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1、三 .水溶性生物碱的提取与分离 季胺、COOH+N，可溶水和醇， 不溶亲脂性有机溶剂 水（酸水）、醇类提浓缩酸水碱化有机溶剂萃取碱水中 B 分离 （一）沉淀法 碱水中B弱酸+生物碱试剂 复合盐或盐净化、水解水溶性B,1.雷氏胺盐沉淀法 实验室操作步骤（333） 沉淀 碱水酸化（PH2-3加新鲜雷氏胺 盐饱和液生物碱雷氏盐 水洗、抽干,柱色谱净化 丙酮溶解生物碱雷氏盐过滤 丙酮液 上Al2O3柱Me2CO洗脱 加Ag2SO4饱和液B.H2SO4 加BaCl2液B.HCl+BaSO4+AgCl 过滤、蒸干水溶性B.HCl 也可将丙酮液通过氯离子型阴离子型 交换树脂柱 B.HCl,化学反应式 B+
2、+ NH4Cr（NH3）2（SCN）4 BCr （NH3）2（SCN）4 2BCr（NH3）2（SCN）4 + Ag2SO4 B2SO4+2AgCr（NH3）2（SCN）4 Ag2SO4 + BaCl2 AgCl + BaSO4 B2SO4 + BaCl2 2BCl+BaSO4,2.磷钨酸、硅钨酸沉淀剂 生物碱复合物用Ba(OH)2 或 Ca(OH)2分解 3.重金属盐沉淀剂 生物碱复合物 通H2S气体分解,（二）溶剂法 碱水用与水不相溶有机溶剂萃取 （正丁醇、异戊醇、氯仿甲醇混合） 回收溶剂 水溶性B (三）离子交换树脂法 碱水 阳离子交换树脂 酸水洗脱 B.HCl 碱水洗脱 B,（四）其他
3、 利用溶解度不同分离+盐析 色谱法也常用， 不采用PH梯度法,四 提取分离对生物碱结构影响 溶剂、酸碱、色谱、光线、空气等 （一）溶剂的影响-各种溶剂 eg1异喹啉类中苯骈菲啶类 碱醇中重结晶C8位引入烷氧基 (投影),eg2罂粟果中的血根碱 碱性丙酮中8-丙酮基二氢血根碱,eg3常山根中常山碱 氯仿中加热 异常山碱,(二）酸碱的影响 eg1 l-莨菪碱碱液 稀醇互变反应阿托品（消旋物） (投影),eg2龙胆科中龙胆苦苷氨水碱化 龙胆碱,eg4普托品型异喹啉类 叔胺碱 H+ 季胺碱 coulteropine的三环盐及多环盐 (投影),(三）色谱分离的影响 三氧化铝色谱法有时使结构变化 eg飞燕
4、草属中（delphinium staphisagria)种 飞燕草碱 AL2O3 飞燕啶碱（新） (投影),（四）其它影响 eg1长春花属无水长春花碱 O2 白长春花碱 (投影) 或/CHCl3（Me2CO) 中室温72h 证实,eg2小檗科狮足草属植物 leontice leontopalum 花瓣碱 雷氏盐（或其氯化物、碘化物） 离子交换树脂 狮足草碱 （霍夫曼降解）,第五节 生物碱的检识-色谱检识 TLC、PC、高效液相、气相 微量、快速、准确， 分离依据和监视手段 一、薄层色谱 （一）吸附TLC 1.硅胶：碱液处理或碱性展开剂 洗脱剂：以氯仿为主,Rf太小加甲醇、丙酮 Rf太大加苯、环
5、己烷 2.三氧化铝：弱碱性-亲脂性B 展开剂：中性，同上（无需碱化） 3.显色 直接观察有色生物碱 紫外下观察有荧光生物碱 喷改良碘化鉍钾-桔红色,避免假阳性-改用碘化铂钾，碘铂酸 三氯化锑等，对不同B显不同色 喷特殊显色剂-如咖啡碱、麻黄碱对改良碘化鉍钾不显色，可改用其它 ，如氯胺T试剂对咖啡碱显色。,实例:中药汉防己中汉防己甲素、 汉防己乙素、轮环藤酚碱 用氧化铝薄层分离 展开剂：氯仿-甲醇（19：1） 显色剂：改良碘化鉍钾 Rf值大小顺序： 甲素乙素轮环藤酚碱,（二）分配TLC：分离结构十分相似者 1.支持剂：硅胶、纤维素粉 2.固定相和展开剂 1）亲脂性 固定相：甲酰胺 展开剂：甲酰胺
6、饱和亲脂性有机溶剂 2）亲水性 BAW系统：正丁醇：乙酸：水 4：1：5 上层,3）异构体：利用反应速率不同 eg L-麻黄碱和D-伪麻黄碱为光学异构 体 利用a-OH仲胺+羰基 D-伪麻黄碱 烷稳定性 L-麻黄碱 烷,加少许乙醛（或丙酮），并控制条件 （温度、时间、乙醛量），仅生成 D-伪麻黄碱 烷 可分离较好,二.PC ：多为正相(盐及B均可) 1.盐：离子态 固定相：水、甲酰胺、酸性缓冲液 展开剂：BAW 或极性小溶剂 多缓冲PC示意图（千金藤中B分离）,2.B: 分子态 固定相：非水的亲水性溶剂-甲酰胺 及酸性缓冲液 展开剂：固定相饱和的亲脂性有机溶 剂，如苯、氯仿、乙酸乙脂 显色剂：同TLC（除含硫酸）,三.高效液相 HPLC TLC、PC不行时可用此法 吸附、分配、离子交换色谱都可 反相分配色谱法用得多 流动相：宜偏碱性 实例：分离分析罂粟壳中 吗啡、可待因和罂粟碱,采用C18色谱柱 流动相：0.5%乙酸铵-1%三乙胺-甲醇 （49：1：50） 偏碱性 分离效果良好。 四.GC 挥发性或遇热不分解物，少。 如麻黄碱,
