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1、(10)申请公布号 CN 102757904 A(43)申请公布日 2012.10.31CN102757904A*CN102757904A*(21)申请号 201110103229.4(22)申请日 2011.04.25C12N 1/16(2006.01)(71)申请人广州珠江啤酒股份有限公司地址 510315 广东省广州市新港东路磨碟沙(72)发明人李惠萍 田小群 陈江 梁奋涂京霞(74)专利代理机构广州新诺专利商标事务所有限公司 44100代理人李德魁 李国钊(54) 发明名称利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法(57) 摘要本发明公开了一种利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法。其由如下步骤组
2、成：A、按每300毫升水加入0.10.3毫升啤酒复合酶，调节pH值为5.66.0，然后加入2060克啤酒废酵母，在3846的温度下保温60120分钟，得混合物A，其中啤酒废酵母的含水量为7580；B、于混合物A中加入6080克大米粉、0.240.36克氯化钙、0.240.36克氯化镁和0.20.5毫升液化酶，搅拌均匀并调节pH值为6.26.4，然后升温至9295并保持不少于30分钟，得混合物B；C、将混合物B降温至6065，加入2.04.0毫升糖化酶，调整pH为4.55.0，在此温度保持34小时，得混合物C；D、混合物C经碘检合格后，过滤除渣得清液。本发明的酵母培养基营养成份全面，可取代日常检
3、测酵母菌的12P麦汁培养基，降低了检测成本。(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书3页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 3 页1/1页21.利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法，其特征在于，由如下步骤组成：A、按每300毫升水加入0.10.3毫升啤酒复合酶，调节pH值为5.66.0，然后加入2060克啤酒废酵母，在3846的温度下保温60120分钟，得混合物A，其中啤酒废酵母的含水量为7580；B、于混合物A中加入6080克大米粉、0.240.36克氯化钙、0.240.36克氯化镁和0.20.5毫升液化酶，搅拌均匀并调节pH值为6.26.4
4、，然后升温至9295并保持不少于30分钟，得混合物B；C、将混合物B降温至6065，加入2.04.0毫升糖化酶，调整pH为4.55.0，在此温度保持34小时，得混合物C；D、混合物C经碘检合格后，过滤除渣得清液。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，A步骤中，采用磷酸调节pH值，磷酸的用量为0.010.05毫升。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，A步骤中，啤酒复合酶内至少包含-葡聚糖酶和蛋白酶。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，A步骤中，啤酒复合酶还包含木聚糖酶、纤维素酶和淀粉酶。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，B步骤中，采用磷酸或碳酸钠调节pH值。6.根据权利要
5、求1所述的方法，其特征在于，C步骤中，采用磷酸调节pH值。权 利 要 求 书CN 102757904 A1/3页3利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法技术领域0001 本发明属于生化提取领域，具体涉及一种利用啤酒废酵母溶解产生氨基酸并以此氨基酸作为氮源制备酵母培养基的的方法。背景技术0002 啤酒废酵母是啤酒酿造过程产生的副产物，生产100吨吨啤酒可得到含水分7580的啤酒废酵母约1.5吨。酵母含有丰富的蛋白质和各种分解酶系，通过酵母溶解可以获得丰富的氨基酸，是一种营养好、价格低的蛋白质源；此外啤酒酵母细胞内还含有各种维生素、麦角子甾醇及铬、硒等微量元素。然而，目前尚无相关技术对啤酒废酵母进行处
6、理以废物利用。发明内容0003 本发明的目的在于提供一种利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法，以进行废物利用，降低啤酒的生产成本，增加附加值。0004 为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：0005 利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法，由如下步骤组成：0006 A、按每300毫升水加入0.10.3毫升啤酒复合酶，调节pH值为5.66.0，然后加入2060克啤酒废酵母，在3846的温度下保温60120分钟，得混合物A，其中啤酒废酵母的含水量为7580；0007 B、于混合物A中加入6080克大米粉、0.240.36克氯化钙、0.240.36克氯化镁和0.20.5毫升液化酶，搅拌均匀并调节pH值为
7、6.26.4，然后升温至9295并保持不少于30分钟，得混合物B；0008 C、将混合物B降温至6065，加入2.04.0毫升糖化酶，调整pH为4.55.0，在此温度保持34小时，得混合物C；0009 D、混合物C经碘检合格后，过滤除渣得清液。0010 作为优选，A步骤中，采用磷酸调节pH值，磷酸的用量为0.010.05毫升。0011 作为优选，A步骤中，啤酒复合酶内至少包含-葡聚糖酶和蛋白酶。进一步优选，啤酒复合酶还包含木聚糖酶、纤维素酶和淀粉酶。该啤酒复合酶的适用温度为4065，最适pH值为5.56.5。0012 作为优选，B步骤中，采用磷酸或碳酸钠调节pH值。0013 作为优选，C步骤中
8、，采用磷酸调节pH值。0014 通过本发明获得的酵母培养基营养成份全面，可取代日常检测酵母菌的12 P麦汁培养基，降低了检测成本。具体实施方式0015 本发明所使用的啤酒废酵母的含水量为7580。本发明的啤酒复合酶采用说 明 书CN 102757904 A2/3页4广州裕立宝生物科技有限公司的啤酒复合酶；液化酶采用杰能科公司的耐高温淀粉酶；糖化酶采用广州裕立宝生物科技有限公司的糖化复合酶。0016 实施例10017 酵母培养基的制备步骤为：0018 A、在烧杯中加入300ml水，添加啤酒复合酶0.10.3ml，用磷酸(用量0.010.05毫升)调整pH为5.66.0，啤酒废酵母的添加量为20克
9、，于3846的温度下保温120分钟；0019 B、加入70克大米粉，0.3克氯化钙，0.3克氯化镁和0.4毫升液化酶，用磷酸或碳酸钠调节pH值6.26.4，搅拌均匀，升温至9295，在此温度保持30分钟；0020 C、降温至60-65，加入3.0毫升糖化酶，调整pH为4.55.0，在此温度保持3-4小时；0021 D、碘检合格后，过滤除渣得清液。0022 经检测上述清液的氨基氮含量为约11.6mg/100ml，收得率为0.67。0023 实施例20024 A、在烧杯中加入300ml水，添加啤酒复合酶0.10.3ml，用磷酸(用量0.010.05毫升)调整pH为5.66.0，啤酒废酵母的添加量为
10、40克，于3846的温度下保温120分钟；0025 B、加入70克大米粉，0.3克氯化钙，0.3克氯化镁和0.4毫升液化酶，用磷酸或碳酸钠调节pH值6.26.4，搅拌均匀，升温至9295，在此温度保持30分钟；0026 C、降温至60-65，加入3.0毫升糖化酶，调整pH为4.55.0，在此温度保持3-4小时；0027 D、碘检合格后，过滤除渣得清液。0028 经检测上述清液的氨基氮含量为约15.1mg/100ml，收得率为0.55。0029 实施例30030 A、在烧杯中加入300ml水，添加啤酒复合酶0.10.3ml，用磷酸(用量0.010.05毫升)调整pH为5.66.0，啤酒废酵母的添
11、加量为40克，于3846的温度下保温120分钟；0031 B、加入70克大米粉，0.3克氯化钙，0.3克氯化镁和0.4毫升液化酶，用磷酸或碳酸钠调节pH值6.26.4，搅拌均匀，升温至9295，在此温度保持30分钟；0032 C、降温至60-65，加入3.0毫升糖化酶，调整pH为4.55.0，在此温度保持3-4小时；0033 D、碘检合格后，过滤除渣得清液。0034 经检测上述清液的氨基氮含量为约17.9mg/100ml，收得率为0.48。0035 将上述实施例13所述清液及12P麦汁(氨基氮含量为约13.1mg/100ml)分别制成琼脂平板，对酵母菌进行25培养。结果见表1。0036 表1：
12、不同培养基对酵母生长的影响0037 说 明 书CN 102757904 A3/3页50038 从表1可知，本发明的酵母培养基与12P麦汁培养基的功效相当，可取代12P麦汁培养基作为实验室常用的酵母培养基。0039 本发明利用啤酒废酵母在适当的温度条件下，借助啤酒复合酶的作用，溶解酵母产生氨基酸等营养物质，所得的含氮溶液与大米粉糊相混合，按照糊化、液化、糖化的温度曲线将大米粉糖化完全，制成营养成份全面的培养基，可取代日常检测酵母菌常用的12 P麦汁培养基，降低了检测成本。0040 以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的构思和范围进行限定，在不脱离本发明涉及方案前提下，本领域技术人员对本发明的技术方案作出的各种变型和改进，均应落入本发明的保护范围。说 明 书CN 102757904 A
