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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划环状沉淀反应实验报告实验三沉淀反应可溶性抗原如血清，毒素、细菌浸出液等和相应抗体相遇，当二者比例适当，并有电解质参与时，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应(precipitation)。参与沉淀反应的抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。由于沉淀原多为可溶性物质，单位体积内所含的抗原量较多，与抗体结合的总面积大，为求得抗原与抗体的适当比例，操作时稀释抗原而不是稀释抗体，一般以出现沉淀现象的抗原最高稀释度作为沉淀反应效价。沉淀反应是临床上常用的血清学试验之一。它的种类很多，有环状沉淀、琼脂扩
2、散、免疫电泳等。利用可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂内进行扩散，当抗原与抗体相对应，二者比例适合时，就出现白色沉淀物。本试验可在试管内、平皿中以及玻片上的琼脂内进行操作。琼脂扩散试验可分为单向琼脂扩散试验与双向琼脂扩散试验等。一、单向琼脂扩散试验【原理】是单向免疫扩散(singleimmunodiffusion)试验中的一种定量试验。将一定量的抗体混合于琼脂内，倾注于玻璃板上，凝固后，在琼脂层中打孔，再将抗原加入孔中。孔中抗原向四周扩散，在抗原与抗体比例合适处，呈现白色沉淀环。沉淀环的直径大小与抗原的浓度成正比。如事先用不同浓度的标准抗原制成标准曲线，则未知标本中的抗原含量可从标准曲线中求出。
3、本试验主要用于检测血清中IgG、IgM、IgA和补体C3等的含量。【材料】1%盐水琼脂(生理盐水配制，琼脂含量%)。2人IgG诊断血清。3待检标本人血清。4全国统一人血清免疫球蛋白参考血清，系冻干正常人混合血清。5载玻片、微量加液器、打孔器(直径3mm)、注射针头、两脚规、直尺、半对数坐标纸等。【方法】1将适宜稀释度的诊断血清与预先溶化的%琼脂在56水浴中混匀，每块载玻片浇注3ml，制成免疫琼脂板。2用打孔器在免疫琼脂板上打孔，孔间距为，挑出孔内琼脂。3稀释参考血清每支干燥血清中加入蒸馏水，待完全溶解后，用倍比稀释成110、120、140、180、1160等5种浓度。4加样用微量加液器取10l
4、各种不同浓度的参考血清，准确地加到琼脂板的各孔中，每种浓度加2个孔，用以制作标准曲线。测待检血清时，血清用PBS作140稀释，每孔加10l，每份标本加2个孔。5加样的琼脂板置湿盒内，经3724h后取出，测各孔沉淀环直径(图1-1)。【结果】1取出琼脂板，即可见清晰的乳白色沉淀环。2标准曲线的绘制以各种浓度标准抗原的沉淀环直径为横坐标，相应孔中IgG含量为纵坐标，在半对数纸上画出标准曲线。根据待检血清沉淀环的直径，查标准曲线，将查得的IgG含量乘以标本的稀释倍数，即为血清中IgG含量(图1-2)。图1-1单向琼脂扩散试验示意图【注意事项】1制备免疫琼脂板时要掌握好温度。温度过高会破坏抗体活性；温
5、度低于42则琼脂很快凝固，不能制板。2应从低浓度到高浓度的顺序加样，以免出现误差。3沉淀环的直径以毫米为单位测量。沉淀环直径图1-2单向扩散标准曲线示意图分子生物学实验目录1P38质粒提取及蓝白斑筛选和Southern杂交实验.4实验目的和原理：.4学习碱裂解法提取质粒的原理.4掌握蓝白斑筛选的实验方法及原理.4地高辛标记的Southern杂交.4实验材料及实验仪器：.5质粒提取.5蓝白斑筛选.5地高辛标记的Southern杂交.5实验步骤.6质粒提取.6蓝白斑筛选.7地高辛标记的Southern杂交.8实验结果及分析：.10质粒PCR结果.10质粒酶切结果.10蓝白斑筛选实验结果.11蓝白斑筛选后菌落PCR结果.11Southern杂交实验结果分析.122.GFP质粒提取转化及绿色荧光观察实验.13实验目的和原理.13GFP质粒提取及转化同实验一中P38质粒的提取及转化.13阿拉伯糖诱导绿色荧光蛋白的表达.13实验材料及实验仪器.13实验步骤.14诱导GFP表达.14实验结果及分析：.143植物基因组DNA提取、酶切及电泳分析.15实验目的及实验原理.15实验材料及实验仪器.
