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1、瘦肉精残留及其检测技术,中国农业大学国家兽药安全评价中心 国 家 兽 药 残 留 基 准 实 验 室,江海洋 博士生导师,2013年6月 重庆,研究平台,国家重点学科基础兽医学，排名第一 国家兽药残留基准实验室，国内仅四家 国家兽药安全评价中心 国家兽药安全评价（环境评估）实验室 农业部兽药安全监督检验测试中心（北京） 中国农业大学“211工程”农产品安全研究中心 “985工程”农产品加工与食品安全创新平台 农业部兽药残留和违禁添加物检测重点实验室 动物源性食品安全检测技术北京市重点实验室 北京维德维康生物技术有限公司,研究方向,细菌耐药性产生与扩散及风险评估 兽药残留检测技术（包括快速检测产
2、品研发） 兽医毒理学（包括环境生态毒理学） 药物动力学及新兽药创制,研究队伍,现有工作人员32名，其中具有高级技术职称的15人，具有博士学位的11人。国家973项目首席科学家1名，教育部1名，新世纪人才2名。在读硕士、博士近70名。专业涉及兽医学、兽医药理学与毒理学、兽医微生物学、药物学、分析化学、免疫化学、标准化等多个领域，组成了一支多学科的科研教学队伍。,主要研究成果,近五年先后承担国家科技支撑计划项目、973项目、行业公益项目、国家杰出青年基金项目、国家自然科学基金重点项目等40余项，总经费超过1亿元。在国内外重要学术刊物上发表论文300余篇，其中SCI收录172篇；制定国家和行业兽药残
3、留检测方法标准70项：研发出具有自主知识产权药物残留检测试剂盒和试纸条产品60余种，其中20种获得农业部批准备案文号；获得国家发明专利33项。研究成果获得国家科学技术进步二等奖1项，北京市科学技术一等奖1项和北京市科学技术二等奖2项。已培养博士研究生65名，硕士研究生近200名。,主要内容,一、畜牧水产养殖业及动物性产品简况 二、动物源食品安全现状 三、瘦肉精主要种类 四、国内外瘦肉精残留限量标准 五、残留检测技术 六、瘦肉精检测方法标准,中国是养殖业大国，其中： 猪，66686.4 万头 奶牛，1420.1 万头 禽，110 亿羽 羊，28087.9 万只,一、畜牧水产养殖业及动物源性产品简
4、况,数据来源：中国统计年鉴（ 2011 ）,中国又是动物源性产品生产和消费大国，其中： 肉类，7925.8 万吨，人均达59 kg；蛋类，2762.7 万吨，人均达21 kg；奶类，3748 万吨，人均达28 kg；水产品，5373 万吨，人均达40 kg。,数据来源：中国统计年鉴（ 2011 ）,二、动物源食品安全现状,全球经济一体化和食品贸易国际化使食品安全成为一个世界性的挑战和全球重要的公共卫生问题。 其中外源化合物（兽药、药物添加剂、违禁药物等）残留超过最高残留限量标准以及临床使用不遵守休药期是影响动物源食品安全的最主要因素之一。 尽管世界各国采取了一系列政策和监控措施，但世界范围内涉
5、及食品安全的恶性、突发事件时有发生，食品安全现状仍然令人担扰。 我国目前动物性食品抽检比例低，且大多数为出口食品。,部分“瘦肉精”事件,2012年2月-9月，辽宁曝光8起瘦肉精事件，肉牛、猪检测出瘦肉精 2012年2月，国家体育总局发文，称猪牛羊肉可能含兴奋剂，规定国家队成员不能在外用餐；2012年7月女排比赛失利归咎于瘦肉精。 2011年10月，山东利津“瘦肉精”羊事件 2011年3月，双汇“瘦肉精”猪被央视曝光 2010年9月，深圳市民吃蛇肉中毒 2010年4月，广州70余人“瘦肉精”中毒 2009年4月，阜阳产雨润牌午餐肉检出瘦肉精，食用可能中毒 2009年2月19日，广州出现了“瘦肉精
6、”中毒事件，累计有70人出现中毒情况。 2008年11月，浙江嘉兴70余人吃红烧肉中毒 2007年3月，广东江门市一家6口喝猪肺汤中毒,2006年9月，上海300余人中毒 2006年3月，广东东莞6人中毒，1人死亡 2005年9月，上海6人 2004年8月，上海22人 2003年10月，杭州22人 2003年10月，辽宁辽阳发生39人 2003年3月，广东佛山近百人中毒 2002年4月，广东湛江35人中毒 2001年11月，广东河源近500人中毒 2001年11月，北京出现首例14人中毒 2001年8月，广东信宜530人,提示：目前发生的中毒事件都是由克伦特罗引起的。,瘦肉精相关案件,2011
7、年4月至今，全国公安机关共破获食品非法添加案件1200余起，抓获犯罪嫌疑人2000余名。其中，在“瘦肉精”破案会战中，各地共侦破案件120起，抓获涉案人员980多名。 2011年8月，河北昌黎，瘦肉精喂羊，养羊户被判刑5年。 2011年8月，河南获嘉，韩文斌等人非法经营瘦肉精，判处1到10年。 2011年7月， 河南沁阳，王二团等人违规出具检疫证明，判处5-6年有期徒刑。 2011年7月，河南焦作，刘襄等人非法生产瘦肉精，判处9年到死缓不等。 2011年6月，吉林伊通，刘春成等人非法销售瘦肉精，判处4-6年。 2010年3月，广州市刑拘15人。 2009年5月，浙江嘉兴王云水投毒瘦肉精，判处8
8、年。 2006年，江西12人因制售使用瘦肉精被刑拘。 2004年9月，浙江衢州姜土寿生产、销售瘦肉精判处1年半。,三、瘦肉精主要种类,主要包括克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺等，因其具有肾上腺素样作用，可缓解、消除或预防支气管哮喘。除莱克多巴胺外，克伦特罗、沙丁胺醇、特布他林等-受体激动剂在人医临床上作为平喘的处方药广泛使用。,11种受体激动剂的结构式,在生猪和反刍动物饲养过程中如果给予一定量的-受体激动剂，能够改变营养的代谢途径，促进动物肌肉、特别是骨胳肌蛋白质的合成，加速脂肪的分解与转化，可使饲料转化率，生长速率，胴体瘦肉率明显增加，所以在畜牧养殖业上该类化合物被统称为“瘦肉精”。,肉色鲜红
9、，脂肪层极薄，往往是皮贴着瘦肉，瘦肉丰满，后臀肌肉饱满突出，但肥肉和瘦肉明显分离，组织疏松。 健康正常猪肉肉色淡红，肉质弹性好，组织紧密，肥瘦交替，肉皮与瘦肉之间脂肪（膘）厚约1.5cm。,该类药物毒副作用较大，人使用后可能出现肌肉振颤、心慌、战栗、头疼、恶心、呕吐等不良反应症状，特别是对高血压、心脏病、甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更大，严重的可导致死亡。这类药物如果用于食品动物，易在动物组织，尤其是内脏中残留。,该类药物主要在肝脏、肺脏等组织蓄积，据报道，犊牛肝脏中克伦特罗残留量可达到5000 ppb。我国百姓自古以来就有喜爱食用内脏的习惯，所以我国禁止包括莱克多巴胺在内的所有-受体激动剂
10、用于食品动物。,猪以20ppm莱克多巴胺添加浓度饲喂后残留消除情况,强志懿，中国农业大学硕士论文,注：给药饲喂7天，数据来源于美国礼来公司,注：给药30天，数据来源于Food Chemistry, 127 (2011) 327332,1987年欧盟、美国就宣布禁止使用克伦特罗作为兽用饲料添加剂。 莱克多巴胺在美国、加拿大、墨西哥等20余个美洲和亚太国家批准用于猪和反刍动物，组织残留限量要求在30-150 ppb之间。欧盟则禁止使用莱克多巴胺。,四、国内外瘦肉精残留限量标准,（一）国外残留限量标准,（一）国外残留限量标准,注：其他受体激动剂未见限量标准,On July 5th, the 35th
11、 annual meeting of the Codex Alimentarius Commission (CAC) approved by a vote of 69 to 67, maximum quantities of ractopamine residue in meat products. The CAC adopted the maximum allowable level of ractopamine residue in beef and pork muscle and fat at 10 ppb (parts per billion), 40 ppb in beef and
12、pork liver, and 90 ppb in beef and pork kidneys, while no standard was set for turkey.,2012年7月5日，CAC第35届年会上69票赞成，67票反对，通过了莱克多巴胺在组织中的最大残留限量。 牛肉和猪肉，10ppb，牛肝和猪肝，40ppb，牛肾和猪肾，90ppb。,欧盟、中国、俄罗斯、印度等仍然坚持反对。,农业部176号公告颁布5类40种禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种。 农业部193号公告颁布了21种食品动物禁用的兽药及其它化合物清单。 农业部1519号公告颁布了11种禁止在饲料和动物饮水中使用的物
13、质。 农业部235号公告中颁布了109种兽药的限量标准，涉及马、牛、羊、猪、禽、蜜蜂、鱼、虾等动物。样品有组织（肌肉、肝脏、肾脏、脂肪等）、牛奶、蜂蜜等。,（二）我国残留限量标准,农业部、卫生部和国家药品监督管理局联合出台了禁止在饲料和动物饮用水中使用的药品目录 （农业部公告176号）,一、肾上腺素受体激动剂 盐酸克仑特罗、沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇、莱克多巴胺、盐酸多巴胺、西马特罗、硫酸特布他林,二、性激素 乙烯雌醇、雌二醇、戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇、氯烯雌醚快诺醇、炔诺醚、醋酸氯地孕酮、左快诺孕酮、快诺酮、绒毛膜促性腺激素（绒促性素）、促卵泡生长激素 三、蛋白同化激素 碘化酪蛋白、苯丙酸诺龙及
14、苯丙酸诺龙注射液 四、精神药品 盐酸氯丙嗪、盐酸异丙嗪、安定（地西泮）、苯巴比妥、苯巴比妥钠、巴比妥、异戊巴比妥、异戊巴比妥钠、利血平、艾司唑仑、甲丙氨脂、咪达唑仑、硝西洋、奥沙西洋、匹莫林、三唑仑、唑吡旦、其他国家管制的精神药品。 五、各种抗生素滤渣,农业部193号公告 食品动物禁用的兽药及其它化合物清单,农业部1519号公告 禁止在饲料和动物饮水中使用的物质,苯乙醇胺A（Phenylethanolamine A）：-肾上腺素受体激动剂。 班布特罗（Bambuterol）：-肾上腺素受体激动剂。 盐酸齐帕特罗（Zilpaterol Hydrochloride）：-肾上腺素受体激动剂。 盐酸氯
15、丙那林（Clorprenaline Hydrochloride）：药典2010版二部P783。-肾上腺素受体激动剂。 马布特罗（Mabuterol）：-肾上腺素受体激动剂。 西布特罗（Cimbuterol）：-肾上腺素受体激动剂。 溴布特罗（Brombuterol）：-肾上腺素受体激动剂。 酒石酸阿福特罗（Arformoterol Tartrate）：长效型-肾上腺素受体激动剂。 富马酸福莫特罗（Formoterol Fumatrate）：长效型-肾上腺素受体激动剂。 盐酸可乐定（Clonidine Hydrochloride）：药典2010版二部P645。抗高血压药。 盐酸赛庚啶（Cypro
16、heptadine Hydrochloride）：药典2010版二部P803。抗组胺药。,瘦肉精发展新情况,1、老药新对象 克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇用于牛羊兔禽等。 2、新药老对象 苯乙醇胺A用于猪；在国家残留监控中，检测猪肉、猪肝9种激动剂，猪尿检测3种。 3、非饲料添加使用 （1）添于垫料，经皮肤吸收； （2）屠宰前使用，注水增重。,五、残留检测技术,残留分析一般程序 先用快速检测产品（试剂盒或试纸条）进行筛查，可疑阳性样品再用仪器分析方法尤其是色质联用检测方法加以确证。美国、欧盟和日本等发达国家均按此程序进行。,各种测定方法的灵敏度范围,（一）色谱分析技术,气相色谱法（GC） 高效液相色谱法（HPLC） 超高效液相色谱法（UPLC） 气谱-质谱法（GC-MS） 气谱-串联质谱法（GC-MS/MS） 液谱-质谱法（LC-MS） 液谱-串联质谱法（LC-MS/MS） 其他新技术，如飞行时间质谱等,兽药残留实验技术规范，农牧发20031号,瘦肉精仪器检测方法（HPLC、LC-MS/MS等）检测限为0.5-2ppb。,酶联免疫吸
