紫外吸收光度法鉴别和测定维生素b12注射液实验报告数据分析

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1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划紫外吸收光度法鉴别和测定维生素b12注射液实验报告数据分析紫外吸收光度法鉴别和测定维生素B12注射液【实验内容】1.对照品溶液和样品溶液的配制准确称取维生素B12对照品适量,加水溶解稀释成25g/mL的溶液。精密吸取维生素B12注射液ml于10ml容量瓶中,用水稀释至刻度摇匀,得到待测样品溶液。2.吸收光谱的绘制与注射液的鉴别取对照品溶液进行光谱扫描,得到维生素B12的吸收曲线,寻找吸收峰,扫描后可得到在278nm,361nm和550nm波长处出现的3个吸收峰,然后在以上3个吸收峰处

2、测量维生素B12注射液的吸光度,并计算A361/A278和A361/A550的比值。3.维生素B12的定量测定根据吸收曲线选择最大吸收波长作为测量波长,测量维生素B12【注意事项】1.注意石英比色皿的操作使用;峰位置波长略有差异。这是因为不同的仪器由于其性能的差异,导致吸光度和波长等参数不同,因此必须对仪器进行定期的校正。3比较用吸光系数和校正曲线定量方法,你认为哪种方法好?为什么?吸光系数法可根据测量得到的吸光度直接计算浓度,简便易行,但仪器性能差异会导致结果误差较大,因此必须对仪器的吸光度和波长进行校正后方能采用此法,且浓度要在复合Beer定律的线性范围内。校正曲线法是配制一系列标准溶液作

3、为基础进行测量,即使有偏离Beer定律线性关系,也可以应用于测定。因为是在相同条件下测量,有标准溶液的校正,可抵消仪器性能、操作等所带来的系统误差,与前一种方法相比,虽然操作步骤要繁琐些,但准确、可靠,是测定最常用的方法。紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法;2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。二、实验原理维生素C是一种酸性己糖衍生物,具有烯醇式己糖内酯立体结构,分D和L两种立体构型,但只有L型有生理功效。维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的

4、烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基,仍具有有机酸的性质。维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。具有电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等,在紫外光谱区都有强烈吸收,其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。利用紫外吸收光谱进行定量分析,要借助朗伯-比尔定律。根据维生素C在稀硫酸溶液中,在245nm波长处有最大吸收的特性,建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。三、实验仪器及试剂实验仪器:容量瓶、移液管、烧杯、紫外分光光度计实验用品:98%浓硫酸、

5、维生素C对照品系以原料药经105干(来自:写论文网:紫外吸收光度法鉴别和测定维生素b12注射液实验报告数据分析)燥至恒重、维生素C片、去离子水四、实验步骤1.molL-1硫酸溶液的配制用ml移液管移取ml98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中,搅拌,冷却至室温后移入1000ml容量瓶,稀释至刻度,待用。2.gL-1对照品溶液的配制精密称取105干燥至恒重的维生素C对照品50mg置100ml量瓶中,加molL-1硫酸溶液制成gL-1对照品溶液。3.维生素C对照品标准溶液的配制用5ml移液管精密量取gL-1对照品溶液、ml,分别置100ml量瓶中,用molL-1硫酸溶液稀释至刻度,摇匀,待用。4

6、.测定波长及标准曲线以molL-1硫酸溶液为空白,测定维生素C在稀硫酸溶液中最大吸收波长,并在此波长处测定维生素C对照品标准溶液的吸光度,以浓度对吸光度作线性回归。5.样品含量测定取维生素C片2片,精密称定,研细,精密称取适量置100ml容量瓶中,加molL-1硫酸溶液适量,超声5min使溶解,再加molL-1硫酸溶液至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液ml置100ml量瓶中,加molL-1硫酸溶液至刻度,摇匀,在最大吸收波长处测定吸光度。6.空白试验模拟维生素C片处方比例,精密称取辅料适量置100ml量瓶中,与步骤5样品含量测定同法操作,在最大吸收波长处测定吸收度为0。7.回收率试

7、验先测得2ml样品溶液的吸光度A1,再取g/L的VC标液200l,于2ml已测得吸光度A1的样品溶液中,再测得吸光度A2。五、实验数据记录及处理1.维生素的吸收波长在紫外可见分光光度计上扫描测定VC标准样品的吸收光谱,结果显示VC在244nm波长处的吸光度值最大。Abs2000-1?/cm2.维生素C对照品标准曲线Absc(g/L)y=x-R=3.样品中维生素C含量测定样品中VC含量?CVC?50?100%mVC4.回收率试验先测得2ml样品溶液的吸光度A1,再取g/L的VC标液200l,于2ml已测得吸光度A1的样品溶液中,再测得吸光度A2。回收率?总测定值?本法测定值?100%加入量六、实

8、验结果及讨论1.维生素C还原性很强,在空气中易被氧化,在酸性介质中氧化作用减慢,水溶液在pH=56之间稳定,故本实验选用molL-1硫酸溶液为溶剂,维生素C稳定性好。2.标准曲线R=,且测定的未知样品的吸光度均落在标准曲线有效的范围内,实验结果表明,维生素C在g/L范围内与吸光度呈良好的线性关系。3.由于对加标回收率的原理及概念模糊,导致实验在这一环节消耗较多的时间。本实验测得维生素C的平均回收率为%,相对标准偏差为%。4.利用紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量,该法操作简便,快速,准确,所用试剂价格低廉、易得,适合维生素C片剂含量测定的快速分析。维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴

9、别和测定分类:仪器分析实验报告一、实验目的(略)二、实验原理1、定性鉴别利用VB在278nm。、361nm、550nm处的特征峰,进行定性鉴别:A361/A550=2、定量分析根据朗伯-比尔定律,用吸光系数法测定。对某一确定的物质,在一定的波长下,某吸光系数为一定值(查表得),测得吸光度A后,即可计算浓度:维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定三、实验步骤1.精密移取VB12注射液于容量瓶,以蒸馏水定容2.用上述稀释液在扫描,记录特征峰波长3.做定性鉴别4.以最大吸收峰处的吸光度计算VB12的含量及标示百分量注:VB12标示量百分含量在90%内均为合格。四、仪器与试剂(注意:紫外-可见

10、光光度计记得写明厂家、型号)五、实验结果与数据处理(一)计算式VB12浓度:维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定(二)实验数据:1维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定结果(三)计算分析维生素B12吸光谱的绘制及其注射液的鉴别和测定结论:A361/A550在范围内,所以溶液中含有VB12该VB12含量合格六、思考题1.利用邻组的实验结果,比较同一溶液在不同仪器上测得的吸收曲线的形状、吸收峰波长以及相同浓度的吸光度等有无不同,试作解释。答:(1)、本组和邻组的吸收曲线和吸收波长大致相同,但相同的浓度吸收度稍微不同,本组各波长吸收度偏低。原因包括:1、同仪器的灵敏度不同;(2)、

11、配制溶液时定容等操作导致的误差。2、比较用吸光系数和工作曲线定量方法,你认为哪种方法更好?为什么?吸光系数法需要从文献、药典等资料查得吸光系数(单位浓度的吸光度),所以只能用于测定有吸光系数的已知物质,并且测定吸光度的仪器与自身的仪器灵敏度和实验条件均存在差异,所以比标准曲线法存在更大的误差。工作曲线法是指通过多个标准浓度的溶液来确定溶度与吸光度的线性规律,利用这一线性规律求得样品的溶度。工作曲线可以消除仪器误差和操作误差,此外,出标准曲线与样品测定是在同一台仪器和相同的实验条件。所以工作曲线法更好。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。

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