正柴胡饮体外抗甲型流感病毒和乙型流感病毒作用的研究

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果正柴胡饮体外抗甲型流感病毒和乙型流感病毒作用的研究作者:赵萍,刘安平,刘妮,李青雅 【摘要】 为探讨中药复方正柴胡饮的抗病毒作用,从体外抗病毒实验对其抑制甲型流感病毒和乙型流感病毒的作用进行了 研究 。结果显示:中药复方正柴胡饮在无毒浓度L、L分别对FM1、昆科70B有明显的抑制病毒致细胞病变作用。 【关键词】 感冒中药疗法;甲型流感病毒;乙型流感病毒;正粘病毒药物作用 流行型感冒是由流感病毒引起的急性传染病,以其病原的易变性和疾病的传播速度快而著称。临床特征为

2、呼吸道症状较轻而发热、全身酸痛、乏力等中毒症状较重。对老年人、儿童和有潜在健康 问题 的人有合并并发症甚至致命的危险,但 目前 合成药中尚无理想的能消除症状的抗病毒药物问世1。古方正柴胡饮,由明代著名医家张介宾所创,对外感风寒诸疾颇具疗效。为研究其对流感病毒的抑制作用,我们选择了甲型流感病毒(FM1)和乙型流感病毒(昆科70B)两种流感病毒进行了体外抗病毒作用的实验研究。 1 材料与 方法 实验材料 药物 正柴胡饮全方六味(柴胡、陈皮、防风、芍药、甘草、生姜等)。实验用药均经生药鉴定并按原方比例水煎浓缩,由本所实验室制备。阳性对照药物三氮唑核苷(病毒唑),由湖北省医工所提供,批号。 毒种 FM

3、1 由 中国 医学 科学 院医药生物技术研究所提供,于狗肾细胞株(MDCK)狗肾细胞传代,以病变鸡红血球血凝法来判断其滴度,在35、5CO2培养箱培养。 昆科70B 由昆明医学研究所提供,于MDCK狗肾细胞传代,以病变及鸡红血球血凝法来判断其滴度,在35,5CO2培养箱培养。 细胞 MDCK引自广州市儿童 医院 病毒室。 细胞培养液和维持液 各为含10、2小牛血清,100 kUL青霉素,链霉素的DMEM(GIBCOBRI,公司产品)。 方法 抗病毒实验在96孔微量板上进行,每孔 ml,细胞数为3104个,长成单层后,将药液用维持液稀释成不同浓度,抛掉原培养液后将不同浓度的药液加入细胞孔中, m

4、l孔,以细胞不出现病变的最小稀释度为该药液对细胞的无毒界限。通过毒性试验观察到正柴胡饮药液L和病毒唑1 gL浓度对细胞生长无明显 影响 ,同时在相应敏感细胞上测定攻击病毒之TCID0。实验时设病毒对照、细胞对照、药物毒性对照及三氮唑核苷(病毒唑)对照,置37 CO2培养箱内,每天在倒置显微镜下观察病变并记录。当病毒对照孔细胞出现+病变时,继续观察d则终止。细胞出现病变的程度按以下6级标准记录:细胞生长正常,无病变出现;细胞病变少于整个单层细胞的10;细胞病变约占整个单层细胞的25;细胞病变约占整个单层细胞的50;细胞病变约占整个单层细胞的75;细胞病变约占整个单层细胞的75以上。 结果 表1结

5、果表明:正柴胡饮煎剂在L浓度下,对FM1有较好的抑制病变作用,在L浓度下对昆科70B有较好的抑制病变作用。阳性药病毒唑2g/ml时能完全抑制病毒所致病变。该实验重复2次,结果与表1完全一致。 表1 正柴胡饮在MDCK上对病毒致病变抑制作用 注:+表示不抑制;-表示抑制。 讨论 流感在 现代 医学认为,是由病毒引起,病毒感染首先入侵鼻咽、口咽、喉部等呼吸道的纤毛柱状上皮细胞内进行复制,借神经氨酸酶的作用而释出,再侵入其他柱状上皮细胞引起变性、坏死、脱落,从而引起感冒症状。每年全球约有10的人口即6亿人患流行性感冒,我国被国际上公认是流感的多发地。自1957年以来3次流感大流行均首发于我国,且在香

6、港地区和内地分别发现了禽H5N1和H9N2亚型毒株能感染人2,严重危胁人类健康。 目前 西方和国内临床用于抗流感病毒的药物有金刚烷胺(amatadine)、甲基金刚烷胺(rimantadine)、病毒唑(Virazole)等,前二者可引起中枢性眩晕和迅速耐药毒株的出现1,而低剂量口服病毒唑 g/d无明显抗病毒作用,大剂量口服对无并发症流感患者退热与症状消除的作用较快3,但大剂量口服的毒性较大,且对乙型流感无 治疗 作用。祖国传统医学中用中草药治疗流感 历史 悠久。流感,在祖国医学属风寒伤于足太阳经,即时病的范畴。现代的体外实验也证实了中草药的抗病毒作用。中药复方正柴胡饮引自古方,清热解毒,解热

7、镇痛,亦有对病毒的抑制作用。我们的实验显示:正柴胡饮在无毒浓度L下在体外对FM1有较好的抑制作用,在无毒浓度L下在体外对昆科70B有较好的抑制作用。此次实验采用效果确切的抗病毒药物病毒唑做阳性药物,与正柴胡饮进行对照,实验结果确实可信,我们将在此基础上做进一步的 研究 。 【 参考 文献 】 1 wade R CF1uand structurebased drug designJStructure,1997,5(9):1139. 2 郭元吉,李建国,程晓雯,等.禽H9N2亚型流感病毒能感染人的发现J.中华实验和临床病毒学杂志,1999,13:105108.3 Stain DS,Creticos CM,Jackson GG, et al. AntimicrobeagentsJ. Chemother,1987,31:1285. 课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。

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