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1、“1893年的一天,在演奏完第六交响曲(悲恸交响曲)之后,柴可夫斯基来到大街上散步,忽然感到口渴,就进了一家饭店,要了一杯冷水喝,谁知就是这样一杯水要了他的命。是情杀、仇杀还是另有原因呢?凶手是谁呢?”,当时俄罗斯发生霍乱大流行,最后医生确认,这杯水中含有霍乱弧菌,致使天才音乐家http:/ 柴可夫斯基染上致命的霍乱而死去。为什么这个故事中特别指出是“冷水”? 霍乱可能通过什么途径传播? 冷水中有多少霍乱弧菌才可能使柴可夫斯基发病?“千军万马过胃部”“集团作战”。,1883年,埃及发生了一次瘟疫大流行,成千上万的病人一批批死亡。患者往往起病急,出现严重的腹泻和呕吐,米泔样大便。若得不到及时救治
2、,常常在短时间内因全身脱水、肌肉痉挛和周围循环衰竭,造成休克而死。,一名在印度某水电站工作的44岁http:/ 工程师,突发大量水样泻,由于每小时约0.5L液体的丢失,患者很快出现紫绀及重度脱水症状,肠鸣音减弱,低血压,血容量减少,其排出物呈等渗,暗视野显微镜检查,小胸泳衣发现逗点状微生物。 Q1、患者最有可能患有何种疾病? Q2、如何确诊?,病例分析,形态与染色:革兰染色阴性,弧菌,单端鞭毛,运动活泼。,扫描电镜,霍乱弧菌,一、生物学特性,鱼群状排列,病人米泔水样粪便涂片镜检,可见大量弧菌首尾相互衔接,平行排列如鱼群状。,霍乱弧菌 Vibrio cholerae - vibrio-shape
3、d prokaryote that causes cholera,霍乱弧菌(鞭毛染色),霍乱弧菌(扫描电镜),一、生物学特性,抗原构造与泳衣分群: H抗原:无特异性 O抗原:分群,培养特性:耐碱怕酸,pH 8.8-9.2,可在无盐环境中生长,古典生物型 O-1群 EL Tor 生物型非O-1群 引起散发性胃肠炎。 O-139型,1992年起引起 霍乱流行。,一、生物学特性,与人类感染有关的主要弧菌,抵抗力:较强,但100 1-2 分钟可灭活,怕酸(1份漂白粉加4份水,1小时),一、生物学特性,致病性与免疫性,致病物质:鞭毛与菌毛:运动并粘附至小肠粘膜肠毒素:AA1:毒性组分,使腺苷酸环化酶活性
4、增高,cAMP 大量增加。A2:与 B 结合B与小肠上皮细胞神经节苷脂受体结合,霍乱肠毒素结构:1A、5B,霍乱肠毒素( CT):由一个A亚单位和5个相同的B亚单位构成的一种聚合蛋白。,致病物质-霍乱肠毒素:,激活腺苷环化酶,使细胞内cAMP水平升高,主动分泌Na+、K+、HCO3和水,导致重的腹泻与呕吐,B亚单位,A亚单位,与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合,介导A亚单位进入细胞,(结合亚单位),(毒性亚单位),B亚单位 与小肠粘膜 上皮细胞 GM1神经节苷脂受体结合,A亚单位裂解为A1和A2两条多肽,A1亚单位小胸泳衣进入细胞发挥毒性作用,A1活化AC(腺苷环化酶) ,使ATP转化
5、成cAMP(环磷酸腺苷 ),使之在细胞内含量增高,cAMP水平升高,导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进,大量水和电解质在肠腔堆积,引起剧烈腹泻,霍乱肠毒素的作用机制,传染源:患者及带菌者 人类是唯一易感者 摄入108-1010个细菌可造成感染,引起霍乱 传播途径: 经水传播 经食物传播 经生活接触传播 经苍蝇传播,霍乱: 一种残忍的瘟疫,霍乱病人,重型 腹泻次数一日20次以上,极度烦躁甚至昏迷,皮肤弹性消失,眼窝深凹,明显发绀,严重肌肉痉挛,脉搏微弱而速,甚或无脉,血压下降或测不到,尿量每日少于50ml或无尿,脱水程度儿童相当于体重10%以上,成人8%以上。,霍乱,剧烈的喷射状呕吐休克、电解质紊乱及
6、酸中毒腹泻物呈米泔水样不治疗,死亡率达60%,致病性与免疫性,所致疾病: 霍乱易感者:人类是霍乱弧菌的唯一易感者传播途径:消化道可疑水、食物(菌 1081010)2-3天突然出现剧烈腹泻与呕吐严重脱水,电解质紊乱,肾衰、死亡,致病性与免疫性,病后带菌一般不超过 2 周,个别可长达数年,病菌主要存在于胆囊中。 免疫力:同群免疫力较牢固,体液免疫为主。,微生物学检查,霍乱:烈性肠道传染病,为我国的甲类法定传染病(俗称2号病) 霍乱是烈性传染病,对首例病人的病原学诊断应快速、准确,并及时作出疫情报告,微生物学检查,标本:呕吐物、米泔水样粪便直接镜检 分离培养 PCR G-弧菌 碱性蛋白胨水 肠毒素运
7、动活泼 凝集反应,标本,病人粪便,肛拭 流行病学调查还包括水样 粪便标本:Cary-Blair保存液 肠道病原菌:甘油盐水缓冲保存液,直接镜检,革兰染色阴性 弧菌 悬滴法观察细菌呈“鱼群穿梭样”运动有助于诊断,分离培养,接种碱性蛋白胨水增菌 目前常用的选择培养基为TCBS(硫代硫酸钠柠檬酸胆盐蔗糖培养基 ),霍乱弧菌因分解蔗糖呈黄色菌落 挑选可疑菌落进行生化反应 血清学反应-玻片凝集反应,形成菌膜,在PH8.8-9.0碱性蛋白胨水中生长表面形成菌膜,霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上的菌落特征(18-24h),在选择培养基琼脂平板(TCBS)上生长,形成较大黄色菌落。,霍乱弧菌血清学反应 (凝集反应),防治原则,防:霍乱死菌苗:肌肉注射,保护率50%,3-6个月减毒重组活菌苗:口服,保护率82-100%菌苗加类毒素:B亚单位+灭活菌细胞,3年以上霍乱、伤寒杂交菌苗:基因工程菌苗,致病性与免疫性,治:隔离,及时补充液体,敏感抗菌素抗生素可选用四环素、强力霉素、氟哌酸等。,