《核酸实验室管理经验和体会(甘肃)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《核酸实验室管理经验和体会(甘肃)（32页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1 核酸实验室核酸实验室 管理经验和体会管理经验和体会 甘肃省血液中心检验科甘肃省血液中心检验科 2 内内容容 甘肃省血液中心检验科核酸实验室基本情况甘肃省血液中心检验科核酸实验室基本情况 核酸实验室验收核酸实验室验收 日常管理的体会日常管理的体会 3 甘肃省血液中心检验科甘肃省血液中心检验科 核酸实验室基本情况核酸实验室基本情况 科华核酸检测系统科华核酸检测系统 试剂试剂 乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒核酸检测乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒核酸检测 试剂盒（试剂盒（PCRPCR- -荧光法）荧光法） 设施和设备设施和设备 一个实验室一个实验室 四个分区四个分区 两
2、套样本汇集提取两套样本汇集提取（ HAMILTON STARHAMILTON STAR系列系列磁分离模块磁分离模块: : 样样 本汇集、核酸提取）本汇集、核酸提取） 三台三台ABI 7500ABI 7500荧光荧光PCRPCR仪仪: : 扩增检测扩增检测 4 甘肃省血液中心检验科甘肃省血液中心检验科 核酸实验室基本情况核酸实验室基本情况 汇集检测不超过汇集检测不超过4848小时，拆分不超过小时，拆分不超过7272小时小时 检测策略：两遍酶免检测策略：两遍酶免+ +一遍核酸一遍核酸 规划设置为集中化核酸检测实验室（规划设置为集中化核酸检测实验室（200200公里以公里以 内内4 4家中心血站）家
3、中心血站） 5 基本情况 20122012年下半年开始核酸检测年下半年开始核酸检测 20132013年年7 7月通过甘肃省临检中心核酸实验室技月通过甘肃省临检中心核酸实验室技 术验收术验收 6 核酸实验室验收 验收依据验收依据: : 卫办医政发卫办医政发20102010194194号号医疗医疗 机构临床基因扩增管理办法机构临床基因扩增管理办法、医疗机构医疗机构 临床基因扩增检验工作导则临床基因扩增检验工作导则、临床基因临床基因 扩增检验实验室技术验收表扩增检验实验室技术验收表 验收机构：甘肃省临床检验中心验收机构：甘肃省临床检验中心 验收方式：现场验收和盲样检测验收方式：现场验收和盲样检测 7
4、 核酸实验室验收 血站基因扩增检验实验室技术验收表血站基因扩增检验实验室技术验收表 1.1.实验室设置和设备实验室设置和设备 2.2.设施和环境设施和环境 3.3.人员人员 4.4.设备管理和质控物设备管理和质控物 5.5.检测方法检测方法 6.6.标本管理标本管理 7.7.记录记录 8.8.报告报告 9.9.质量控制质量控制 10.10.抱怨抱怨 8 日常管理的体会 人员培训人员培训 设施设备维护设施设备维护 检测流程管理检测流程管理 安全卫生管理安全卫生管理 9 日常管理的体会 人员培训人员培训 1.1.轮岗培训轮岗培训 2.2.相对固定相对固定 3.3.科室定期培训科室定期培训 4.4.
5、严格执行严格执行SOPSOP 10 日常管理的体会 设施设备维护设施设备维护 1. 1. 实验室实验室1 1、2 2、3 3三个区域内压力梯度应保持在三个区域内压力梯度应保持在5 5- -10Kpa10Kpa，依次，依次 按照按照1 1区区22区区33区递减。各区缓冲间压力恒定，与外走廊保持区递减。各区缓冲间压力恒定，与外走廊保持 1010- -15Kpa15Kpa正压力差。正压力差。 2. 2. 各区温度：各区温度：2020- -2626 二区湿度：二区湿度：40% 40% 3.3.二区生物安全柜，二区生物安全柜，开盖机，用于真空采血管的去帽。开盖机，用于真空采血管的去帽。 （无尘无纺布）（
6、无尘无纺布） 4.4.二区、三区应配备电源。二区、三区应配备电源。 5.5.各区间的传递窗？各区间的传递窗？ 11 日常管理的体会 产物分析区产物分析区 空气流向空气流向 空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向空气流向 缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间 专用走廊专用走廊 工作流向工作流向 扩增区扩增区标本制备区标本制备区试剂准备区试剂准备区 12 日常管理的体会 检测流程管理检测流程管理 1.1.分离胶分离胶EDTA 2KEDTA 2K抗凝管。采集后的充分混匀，一般颠倒抗凝管。采集后的充分混匀，一般颠倒-1010 次以上。次以上。（或按照采血管技术要求进行）， 样品离心：应采用大容量低温
7、离心机，离心要充分，离心条件最样品离心：应采用大容量低温离心机，离心要充分，离心条件最 好好2000g2000g、2020分钟。分钟。 2.2.检测时间：采血后第二天，采集后检测时间：采血后第二天，采集后4848小时内完成混检，拆分小时内完成混检，拆分7272 小时内完成。小时内完成。 13 日常管理的体会 安全卫生管理安全卫生管理 核酸实验室防污染的目的 核酸实验室的污染物 核酸实验室被污染的后果 核酸实验室的防污染措施 14 核酸实验室防污染的目的核酸实验室防污染的目的 预防和控制核酸残余污染及病源微生 物的传播，确保实验室生物安全与周 围环境安全。 15 核酸实验室的污染物核酸实验室的污
8、染物 扩增产物（阳性核酸片段） 天然基因组DNADNA 试剂污染 标本间的交叉污染（气溶胶） 16 核酸实验室被污染的后果核酸实验室被污染的后果 出现大量的假阳性结果。 污染物短时间内不能消除。 实验被迫暂停。 备用实验室。 17 案例：检测HBVHBV“灰区”样本120120份，（S/CO 0.5S/CO 0.5- -1 1之间），汇集检测结果全部阳性，阴 性对照结果阳性。 1.1.清洁实验室完毕后，用1.7ml1.7ml离心管（用于配制反应液的管子）分别放置于以下位置： 位置位置数量数量 二区二区STAR1STAR1仪器内部载架放置区域仪器内部载架放置区域6 6支支 STAR2STAR2仪
9、器内部载架放置区域仪器内部载架放置区域3 3支支 三区三区ABIABI仪仪 器器 仪器旁边，各摆仪器旁边，各摆1 1支支共共3 3支支 18 2.过夜后，早上取双蒸水，约3030- -50ul50ul，在 1.7ml1.7ml离心管内反复吹吸多次后，取15ul15ul进入扩增 板，作为模板，另加入15ul15ul反应液。每个离心管配制3 3个复孔。 3.3.扩增板制备完毕后，放入扩增仪进行检测，最好做三项。 结果：连续检测七天，第四天已经全部为阴性，第八天转为正常试验。 19 核酸实验室的防污染措施核酸实验室的防污染措施 规范化的设置和管理 实验室的区域划分 设置阴性质控 严格的消毒措施 20
10、 防污染的消毒措施防污染的消毒措施 实验室仪器的消毒 实验室台面的消毒 实验室地面的消毒 传递窗的消毒 废液的消毒 空气消毒 实验室通风 勤换手套 21 实验室仪器的消毒实验室仪器的消毒 样本处理模块: :每天实验结束后用无纺布蘸75%75% 乙醇清洁工作台面，擦拭CoreCore- -TipTip金属挡板， 酒精喷雾清洁样本载架。每周用75%75%乙醇清洁 试剂载架，枪头载架。 核酸扩增模块：每周使用无纺布蘸清水润湿后 擦拭仪器表面。 22 实验室仪器的消毒实验室仪器的消毒 生物安全柜使用完后，用无纺布蘸7575% %乙醇擦 拭安全柜台面及开盖机。2 2区实验结束后，打 开生物安全柜内紫外灯
11、消毒3030分钟。 移液器：使用完后用无纺布蘸7575% %乙醇擦拭。 实验结束后，紫外灯消毒6060分钟。 23 实验室台面的消毒实验室台面的消毒 每天工作结束后，台面用含有效氯0 0. .5 5% %含氯消毒液擦拭 1 1次、1515分钟后用清水再擦拭1 1次。 1 1区配制反应液的台面和2 2区的试剂准备区及样本准备区 用紫外灯照射6060分钟。 台面有明显污染或血液溅漏时，应用含有效氯0 0. .5 5% %含氯 消毒液喷洒于污染表面，并用无纺布蘸消毒液后覆盖污 染表面，保持1515分钟以上，再用清水擦拭干净。 24 实验室地面的消毒实验室地面的消毒 每天工作结束后，地面应用含有效氯0
12、.5%0.5%含氯消毒液 拖擦1 1次、1515分钟后用清水再拖擦1 1次。 地面有明显污染或血液溅漏时，应用含有效氯0 0. .5 5% %含 氯消毒液喷洒于污染表面，并用无纺布蘸消毒液后覆 盖污染表面，保持1515分钟以上，再用清水拖擦。 拖把等清洁工具各区专用，不得混用，用后洗净晾干 25 传递窗的消毒传递窗的消毒 实验结束后，传递窗内用无纺布蘸75%75% 乙醇擦拭。 擦拭完后，紫外灯消毒3030分钟。 26 废液的消毒废液的消毒 实验过程中产生的废液用含有效氯0 0. .5 5% % 含氯消毒液进行消毒。 2424h h后方可倒入下水管道。 27 空气消毒空气消毒 实验室台面、仪器、
13、地面清洁消毒之后， 75%75%乙醇喷雾实验室内空气。 每天试验全部结束后，打开实验区及缓冲区 的紫外灯消毒6060分钟。 28 空气消毒空气消毒 消毒时实验台面必须整洁，不得有纸张等其 他覆盖物，以免影响消毒效果。 灯管表面应经常( (一般2 2周左右1 1次) )用酒精棉 球轻轻擦拭，除去上面灰尘与油垢，以减少 对紫外线穿透的影响。 29 避免消毒避免消毒“过度过度” 探讨： 1.1.设备发生故障频率增加？ 2.2.假阴性率升高？ 30 实验室消毒方案实验室消毒方案 一区消毒方案一区消毒方案 实验结束后，使用喷有实验结束后，使用喷有75%75%酒精无纺布擦拭实验桌面，每天使用清水拖地酒精无
14、纺布擦拭实验桌面，每天使用清水拖地 ，每二天使用，每二天使用500mg/L500mg/L有效氯拖地，紫外灯杀菌有效氯拖地，紫外灯杀菌1 1小时；小时； 二区消毒方案二区消毒方案 实验结束后，使用喷有实验结束后，使用喷有75%75%酒精无纺布擦拭酒精无纺布擦拭STARSTAR仪器台面，及仪器台面，及TIPTIP头金属挡头金属挡 板，使用板，使用75%75%酒精喷洒实验台面，喷洒标本载架；及酒精喷洒实验台面，喷洒标本载架；及75%75%喷洒生物安全柜喷洒生物安全柜 ，然后使用无纺布擦拭生物安全柜；每天使用，然后使用无纺布擦拭生物安全柜；每天使用500mg/L500mg/L有效氯拖地，拖地有效氯拖地，拖地 结束后，使用紫外消毒车紫外消毒结束后，使用紫外消毒车紫外消毒1 1小时；小时； 三区消毒方案三区消毒方案 使用喷洒有使用喷洒有75%75%酒精的无纺布擦拭实验台面，然后使用清水拖地，每二天酒精的无纺布擦拭实验台面，然后使用清水拖地，每二天 使用使用500mg/L500mg/L有效氯拖地，每一周使用紫外消毒车消毒一次。有效氯拖地，每一周使用紫外消毒车消毒一次。 31 实验室通风实验室通风 紫外灯消毒结束后，通风1 1小时。 每天试验开始前，打开送排风系统通风。 试验过程中，通过送排风系统维持三个区 域的压力差，防止扩增产物逆流。 -很重要很重要 32 谢 谢 ！
