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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果 建立兔脑内血肿模型研究 【摘要】 目的 建立稳定、可靠、重复性好的兔脑内血肿模型。 方法 利用兔不抗凝自身血注入脑基底节区形成血肿。通过高磁场强MR序列评价两种注射法的差异。并通过神经功能缺损评分判断血肿对机体的影响。 结果 MR显示缓慢匀速注射法可形成较稳定、形态规则的血肿，与快速注射法形成血肿大小比较差异有显著性。神经功能评分可见缓慢匀速注射组得分()、快速注射组()，对照组未见明显神经功能异常，前两者差异有显著性。 结论 利用缓慢匀速注射法、不抗凝自身血
2、注入兔脑基底节区可形成稳定、可靠、重复性好的脑内血肿模型。 【关键词】 兔 脑内血肿 磁共振 动物实验 【Abstract】 Objective To make a reproducible hemorrhage model in rabbits by injecting autologous blood slowly and gently. Methods Autologous blood was injected into caudate nucleus of rabbit slowly. Comparing the two injection methods by high field
3、MR scanning. The neurologic deficit score were investigated. Results MRI revealed the stable and formula intracerebral hemorrhage in gently injection . Statistics showed significant difference between gently injected and fast injected. Neurologic deficit score showed significant difference between g
4、entle injection () and fast injection(). Conclusion The stable and reproducible intracerebral hemorrhage could be made with autologous blood through gentle injection. 【Key words】 rabbit intracerebral hemorrhage magnetic resonance imaging animal experiment 临床上脑出血的发病率及病死率均较高，对其研究也在不断深入。脑出血除了占位效应外，血肿引起
5、的脑水肿及继发性损伤已受到重视。因此，建立稳定可靠、重复性好的脑内出血动物模型将对临床、病理研究及影像学诊断提供很大帮助。作者介绍家兔自身血缓慢匀速注射法及快速注射法制作脑出血模型，并对两种方法进行比较。 1 材料与方法 实验动物及分组 XX年12月至XX年2月采用体重XX2500g健康家兔30只。随机分成三组，每组10只。分为缓慢匀速注射组、快速注射组及对照组。 模型制作方法 (1)动物麻醉及穿刺定位：常温下给予家兔戊巴比妥钠，经耳缘静脉注射麻醉。麻醉成功后动物浅感觉消失，呼吸平稳。将动物固定于立体定向仪上。颅顶部脱毛、消毒。取兔眶上切迹后方11mm水平、正中矢状线旁开处作为基底节区穿刺点。
6、切开皮肤分离至骨膜，颅骨钻孔。(2)穿刺、注血：缓慢匀速注血法：用1ml针筒在兔耳正中动脉抽血共500l，立即经颅顶钻孔垂直穿刺入基底节区，深度11mm。穿刺到位后2min内缓慢匀速注入250l自体血至基底节区形成血肿，注射完成后保留穿刺针8min，以防止血液自针道反流。快速注血法：穿刺到位后快速注入自体血以形成脑内血肿，注射完成后保留穿刺针8min，以防止血液自针道反流。对照组：第1组5只动物只钻孔不穿刺；第2组5只动物只穿刺，但不注血。 MR扫描并测量血肿大小 采用GE Signa Horizon LX 超导型磁共振机，相控振头线圈。扫描序列：T1 wEighted imaging(T1W
7、I)、TwEIghted imaging(T2WI)、gradient echo T2* weighted imaging(GRE T2*WI)。脑内血肿形成后30min、3、6、12、24h分别行T1WI、T2WI、 T2*WI序列扫描。观察血肿位置、形态，并测量血肿体积。 神经功能缺损评分 24h后观察实验兔神经功能情况，全部模型均出现不同程度神经功能障碍症状，如偏瘫、偏盲、反应迟钝等。用Gacia方法对实验兔进行神经功能评分，最高18分，分值越低功能障碍越重。 病理检查 每组各5只实验兔于血肿形成后24h取病理组织检查。实验兔MR扫描后放血处死，取脑固定于9甲醛24h，以针道为中心，2m
8、m层厚切片。常规石蜡包埋、HE染色。 统计学处理 采用SPSS 软件，采用方差分析比较两种注射法血肿大小，采用t检验分析两组兔神经功能评分差异。2 结果 MR各序列扫描 MR各序列扫描：T2*WI显示血肿范围较清楚，30min时即可清楚显示基底节区血肿。缓慢匀速注射组形态较规则，大小较一致。快速注射组血肿形态欠规则、大小不一。T2WI上血肿呈稍高信号，边界欠清；T1WI上血肿呈等信号，边界不清。对照组未见明确血肿形成。在T2*WI序列上测量血肿体积，体积计算按公式长宽厚度1/2。表1 两种注射法在T2*WI图像上所形成血肿体积测量值比较 神经功能评分 缓慢匀速注射组得分()，快速注射组()，对照组未见明显神经功能异常。 病理观察 24h缓慢匀速注射组均形成较规则血肿，HE染色高倍镜下见血肿周围可见大量小胶质细胞、中性粒细胞浸润，并见少量神经元坏死。快速注射组血肿形成不规则，其中4例破入侧脑室，3例形成硬膜下血肿。对照组未见明确血肿形成，其中5例穿刺者仅见针道周围少量出血。两种穿刺方法形成脑内血肿体积大小差异 有显著性，F，P 课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。
