乳酸杆菌和纳豆菌组成，菌液活菌量为21010CFU/L；(203)发酵：保
6、持3732-40小时。权 利 要 求 书CN 102864079 A1/4页3一种对啤酒酵母进行破壁的方法【 技术领域 】0001 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种对啤酒酵母细胞进行破壁的方法及破壁后的加工方法。【 背景技术 】0002 我国啤酒行业历经多年的快速发展现有啤酒企业多家年生产能力万吨产生啤酒废酵母万吨。如果不对这些废弃物进行综合利用势必造成资源的浪费和环境的严重污染。0003 酵母菌是一种单细胞真核微生物，酵母细胞质含有丰富的营养物质，如蛋白质、核糖核酸、B族维生素以及丰富的氨基酸等。酵母细胞壁的-(1，3)-葡聚糖能增强哺乳动物的免疫活力、抗癌、抗细菌、抗病毒、抗真菌、抗寄
7、生虫、降低胆固醇和血脂、促进伤口愈合等能力，是一种良好的生物效应调节剂。因此，对酵母细胞破壁裂解后，可以释放出胞内营养物质。0004 由于酵母有比较坚实的细胞壁，其细胞内的物质不易释放出来，不能被动物很好的吸收利用，人们早就知道利用酵母细胞的自溶作用来瓦解细胞作为获取胞内组分的有效手段。细胞自溶由于在一定条件下触发了细胞能消化自身结构的自溶酶的分解作用所致，但酵母细胞的自溶是受一定限制的。0005 为了更好地提取分离酵母中的有效成分，国内外学者进行了大量的试验研究，从而产生了几种革新的方法。这些方法包括：0006 用溶菌酶和葡聚糖酶消化完整的酵母(FUNATSU等，1978；KNORR等197
8、9)；0007 添加能够作用于析出细胞外的蛋白质的蛋白质分解酶(BAVISOTTA，1965；KNORR等，1979B)；0008 细胞的机械破碎和粉碎(WISEMAW，1969；LIRDBLOM，1974，1977；MOGRW等，1974；NEWELL等，1975；ROBBINS和SEELEY，1978)。0009 但是，上述三种方法均存在一个共同的局限性：破壁时间长10-48h。0010 另外酵母破壁后的酵母内容物含有丰富的蛋白质、核酸、维生素、矿物质等多种营养成分，可产生干酪味、鲜肉味、香味等特殊风味，它作为一种天然风味物质早在1973年已被美国食品与药品管理局批准为调味品应用于多种食品
9、加工工艺中(A non.Federal Register，1973)。但目前国内酵母加工企业将破壁后的酵母内容物直接作为酵母调味品，酵母味道重，鲜味不足。【 发明内容 】0011 本发明要解决的技术问题是提供一种高效、快速地对啤酒酵母进行破壁的方法。0012 上述技术问题通过以下技术方案实现：0013 一种对啤酒酵母进行破壁的方法，其特征在于，包括以下步骤：0014 (1)通过加水搅拌、离心脱水的流程，将啤酒酵母下脚料洗涤至无啤酒味，然后过70目筛，得经洗涤、过筛的啤酒酵母泥；说 明 书CN 102864079 A2/4页40015 (2)往水解罐中加入经洗涤、过筛的啤酒酵母泥及干净的水，啤酒
10、酵母泥与水的重量比例为14，开动搅拌机，100转/Min搅拌0.5小时；0016 (3)启动加热装置，在0.3小时-0.5小时内将水解罐中内容物均衡加热到90，然后保持水解罐中内容物的温度900.5小时；0017 (4)自然降温至52；0018 (5)往内容物添加多元水解酶，多元水解酶的重量比内容物的重量为0.011，其中，每克多元水解酶含有：酶活力为10-500U的酵母细胞溶解酶、酶活力为100-8000U的木瓜水解蛋白酶、酶活力为10-500U的淀粉酶、酶活力为100-300U的葡聚糖酶；0019 (6)保持50恒温5.5小时；0020 (7)升温90，保持0.5小时。0021 本发明方法
11、具有以下特点：酵母细胞壁破壁率达到90，而且，破壁的主流程时间(步骤(3)至步骤(6)的时间)缩短为7h左右，相对以往的方法，时间较短。0022 本发明还提供一种对啤酒酵母下脚料进行处理以使可再利用的方法，其特征在于，包括破壁步骤和益生菌发酵步骤，其中，0023 所述破壁步骤包括：0024 (101)通过加水搅拌、离心脱水的流程，将啤酒酵母下脚料洗涤至无啤酒味，然后过70目筛，得经洗涤、过筛的啤酒酵母泥；0025 (102)往水解罐中加入经洗涤、过筛的啤酒酵母泥及干净的水，啤酒酵母泥与水的重量比例为14，开动搅拌机，100转/Min搅拌0.5小时；0026 (103)启动加热装置，在0.3小时
12、-0.5小时内将水解罐中内容物均衡加热到90，然后保持水解罐中内容物的温度900.5小时；0027 (104)自然降温至52；0028 (105)往内容物添加多元水解酶，多元水解酶的重量比内容物的重量为0.011，其中，每克多元水解酶含有：酶活力为10-500U的酵母细胞溶解酶、酶活力为100-8000U的木瓜水解蛋白酶、酶活力为10-500U的淀粉酶、酶活力为100-300U的葡聚糖酶；0029 (106)保持50恒温5.5小时；0030 (107)升温90，保持0.5小时；0031 所述益生菌发酵步骤包括：0032 (201)对步骤(107)得到的溶液进行控温至37，调整PH值至4.5-6
13、；0033 (202)接菌种：加入菌液，菌液的体积与酵母溶液的体积之比为0.1-1，菌液的活菌由数量各占一半的嗜酸乳酸杆菌和纳豆菌组成，菌液活菌量为21010CFU/L；0034 (203)发酵：保持3732-40小时。0035 本发明方法综合了破壁步骤和益生菌发酵步骤以实现对啤酒酵母下脚料进行处理以使可再利用，尤其是益生菌发酵步骤，其对酵母破壁后得到的内容物进行二次发酵，气味香，味道鲜，解决目前酵母调味品酵母味道重、香味不足的问题。【 具体实施方式 】说 明 书CN 102864079 A3/4页50036 实施例一0037 处理流程0038 一种对啤酒酵母进行破壁的方法，包括以下步骤：00
14、39 (1)通过加水搅拌、离心脱水的流程，将啤酒酵母下脚料洗涤至无啤酒味，然后过70目筛，得经洗涤、过筛的啤酒酵母泥；0040 此步骤的作用：去除杂味和颗粒杂质；0041 (2)往水解罐中加入经洗涤、过筛的啤酒酵母泥及干净的水，啤酒酵母泥与水的重量比例为14，开动搅拌机，100转/Min搅拌0.5小时；0042 (3)启动加热装置，在0.3小时-0.5小时内将水解罐中内容物均衡加热到90，然后保持水解罐中内容物的温度900.5小时；0043 此步骤的作用：对水解罐及其内容物进行灭菌；0044 (4)自然降温至52；0045 此步骤的作用：将温度降至水解酶发挥酶解作用的适温；0046 (5)往内
15、容物添加多元水解酶，多元水解酶的重量比内容物的重量为0.011，其中，每克多元水解酶含有：酶活力为10-500U的酵母细胞溶解酶、酶活力为100-8000U的木瓜水解蛋白酶、酶活力为10-500U的淀粉酶、酶活力为100-300U的葡聚糖酶；0047 (6)保持50恒温5.5小时；0048 此步骤的作用：恒温水解破壁；0049 (7)升温90，保持0.5小时；0050 此步骤的作用：将酶灭活，以稳定破壁产物的理化性。0051 处理结果0052 本申请的设计人采用上述处理方法分别对4种不同批次的啤酒酵母下脚料进行处理，处理结果的数据如下：0053 0054 说明：0055 破壁率(破壁前单位体积完整酵母细胞个数-破壁后单位体积完整酵母细胞个数)/破壁前单位体积完整酵母细胞个数100；0056 破壁前是指处理流程中的第(2)个步骤完成后、第(3)步骤开始之前；说 明 书CN 102864079 A4/4页60057 破壁后是指前表中的第(6)个步骤完成后，即恒温水解破壁5.5个小时后；0058 破壁前后酵母细胞的计数，采用血球计数板法。0059 由上述数据可见，酵母细胞壁破壁率达到90，而且，破壁的主流程时间(步骤(3)至步骤(6)的时间)缩短为7h左右，相对以往的方法，时间较短。0060 实施例二0061 为了使破壁释放出的
