高考生物冲刺复习 专题26 传统发酵技术与微生物的应用课件

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1、专题26 传统发酵技术与微生物的应用,考点1 传统发酵技术 一、果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作比较,知识清单,知能拓展 1.发酵利用的是微生物的呼吸作用,不只是细菌的呼吸作用。发酵微生物细菌, 如酵母菌、毛霉等也都是发酵常用菌种。 2.对于发酵中的数字的记忆:发酵温度(果酒1825 ,果醋3035 )、装瓶体积不超过2/3、消 毒用体积分数为70%的酒精、冲洗次数12次。 3.充气:酒精发酵为无氧发酵,需封闭充气口;醋酸发酵为有氧发酵,需不断通过充气口充气。 4.亚硝酸盐在制作泡菜的整个发酵过程中含量的变化趋势 二、果酒、果醋发酵装置的设计思路 1.因酵母菌的繁殖需要 空气 ,醋酸菌是 好氧 菌

2、,所以在果酒制作的前期和果醋制作的整 个过程中都需 氧 。,因酵母菌在 无氧 条件下产生酒精,应控制充入氧的量,故应在充气口设置开关。 2.由于在发酵过程中都产生CO2 ,因此又需设置 排气口 ;为了防止空气中微生物的污染,排气 口应连接一个长而弯曲的胶管。 3.因要对发酵的情况进行及时 监测 ,应设置出料口便于取料。 4.果酒和果醋的发酵装置及各个部件的作用,例1 (2013课标,39,15分)回答下列有关泡菜制作的问题: (1)制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目的是 。为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的 盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的作用是 。 (2)泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程

3、即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸 菌细胞的 中。 (3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。 (4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内,泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其 他杂菌的消长规律是 ,原因是 。 解析 本题主要考查泡菜制作的原理和方法。(1)泡菜制作时,所用盐水煮沸可杀灭杂菌;由于 陈泡菜液中含有较多的乳酸菌,所以制作泡菜时加入少量陈泡菜液可增加发酵过程中乳酸菌的 数量,从而缩短制作时间。(2)乳酸菌发酵属于无氧呼吸,乳酸菌进行无氧呼吸的场所是细胞 质。(3)泡菜制作过程中,温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短容易造成细菌大量繁殖,亚 硝酸盐含量增加

4、,故制作时要注意控制温度、腌制时间、食盐用量等条件。(4)泡菜制作过程 中,由于乳酸菌发酵产生乳酸,泡菜液逐渐变酸,从而抑制了杂菌的繁殖,杂菌数量减少。,答案 (1)杀灭杂菌 增加乳酸菌数量 (2)无氧呼吸 细胞质 (3)温度 腌制时间 食盐用量 (4)乳酸菌数量增多,杂菌数量减少 乳酸菌比杂菌更为耐酸,考点2 微生物的培养与应用 一、微生物的分离与培养 1.培养基的制备:计算称量 溶化 灭菌 倒平板 2.培养基类型及作用,3.无菌技术,主要指消毒与灭菌,4.倒平板操作:待培养基冷却至 50 左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,严格遵循教材上的 操作步骤。 5.平板划线操作:平板划线法是通过接种环

5、在琼脂固体培养基表面 连续划线 的操作,将聚集 的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 6.稀释涂布平板法:先将菌液进行系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体,培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细 胞,从而能在培养基表面形成单个的 菌落 。 知能拓展 1.选择培养基中的选择因素 (1)培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 (2)培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 (3)当培养基中缺乏氮源时,可以分离出固氮微生物,因为非固氮微生物不能在此类培养基上生 存。 (4)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如

6、石油是唯一碳源时,可以 抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的 微生物的目的。,(5)改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目的,如将培养基放在高温环境中培养只 能得到耐高温的微生物。,2.两种纯化细菌的方法的比较,3.减少失误 (1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基,因为菌落只能在固体培养基上形成。 (2)平板划线法只适用于微生物的提纯,不适合进行计数,并且在最后一次划线的末端处的菌种 最纯,进行平板划线时应注意如下操作: 每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。 灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。 划线时最后

7、一区域不要与第一区域相连。,(3)倒平板的温度一般在50 左右适宜,温度过高会烫手,过低培养基又会凝固。 (4)平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又防止培养皿盖上的水珠落入培养 基,造成培养基污染。 二、微生物的鉴定 1.鉴定分解尿素的细菌的方法:在以 尿素 为唯一氮源的培养基中加入 酚红 指示剂,指示 剂若变红说明该种菌能分解尿素。 2.鉴定纤维素分解菌的方法:利用 刚果红 染色法,如果培养基中出现 透明圈 ,则说明很可,能含有纤维素分解菌。 纤维素分解菌的筛选原理:刚果红可以与像 纤维素 这样的多糖物质形成红色复合物,但并不 和水解后的 纤维二糖和葡萄糖 发生这种反应。 三

8、、微生物的筛选及计数 1.土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案 (1)土壤取样:采集土样时,应选择 富含纤维素 的环境。,(2)选择培养:称取土样20 g,在无菌条件下加入装有30 mL培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇 床上,在一定温度下振荡培养12 d,直至培养液变浑浊。选择培养的目的是 增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物 。 (3)梯度稀释:依次将培养液稀释102107倍。 (4)将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,30 倒置培养。 (5)挑选 产生透明圈 的菌落,即为分解纤维素的菌落。 2.统计微生物数目的方法 (1)显微镜直接计数法,原理:利用特定细菌计

9、数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 方法:用计数板计数。 缺点:不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) 原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活 菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。,计算公式:每克样品中的菌株数=(CV)M,其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落 数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。 操作:设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落 数在30300的平板进行计数。 例2 (2016青海油田一中冲刺卷,3

10、9)有些微生物能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究,使 人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝 酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答,问题: (1)培养基中加入的化合物A是 ,为微生物的生长提供 ,这种培养基属于 培养基。 (2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物,向培养基中加入 。 (3)在筛选出能产生纤维素的微生物之前,可用液体培养基培养,增加微生物的浓度。为获得纯 净的菌株,常采用平板划线法进行接种,此过程所用的接种工具是 ,操作时采用 灭菌的方法;还可用 (方法)操作。,(4)实验结束后,使用过的

11、培养基应该进行灭菌处理才能倒掉,这样做的目的是 。 解析 (1)要筛选出产生纤维素酶的微生物,应使用选择培养基,在培养基中加入纤维素,纤维素 作为微生物生长的唯一碳源。(2)刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,而不与其水解 后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应,当纤维素被纤维素分解酶分解后,培养基中会形成以纤维 素分解菌为中心的透明圈。(3)常用平板划线法和稀释涂布平板法进行接种,用平板划线法接种 时要用接种环在固体培养基表面连续划线,以便使菌种分散在培养基的表面。操作时,接种环采,用灼烧灭菌法灭菌。(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉,以防止因实 验菌进入外界环境而造成污染。 答案 (1)纤维素 碳源 选择 (2)刚果红 (3)接种环 灼烧 稀释涂布平板法 (4)防止造成环境污染,

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