浅析顺序注射分光光度法测定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星

从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果浅析顺序注射分光光度法测定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星编辑摘要】 本文基于左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星分别与Fe(III)作用形成黄色络合物的现象，建立了简单、快速测定药物中左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的顺序注射分光光度新方法讨论了物理因素和化学因素对方法灵敏度的影响测定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的工作曲线的线性范围均为10～250μg/ml采用摩尔比法和连续变换法测定络合物的组成，Fe(III)与药物的组成比为1∶2将方法用于药物中左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的测定，并与参考方法进行了对照关键词】 顺序注射分析技术； 分光光度法； 左氧氟沙星； 氧氟沙星； 洛美沙星ABSTRACT A simple and rapid sequential injection spectrophotometric method for the determination of levofloxacin, ofloxacin and lomefloxacin in pharmaceutical preparation was described, based on the complexation reaction between the drug and Fe(III) in sulfuric acid solution. The various chemical and physical conditions that affected the reaction were studied. The calibration graphs were linear in the range of 10～250 μg/ml for levofloxacin, ofloxacin and lomefloxacin. The composition of the complexes was found 1∶Fe (III): drug by molar ratio method and Job′s method of continuous variation. The method was successfully applied to the determination of levofloxacin, ofloxacin and lomefloxacin in pharmaceutical commercial formulations. The results obtained were compared with those of the reference methods.KEY WORDS Sequential injection analysis; Spectrophotometry; Levofloxacin; Ofloxacin; Lomefloxacin左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星是三个重要的合成的氟喹诺酮类衍生物，其中左氧氟沙星是氧氟沙星的S(-)异构体，抗菌作用是氧氟沙星的2倍，是R(-)氧氟沙星的8～128倍。

上述药物一方面可以抑制革兰阴性菌和革兰阳性菌DNA的旋转，另一方面可以消灭分枝杆菌、支原体和发疹伤寒等的病原体而被广泛应用已经报道有各种方法用于测定药物、体液和组织中这些药物的含量，其中包括萃取［1～3］和非萃取［4］分光光度法、高效液相色谱法［5～8］、荧光分析法［9～11］、电化学分析法［12～14］、流动注射化学发光法［15～18］和毛细管电泳分析法［19，20］等上述方法通常会消耗相对多的试剂，并产生大量废液顺序注射分析是20世纪90年代产生的新分析技术，属于第二代流动注射分析顺序注射分析具有简便、节省样品和试剂、宜于进行自动化过程检测等特点在进行药物分析时，不仅要考虑方法的灵敏度、重现性，而且由于要分析大量的样品，必须考虑分析人员的劳动强度，因此，顺序注射技术在药物分析中的应用越来越多［21］本文的目的是建立一种简单、自动化的方法用于分析药物中上述组分的含量根据所研究的药物可以分别与Fe(III)生成黄色络合物，运用顺序注射分析技术结合分光光度检测建立了测定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的新方法1 实验部分 仪器与试剂 FIAlab500顺序注射分光光度计(美国FIAlab仪器公司)；注射泵，8通道选择阀。

储存管为200cm×，反应管为50cm×，其它聚四氟乙烯管均为内径系统由计算机控制，采用FIAlab软件( E)进行数据采集和处理USBXXUVVIS分光光度计(美国海洋光纤公司)，10mm长的光纤SMAZ型流通池称取 NH4Fe(SO4)2·12H2O置于浓硫酸中加适量水，加热溶解，定容于100ml容量瓶中，即得到/L Fe(III)的/L的硫酸溶液取此溶液于 /L的硫酸中，稀释至10ml作为工作液准确称取适量左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星对照品(中国药品生物制品检定所)，分别用3%乙醇溶解并定容于100ml容量瓶中，配制成500μg/ml的标准液1.实验步骤采用顺序注射测定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的步骤见以50μl/s吸取1700μl水作载流，再以50μl/s分别吸取50μl Fe(III)溶液和200μl标准溶液或样品溶液，以20μl/s推动1000μl样品塞到达检测器，再以30μl/s推出剩余载流清洗流路在437nm处测定体系的吸光度结果与讨论当Fe(III)溶液分别与左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星溶液共存时，溶液立即显示黄色，说明Fe(III)和药物形成了新的络合物。

扫描溶液的紫外可见吸收光谱发现，三种络合物的最大吸收波长均位于紫外区，并延伸到可见区， 其中Fe(III)洛美沙星络合物在437nm有一个肩峰存在； Fe(III)左氧氟沙星和 Schematic diagram of sequential injection systemFe(III)氧氟沙星络合物没有明显的肩峰存在考虑到三种药物分别在络合物的最大吸收波长处存在吸收，产生干扰，本文均在437nm测量体系的吸光度 反应管和储存管的影响 考察了内径分别为和的储存管对体系灵敏度的影响，结果表明，内径的储存管具有更高的灵敏度，故选用200cm×的储存管与内径为的反应管相比，内径为的反应管灵敏度更高，因此本实验选用的反应管在24～90cm范围内研究了反应管长度对体系灵敏度的影响反应管长度在40～70cm内，灵敏度最高且吸光度保持不变，本实验选用50cm的反应管2.流速的影响在15～60μl/s范围内考察了流速对体系灵敏度的影响实验发现，流速慢时反应灵敏度较高本实验采用流速为20μl/s2.试剂体积的影响和样品体积的影响在15～95μl内考察了Fe(III)溶液体积对体系灵敏度的影响，当Fe(III)溶液的体积大于40μl时，体系吸光度达到最大并保持恒定，实验选用吸入50μl Fe(III)溶液。

样品体积对检测灵敏度也有影响随着样品体积的增加，形成了更多络和物，体系吸光度增大当样品体积大于190μl时，吸光度变化缓慢，故本实验选用200μl的样品溶液III)和硫酸浓度的影响考察了Fe(III)溶液浓度的影响随着Fe(III)溶液浓度的增加，反应的灵敏度也随之增大当Fe(III)溶液浓度大于×10-3mol/L时，吸光度变化缓慢实验选用Fe(III)溶液浓度为×10-3mol/L在×10-2～×10-2mol/L内考察了硫酸浓度对体系的影响硫酸浓度对体系灵敏度几乎没有影响，实验选用×10-2mol/L硫酸溶液2.工作曲线和方法的灵敏度及精密度在最佳实验条件下，分别绘制了洛美沙星、左氧氟沙星和氧氟沙星的工作曲线结果表明，上述三种药物均在10～250μg/ml范围内遵守朗伯比尔定律，其线性回归方程和回归系数分别为：A洛美沙星=+=(n=5)A左氧氟沙星=+=(n=5)A氧氟沙星=+=(n=5)检测限分别为、和μg/ml11次平行测定100μg/ml的洛美沙星、左氧氟沙星和氧氟沙星的相对标准偏差分别为%、%和%完成一次循环分析测定需要140s，因此，方法的进样频率为26/h2.络合物组成的测定应用摩尔比法和连续变换法分别测定了药物和Fe(III)的络合物的组成比，结果表明，药物与Fe(III)的组成比均为2∶1。

应用分别取10片含有上述组分的药片，研磨后，准确称取相当于主成分50mg，用3%乙醇定容于100ml容量瓶中过滤，取适量中段滤液，定容于10ml容量瓶中，按实验方法进行测定取适量注射液，用3%乙醇定容于50ml容量瓶中，取适量该溶液用水定容于10ml容量瓶中直接测定，同时进行回收率实验，并将测定结果与参考方法对照，结果见由可见，该方法的分析结果令人满意参考文献】［1］ Ragab G H, Amin A S. Atomic absorption spectroscopic, conductometric and colorimetric methods for determination of fluoroquinolone antibiotics using ammonium rEineckate ionpair complex formation ［J］. Spectrochim Acta A,XX,60(4):973～978.［2］ Issa Y M, AbdelGawad F M, AbouTable M A, et al. Spectrophotometric determination of ofloxacin and lomefloxacin hydrochloride with some sulphonphthalEIn dyes ［J］. Anal Lett,1997,30(11):2071～2084.［3］ Sastry C S P, Rao K R, Prasad D S. Extractive spectrophotometric determination of some fluoroquinolne derivatives in pure and dosage forms ［J］. Talanta,1995,42(3):311～316.［4］ Kapetanovic V, Milovanovic L, Erceg M. Spectrophotometric and polarographic investigation of the ofloxacinCu(II) complexes ［J］. Talanta,1996,43(12):2123～2130.［5］ Cheng F C, Tsai T R, Chen Y F, et al. Pharmacokinetic study of levofloxacin in rat blood and bile by microdialysis and highperformance liquid chromatography ［J］. J Chromatogr A,XX,961(1):131～136.［6］ Foster R T, Carr R A, Pasutto F M, et al. Stereospecific highperformance assay of lomefloxacin in human plasma ［J］. J Phar。