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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划神经干不应期的测定实验报告实验二蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定一、蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定实验目的：加强理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。熟悉仪器设备的操作。实验原理：通过测出示波器上动作电位传导的距离和传导所需的时间，计算传导速度，可以了解神经的兴奋状态。1.潜伏期法：测量第一个通道动作电位潜伏期的时间t，输入刺激电极到第一个引导电极间的距离s，v=s/t。2.潜峰法：测量两个通道的动作电位波峰间的时间差和两对引导电极间的
2、距离，v=(s2-s1)/(t2-t1)。实验步骤：1.制备坐骨神经-腓神经标本，放入神经屏蔽盒。2.连接仪器，引导动作电位波形。3.剪裁编辑图形，计算传导速度。实验结果：1.2.计算S=10mm,t=,v=10mm/=33m/s分析讨论：1.我们通过对潜伏期法和潜峰法测定结果的比较，结合神经干的特性进行分析：动作电位的起点本质是神经干中传导速度最快的一类神经纤维传导兴奋到达记录点引起的，潜伏期法测量的速度本质是此类神经纤维的传导速度。而潜峰法的形成本质是各种神经纤维兴奋相互叠加后最强的部分。如果采用潜峰法测量，由于“迁延效应”代表的时间不够准确，不能代表神经干的传导速度，故应该采用潜伏期测量
3、才更准确。2,.兴奋以局部电流的方式沿着神经干表面传导,兴奋传播过程中造成引导电极下电位改变,故可记录到双相动作电位.通过两对引导电极可观察到兴奋由一对引导电极下传至另一对引导电极下所需时间,根据兴奋传播的距离和所需时间即可计算出传导速度.实验结论：本实验中测出神经干动作电位的传导速度为33m/s。由实验可知，神经纤维在静息状态下受到有效刺激可产生动作电位，同一条神经干中不同的神经纤维兴奋性不完全相同，且在一次兴奋后兴奋性发生改变，兴奋以一定的速度在神经干表面传导，神经兴奋的传导依赖于神经纤维的完整性。二、兴奋性不应期的测定实验目的：了解测定不应期的方法和原理，并加深对兴奋性在兴奋过程中的变化
4、过程的理解。实验原理：神经纤维受到适宜刺激后，产生兴奋，即动作电位。一次兴奋产生后，必须经绝对不应期、相对不应期、超常期等变化后，兴奋性才能恢复。本实验中先给一个条件刺激，再用另一个检验刺激在兴奋的不同时期给予刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值及所引起动作电位的幅度。即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。实验步骤：1制备坐骨神经-腓神经标本，并浸在任氏液中，待其兴奋性稳定后实验。2.连接仪器，设置实验参数，观察并测量神经干的不应期。实验结果：分析讨论：1.刺激引起组织兴奋必须在三方面达一定值,即一定的刺激强度,一定刺激持续时间及强度/时间变化率,本实验固定时间和强度/时间变化率，用连续两次
5、同样的刺激作用神经干,观察第二次刺激能刚好能引起动作电位产生的时间即为绝对不应期,第二次刺激刚好能引起相同大小的动作电位则可测出相对不应期.2.一条神经干中有无数条神经纤维,每条神经纤维的直径和长度不同,膜特性也不完全一样,故兴奋性不同,阈值各异,而本实验记录到的双相动作电位是神经干中各条神经纤维动作电位的复合表现,故随着刺激强度的增大双相动作电位幅度也增大.3.神经纤维传导兴奋需要神经具有生理完整性,即结构和功能完整,4.神经干结扎棉线不要留得太长,以免引起干扰信号，调整接地电极的位置可减小刺激伪迹的干扰作用，如果实验中未能引导出动作电位曲线,可检查以下项目：:(1)坐骨神经干在分离过程中是
6、否损伤(2)刺激电极的极性是否接反(3)引导电极是否接上或神经标本是否与引导电极接触良好(4)记录系统灵敏度是否调到一定大小。实验结论：兴奋性的不应期包括绝对不应期、相对不应期、超常期、低常期。实验二：骨骼肌的单收缩与复合收缩及神经干动作电位、神经冲动传导速度、神经干不应期的测定实验人：同组人：【实验目的】?了解肌肉收缩过程的时相变化观察刺激强度和频率对骨骼肌收缩形式的影响掌握离体神经干动作电位的细胞外记录法及其基本波形的判断和测量。掌握神经干动作电位传导速度及其不应期的测定方法。【实验原理】?骨骼肌的单收缩与复合收缩肌肉兴奋的外在表现是收缩。当其受到一个阈上强度的刺激时，爆发一次动作电位，迅
7、速发生一次收缩反应，叫单收缩。单收缩曲线分为潜伏期、收缩期、舒张期三个时期。在一定范围内，肌肉收缩的幅度随刺激强度的增加而增大。当相继受到两个以上同等强度的阈上刺激时，因频率不同，下一次刺激可能落在前一刺激所引起的单收缩的不同时期内，造成：?几个分离的单收缩：频率低于单收缩频率，间隔大于单收缩时间?收缩的总和：?不完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的舒张期?完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的收缩期内，各收缩不能分开，肌肉维持稳定的收缩状态。?神经干动作电位、神经冲动传导速度、神经干不应期的测定?神经干是由许多神经纤维组成的，神经兴奋的标志是动作电位。在一定范围内神经干动作电位的幅度随刺激
8、强度的增加而增大，这是由于各神经纤维兴奋性的不同，虽然每条纤维动作电位产生都遵守“全或无”的方式，但神经干动作电位记录到的是多个兴奋阈值、传导速度和振幅各不相同的动作电位的总和，为一个复合动作电位，所以不存在阈强度，也不表现为“全或无”的特征。根据引导方法的不同，可分别得到双相、单相动作电位。?动作电位在神经纤维上的传导有一定的速度。不同类型的神经纤维其传导速度各不相同，主要取决于神经纤维的直径、有无髓鞘、环境温度等因素。蛙类坐骨神经干传导是速度约为35-40m/S,神经纤维在一次兴奋过程中，其兴奋性可发生周期性变化，包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期。?为了测定神经一次兴奋之后兴奋性
9、的变化，可先给神经施加一个条件性刺激，引起神经兴奋，然后再用一个检验性刺激在前一兴奋过程的不同时相给予刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值，以及所引起的动作电位的幅度变化，来判断神经组织兴奋性的变化。本次实验中所给条件性刺激和检验性刺激系两个参数完全相同的刺激，用在不同时间间隔内检查检验性刺激的动作电位的变化，来反映部分神经纤维兴奋性的变化规律。神经干兴奋后兴奋性的变化【实验材料及设备】?蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本及相关用品：蛙类手术器械一套，蛙板，铁支架，肌夹，玻棒，小滤纸片，纱布，培养皿，小烧杯，棉花，秒表，滴管，铜锌弓，纱布，医用缝合线，玻璃分针，眼科剪，解剖针盐酸，2%普鲁卡因，清水，
10、任氏液.任氏液的配方为：ggCaCl2gNaHCO3gNaH2PO4gGlc(可不加)g加H2O至1000mL?RM6240B生物信号采集处理系统，张力换能器，PowerLab4SP生物信号采集系统，屏蔽盒【实验步骤】?骨骼肌的单收缩与复合收缩实验部分1.制备坐骨神经腓肠肌标本2.将标本股骨固定在肌槽上，结扎肌腱的棉线与换能器相连，神经置于刺激电极上，用任氏液保持标本湿润，刺激电极与主机刺激输出相连，换能器与放大器相连，放大器相应通道与主机相连。3.打开主机、计算机，Powerlab系统在电脑桌面上找到“张力实验”，双击打开。4.从零开始逐渐增加刺激强度(V)，找出引起肌肉收缩的最小刺激强度，
11、增大刺激强度，观察刺激强度与收缩曲线高度的关系。5.从零开始逐渐增加刺激强度(V)，找出引起肌肉收缩的最小刺激强度，增大刺激强度，观察刺激强度与收缩曲线高度的关系继续增大刺激强度，当肌肉收缩曲线不再随刺激强度增大而增高时，记下最大刺激强度。6.在域刺激强度和最大刺激强度之间选择一个合适的强度固定不变，逐渐增大刺激频率，观察记录收缩形式的变化，分别记录可使肌肉出现单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩时的刺激频率及相应曲线。?神经干动作电位、神经冲动传导速度、神经干不应期的测定部分1.制备坐骨神经标本2.测量双相动作电位a)将神经干标本置于标本屏蔽盒内，使神经干与刺激电极、接地电极、引导电极均接触
12、良好。b)神经干需经常用任氏液润湿，取神经干时须用镊子夹持结扎线和脊椎骨，切不可直接夹持或用手触摸神经干。c)打开系统软件，点击开始示波，主菜单中“实验”下拉选择动作电位实验，自动弹出或在主菜单“setup”中找到stimulator，刺激同步，调节刺激为单刺激，调节频率、时间、强度，开始刺激，记录波形，辨别刺激伪迹和动作电位。d)调换引导电极的位置，观察动作电位波形有无变化，改变标本放置位置后，波形有无变化。3.测定传导速度：a)开始示波，选择实验，刺激同步，刺激，记录波形，记录前一个动作电位起始部位与后一个动作电位起始部位之间的时间间隔b)测量引导电极1，2之间的坐骨神经干的长度，用“S”
13、表示(单位：米)c)根据公式V=S/T计算神经冲动的传导速度。4.不应期的测定：a)开始示波，选择不应期自动测定试验，刺激同步自动，每出一个波形都要“记录当前波形”，至3ms时停止，pageup/pagedown看相关波形，记录相对不应期和绝对不应期b)相对不应期：检验性刺激引起的动作电位幅度开始减小时两刺激间的时间间隔。c)绝对不应期：检验性刺激引起的动作电位刚好消失时两刺激间的时间间隔。5.单相动作电位：用镊子将两引导电极之间的神经夹伤，观察动作电位变化。【实验结果及相关讨论】?骨骼肌的最小和最大刺激强度100mV刺激达到阈强度10mv，轻微收缩50mV50mV120mV20mv70mV1
14、10mV电刺激从零开始增大到10mv时，骨骼肌发生第一次收缩，增大到50mv时，到达收缩最大量，继续增大电压，收缩强度基本不变。因而该标本的阈强度为v1=，最大刺激的强度为v2=。其中50mv时做了两次刺激，第一次收缩幅度没有第二次大，第二次达到了最大幅度，这说明离体神经元的活动不是特别稳定，即使是相同幅度的电刺激也可能会有不同的反应。横向比较发现，阈强度和最大刺激强度偏小，可能和标本生理活性有所损失有关。随着刺激强度增大，标本收缩强度增大。这时因为神经干是由许多神经纤维组成的，神经兴奋的标志是动作电位。在一定范围内神经干动作电位的幅度随刺激强度的增加而增大，这是由于各神经纤维兴奋性的不同，虽
15、然每条纤维动作电位产生都遵守“全或无”的方式，但神经干动作电位记录到的是多个兴奋阈值、传导速度和振幅各不相同的动作电位的总和，为一个复合动作电位，所以不存在阈强度，也不表现为“全或无”的特征。因而刺激强度增大，标本收缩强度增大。另外实验过程中发现，当电压继续增大，会发生收缩反而减小，图中显示120mv刺激的收缩幅度要比110mv的收缩幅度小。同时会出现无规律收缩，这可能和标本疲劳，活性降低有关。立即放入仁氏液，浸泡。?肌肉单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩曲线的测定同一强度不同频率刺激下肌肉收缩曲线。图中出现的三种波形分别为单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩的波形。左图为单收缩，强度紧接着
