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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划植物生理学,叶绿体色素的提取,分离及含量的测定,实验报告实验报告课程名称：植物生理学实验指导老师：成绩：_实验名称：叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定实验类型：一、实验目的和要求了解改良半叶法、氧电极法测定光合作用和呼吸作用的基本原理，掌握红外线CO2分析仪法测定光合作用和呼吸作用，蒸腾速率和气孔导度测定的基本原理;掌握用LI-6400测定光合作用、呼吸作用、蒸腾速率和气孔导度的方法，测定光-光合响应曲线的方法.二、实验基本原理改良半叶法测定光合作用熟悉仪器基本结构，
2、及按装调试。以榕树和蚕豆等植物为材料，用LI-6400portablephotosynthesissystem测定它们的光合作用、呼吸作用、蒸腾速率和气孔导度及光-光合响应曲线，通过比较分析其属于什么光合类型植物。Principlesformeasuringphotosynthesisandrespiration6CO2+6H22O)+6O2一）测干重改良半叶法：同面积光暗叶片重量差。使用三氯乙酸涂抹在叶片叶柄处，阻断叶片在进行光合作用的时候向外输出营养物质。测定的为总光合作用量。二）测放O2氧电极法。气相和液相。氧电极的原理：氧电极是由嵌在有机玻璃上的铂和银所构成，以/LKCl为电解质，电极
3、头外覆盖一层聚乙烯或聚四氟乙烯薄膜，其厚度在1525m之间，用“”形套膜环固定，使电极与被测溶液隔离，而溶解在溶液中的氧仍能透过薄膜，进入电极内。较薄的膜易透过氧，因而对氧浓度变化的响应时间短.三）红外线CO2分析仪法：CO2吸收4260nm红外线,有封闭式：单位时间内CO2下降量和开放式：参比室和叶室CO2差值本实验将采用开放式测得。三、实验材料与试剂1.实验试剂：三氯乙酸2.实验材料：树叶、菜豆四、实验器材与仪器天平、湿毛巾、烘箱、打孔器、游标卡尺、剪刀、LI-6400portablephotosynthesissystem五、实验操作方法和步骤改良半叶法：光照不少于，注意测定打孔器内径。
4、放入铝盒中，开盖放进烘箱后，下周实验时测定重量。(二)CO2红外分析法测定瞬时光合速率、光响应曲线等。1.打开叶室夹好叶片，关紧叶室，按，F5选Quantumflux,输入光强值按1，F1，命名文件名及附加标记观察Photo稳定时，按采样键F1或测定器黑钮5次。2.在完成采样后，按，按F1,找Lightcurve,名命及做标记,按Y(使测量数据紧随上述数据后)。设置光强，设置测定装订线时间间隔的最小值和最大值，设置叶室和参比室间应进行自动匹配的CO2浓度，按Y开始自动测量。3.数据保存和取出。采样完后按，Closefile,按F5，end进入SLEEP半叶法-22CO2红外分析法表1、饱和光下
5、不同植物光合、呼吸和蒸腾速率、气孔导度及水分利用效率(平均值标准差)表一学号：.植物生理学实验报告学院名称：生物科学与技术年级班别：硕-植物11班姓名：张敏XX年3月7号实验一红外线CO2气体分析仪测定光合速率一、实验目的1.学习并掌握微量红外气体分析仪的工作原理和使用方法。2.使用微量红外气体分析仪测定植物光合速率。二、实验原理在密闭的系统中，由于同化室中的叶片进行光合后，系统中的CO2浓度不断下降，可用单位时间内同化室中CO2浓度的减少量或CO2浓度减少量所需的时间，根据叶片面积、同化室体积，计算光合速率。许多由异原子组成的气体分子对红外线都有特异的吸收带。CO2的红外吸收带有四处，其吸收
6、峰分别在m、m、m和m处，其中只有m的吸收带不与H2O的吸收带重叠，红外仪内设置仅让m红外光通过的滤光片，当该波长的红外光经过含有CO2的气体时，能量就因CO2的吸收而降低，降低的多少与CO2的浓度有关，并符合朗伯比尔定律。分别供给红外仪含与不含CO2的气体，红外仪的检测器便可通过检测红外光能量的变化而输出反映CO2浓度的电讯号。三、分析检测原理红外线通过两个气室，一个是充以不断流过的被测气体的测量室，另一个是充以无吸收性质的背景气体的参比室。工作时，当测量室内被测气体浓度变化时，吸收的红外线光量发生相应的变化，而基准光束(参比室光束)的光量不发生变化。从二室出来的光量差通过检测器，使检测器产
7、生压力差，并变成电容检测器的电信号。此信号经信号调节电路放大处理后，送往显示器以及总控的CRT显示。该输出信号的大小与被渊组分浓度成比例。接收室内充以样气中的待测组分，两个接收室中间用一个薄的金属膜隔开，在两测压力不同时膜片可以变形产生位移，膜片的一侧放一个固定的圆盘型电极。可动膜片与固定电极构成了一个电容变进器的两极。整个结构保持严格的密封，两接收气室内的气体为动片薄膜隔开，但在结构上安置一个大小为百分之几毫米的小孔，以使两边的气体静态平衡。辐射光束通过参比室、测量室后，进入检测器的接收室。被接收室里的气体吸收，气体温度升高，气体分子的热运动加强，产生的热膨胀形成的压力增大。当测量室内通入零
8、点气(N2)时，来自两气室的光能平衡，两边的压力相等，动片薄膜维持在平衡位置，检测器输出为零。当测量室内通入样气时，测量边进入接收室的光能低于参比边的，使测量边的压力减小，于是薄膜发生位移，故改变了两极板问的距离，也改变了电容量C。于是输出一个与待测组分浓度成比例的电信号。四、材料与方法1.植物材料：百合竹，龙舌兰科。2.使用仪器：微量红外气体分析仪。图中仪器型号FF1-FQ-B。图1微量红外线气体分析仪3.实验步骤：按要求将参比管和工作管气路系统交叉连接起来，一端接到气泵，一端连接到充满NaOH颗粒的透明玻璃长管，使气路闭合。将作用开关打到A，接通电源，打开红外仪电源预热一段时间，打开气泵电
9、源，仪表盘指示的CO2浓度缓慢下降，直到零点附近，如果偏离零点，需要将作用开关达到C调零。仪表盘上由上向下分别标有4套刻度值，其最大数值依次为600ppm,300ppm,150ppm和75ppm，它们在步进开关分别对准1，2，3和4时使用，误差从5ppm，到。调零校准仪器时需要由粗到细，再由细到粗。调零后，将参比管进气口和出气口相连以封闭参比管，将工作管进气口接高浓度CO2气，另一端接气泵，再通入密闭透明同化室，使气流流过同化室中的植物，最后回到仪器中检测。未照射强光，稳定一段时间测定CO2浓度C1。照射光强约6000Lux的强光，观察CO2浓度变化，并测定CO2稳定时的浓度C2。五、实验结果
10、外界大气压刚刚充入时，在没有照光情况下，测得CO2浓度C1为243ppm。照射强光后，3min后CO2浓度C2下降到190ppm，5min后CO2浓度C2下降到170ppm，10min后CO2浓度C2下降到158ppm。根据：PnCV273P/tS(273t)其中Pn为光合速率，C为CO2浓度差C1-C2(ppm)，t为测定时间，S为叶片面积，V为封闭同化室体积，t为同化室的温度，P为大气压，按照同化室体积15*15*30cm3，空气大气压1个标准大气压，测定时间30min，叶面积单叶与整株植物叶片数量乘积，同化室温度25测算，得出百合竹的光合速率为mol/m2s。六、分析与讨论在没有照光情况
11、下，测得CO2浓度C1为243ppm。照射强光后，3min后CO2浓度C2下降到190ppm，5min后CO2浓度C2下降到170ppm，10min后CO2浓度C2下降到158ppm，说明在光照过程中CO2不停地被消耗，植物光合作用吸收了CO2。吸收的CO2量能够反应植物光合作用的状况。进而通过相关公式计算出其光合作用速率。说明了CO2的消耗是与光合作用速率相关的。利用这种方法测定植物光合速率时需要考虑同化室体积，因为同化室体积与植物株型不符，如同化室远大于植物，则测算出的光合速率可能偏高。测定时间并不是越长越好，因为长时间处于密闭的同化室，叶片蒸腾、光呼吸等生理变化会对测量产生干扰，比如强光
12、照射时间长可能产生一定热量，使同化室温度上升。另外气路的密闭性也能造成测量误差，因为如果仪器气路漏气，会使同化室中植物吸收量计算值偏大，导致过高估计植物光合速率。实验二离心薄层色谱法分离叶绿素一、实验目的1.学习并掌握植物叶绿素提取、分离和吸收光谱曲线的绘制。2.学习并掌握旋转薄层层析法。二、实验原理离心薄层色谱(centrifugalthinlayerchromatography，CTLC)属于薄层色谱的一种，又叫旋转薄层色谱，是一种离心型连续洗脱的环形薄层色谱分离技术，主要是在经典的薄层色谱基础上运用离心力促使流动相加速流动。离心力用于分离，可以减少破坏，对沸点高、分子量大的化合物有利，可
13、用于分离100mg左右的样品。植物叶绿素a和叶绿素b在有机溶剂中溶解度不同，根据叶绿素a和b在固定相和流动相之间的吸附、分配作用的不同，再加上离心加速度的作用，使两组分之间原有的比移率差异加大，从而提高了分离效果。三、实验材料与方法1.植物材料：油松，松科。2.使用仪器：圆板薄层仪。图1油松图2圆板薄层仪3.实验步骤：叶绿素提取。称取油松10g，剪碎，放入研钵中，加入少许CaCO3和石英砂，再加烯效唑(S-3307)对小麦幼苗生长发育的影响摘要：此次实验是采用烯效唑的不同浓度浸种小麦种子，以此来研究小麦的幼苗形态和生理指标。在这次实验中共设0、10、30和50mgL的烯效唑浸种4个处理，对小麦
14、种子的呼吸强度、幼苗根系活力、幼苗叶绿素含量、丙二醛含量等指标进行了测定。实验结果表明：不同浓度烯效唑浸种对小麦幼芽呼吸强度有一定的抑制作用；烯效唑能增大根/冠比；提高根系活力；促进叶绿素含量的增加；但是丙二醛含量降低。烯效唑浸种能使小麦矮化壮苗、增强植物抗性。关鍵词：小麦烯效唑生长形态指标生理指标前言：烯效唑是一种高效、低毒的生长延缓剂,具有活性高、低毒、低残留等特点，广泛适用于农作物、蔬菜、果树、草坪等11-12。烯效唑能减缓细胞的分裂和伸长，抑制节间生长，幼苗高度明显降低，茎粗和分蘖数增加，增强根系活力，提高叶绿素含量，延缓作物衰老，促进花芽形成，根冠比增加和提高光合速率等生理效应。种子
15、经过浸种法处理可以充分吸收水分，利于催芽播种；可以使种子吸收一定量的农药，既可以杀灭种子携带的有害生物，又可以防止幼苗遭受病虫的危害，浸种可提高秧苗根系活力和根冠比，增加叶绿素的含量，从而保证健壮苗的形成。近些年对S3307大量实验研究表明，S3307浸种可使小麦幼苗健壮、叶片增加、叶色浓绿、根系发达和分蘖数增多，促进成穗，并有明显的增产效果41、材料与方法材料与试剂：经不同烯效唑浓度处理的小麦种子，90%S-3307，%消毒液HgCl2方法：种子的前处理精选小麦种子，用%HgCl2消毒10min,用清水冲洗干净消毒液，分别用0、10、30、50mg/ml的多效唑溶液浸种20小时，倒掉浸泡液，将种子放在培养盘中，在250C-280C的恒温箱中催芽三天，待长出幼芽后，测定幼芽的呼吸强度。幼苗栽植与培养(水培法)选取在不同浓度S-3
