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1、我带领班子成员及全体职工，积极参加县委、政府和农牧局组织的政治理论学习，同时认真学习业务知识，全面提高了自身素质，增强职工工作积极性，杜绝了纪律松散第一部分 微生物的利用 第二部分 酶的应用(时间：90分钟，满分：100分)一、选择题(本题包括15小题，每小题2分，共30分)1.微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是()A.细菌的大小、形状、颜色B.菌落的大小、形状、颜色C.有无鞭毛D.培养基的不同答案B解析微生物的鉴别和分离，一般要用固体培养基，由于不同微生物在固体培养基上长出的菌落的形状、颜色等各不相同，所以可以作为鉴别的标准。而每一个细菌细胞很小，肉眼无法看到其颜
2、色、形状等。2.在分解尿素的细菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基的叙述正确的是()A.加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基B.加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基C.加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基D.加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基答案C解析能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌；细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。3.下列关
3、于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是()A.细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B.噬菌体或大肠杆菌可在固体培养基上迅速增殖形成菌落C.灭菌的目的是消灭与培养微生物竞争的杂菌D.涂布分离法分散细菌得到单菌落的效果更好答案B解析噬菌体是病毒，不能直接在培养基上繁殖，必须在宿主细胞内才能增殖。4.下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是()A.操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B.划线操作须在火焰上进行C.在5区域中才能得到所需菌落D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌答案D解析操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌，A项错误；划线操作须
4、在火焰旁进行，B项错误；在5区域中最有可能得到所需菌落，其他区域也可能存在单菌落，C项错误；在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌，D项正确。5.在细菌培养过程中，下列有关操作正确的是()A.使用已灭菌的玻璃刮刀、培养皿，操作过程中不再灭菌B.培养基分装到培养皿后进行灭菌C.倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行D.分离得到的菌落应先接种在平板上，培养24 h后，置于4 冰箱保存答案C解析玻璃刮刀在操作过程中需灼烧灭菌，A项错误；培养基应该先灭菌后分装，B项错误；倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行，以防止杂菌污染，C项正确；分离得到的菌落应先接种于斜面上，置于37 的恒
5、温箱培养24 h后，再置于4 冰箱保存，D项错误。6.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是()A.筛选出能分解尿素的细菌B.对分离的菌种作进一步鉴定C.作细菌的营养成分D.如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素答案B解析筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可，不需要加指示剂。加入指示剂的培养基，目的都是对要分离的菌种作进一步的鉴定。7.研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将从大肠杆菌中提取的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成的制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的()A.温度 B.pHC.水分 D.营养答案D解析微生物降解有机磷
6、农药时，需要营养物质，而固定化酶却不需要营养物质。8.尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时()A.葡萄糖在培养基中含量越多越好B.尿素在培养基中含量越少越好C.尿素分解菌有固氮能力，培养基中的尿素为无机氮D.尿素分解菌无固氮能力，培养基中的尿素为有机氮答案D解析葡萄糖是微生物最常用的碳源，但在培养基中不能加入过多，否则，会使细胞无法吸水而死亡；尿素在培养基中可以提供氮源，加入要适量而非越少越好；同时尿素是尿素分解菌的有机氮源，而不是无机氮源，在分解过程中，尿素会被尿素分解菌分解为氨。9.分离以尿素为氮源的微生物实验中，全营养LB固体培养的作用是()A.扩大培养尿素分解菌B.分离尿素分解菌
7、C.作为对照，用来判断选择培养基(尿素固体培养基)是否起到了选择作用D.没有具体作用答案C解析在LB培养基和尿素培养基上接种等量微生物，结果经培养后LB培养基上有较多菌落，而尿素培养基上只有少量菌落，从而说明尿素培养基起到了选择作用。10.下列说法正确的是()A.植物、霉菌、酵母菌和细菌等所有生物活细胞均能产生果胶酶B.由酵母菌发酵生产的果胶酶是食品工业中使用量最大的酶制剂之一C.果胶酶是分解果胶的一类酶的总称D.温度过高或过低，果胶酶都会丧失活性答案C解析植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶，并不是所有生物活细胞均能产生果胶酶；霉菌发酵生产的果胶酶是食品工业中使用量最大的酶制剂之一；温度过
8、低，果胶酶不会丧失活性。11.固定化酶的优点是()A.有利于酶的活性发挥 B.有利于产物的纯化C.有利于提高反应速度 D.有利于酶发挥作用答案B解析固定化酶的制作目的是降低生产成本。一是能够顺利地从发酵产物中把酶分离出来，二是使酶可以反复利用。从题目中看出，选项B是正确的。酶的固定化，对酶的活性、酶作用的发挥、反应速度的提高，并没有多大作用。12.下列说法中，不属于在应用酶的过程中常遇见的一些实际问题的是()A.酶与反应物混合，产品难以提纯B.酶在生物化学反应中往往难以回收C.酶遇强酸、强碱、高温等条件易失活D.酶作为催化剂，绝大多数酶是蛋白质答案D解析酶的作用条件比较温和，易受温度、酸碱度的
9、影响；酶在生物化学反应中与反应物、产物混合在一起，很难回收，影响产品质量。13.可以鉴定出分离的分解尿素的细菌的方法是()A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红试剂D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂答案A解析尿素在尿素分解菌的作用下分解产生氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，酚红指示剂变红。14.某同学为探究温度对果胶酶活性的影响，在不同温度条件下，将等量的果胶酶加入到等量的苹果泥中，在反应同样时间后，再将反应液过滤同样时间，用量筒测定滤出苹果汁的体积。下列曲线图能正确反映实验结果的是()答案
10、B解析果胶酶在0 时活性较低，但也能催化苹果泥形成果汁，果汁量不为0；随着温度升高，果胶酶的活性升高，果汁量增加；当超过最适温度时，果胶酶活性降低，果汁量减少。正确的应是B曲线。15.下图为某同学探究温度对果胶酶活性的影响的实验操作流程图，下列叙述错误的是()A.底物为苹果泥，酶液为果胶酶溶液B.底物与酶混合前的同温处理可以取消C.实验的自变量为底物与酶混合后的温度D.检测的是果汁的体积或果汁的澄清度答案B二、非选择题(本题包括8小题，共70分)16.(6分)(1)现有一份污水样品，某兴趣小组欲检测其中的细菌数，进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液，用_法
11、分别接种于固体平面培养基上，经培养后进行计数。该实验应注意，接种前，从盛有_的容器中将玻璃刮刀取出，放在酒精灯火焰上灼烧，冷却后待用；分组时，需用_作为对照。(2)在上述细菌培养实验中进行计数时，应计数的是接种了()A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数答案(1)涂布分离70%酒精未接种的培养基(2)D解析(1)细菌的分离与计数常用涂布分离法，即用玻璃刮刀将一定体积的稀释液涂布到固体平面培养基上。玻璃刮刀在使用前需进行灭菌处理，即将其浸入体积分数为70%的酒精中，随后取出放在酒精灯火焰上灼
12、烧，冷却后待用。为排除其他因素的影响，提高实验的可信度，实验中要设置空白对照。(2)将菌液涂布到固体平面培养基上后，倒置放在恒温箱中培养，培养一段时间后，统计菌落数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，这样通过统计菌落数就可估算出待测样品的细菌数目，所以要选择合理稀释度的样品。17.(6分)请回答微生物培养和分离的有关问题：(1)欲从土壤中分离出能利用尿素的细菌：以_为唯一氮源且加入了_指示剂的培养基，用_法分离细菌。若培养基平板上有菌落存活且颜色变_，则说明分离成功。(2)分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基，其成分_。A.前者含
13、琼脂，后者不含琼脂和琼脂糖B.两者都含有琼脂C.前者含有琼脂糖，后者不含琼脂糖但含琼脂D.两者都不含琼脂和琼脂糖答案(1)尿素酚红涂布分离(或涂布)红(2)C解析(1)分离能利用尿素的细菌，只需以尿素为唯一氮源，加酚红作指示剂，采用涂布分离法分离细菌，只要培养基中的指示剂变红，标志着存在脲酶水解尿素的反应，证明菌株可以以尿素为氮源。(2)分离以尿素为氮源的细菌所用培养基应含有琼脂糖，而分离大肠杆菌所用培养基则不含琼脂糖而含琼脂。18.(8分)如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。(1)图中选择培养基应以_为唯一氮源；鉴别培养基还需添加_作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的
14、指示剂将变_色。(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是_，每克土壤样品中的细菌数量为_108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较_。答案(1)尿素酚红红(2)涂布分离法1.75少解析(1)脲酶由分解尿素的细菌产生，故需用以尿素为唯一氮源的培养基筛选该类微生物。分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，故培养基中加入酚红指示剂后，菌落周围将出现红色。(2)涂布分离法常用来统计样品中的活菌数，在计数时一般选择菌落数在30300的平板进行计数，并取平均值。每克样品中的菌株数()M。因培养基上两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计结果往往较实际数目少；而用血细胞计数板计数时，死亡的、活的菌体都计数在内。19.(10分)下表是3组生物实验培养基。请回答下列问题：组别培养基a无机盐、蔗糖、维生素和甘氨酸等有机物、水、琼脂b葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、酚红、水、琼脂糖c蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水、琼脂(1)分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基_。在含有脲酶的细菌菌落周围会出现_，这是由于尿素被分解产生的_使pH升高，酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株
