《乙型肝炎病毒基因组变异研究几个热点问题课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《乙型肝炎病毒基因组变异研究几个热点问题课件（45页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、乙型肝炎病毒基因组变异研究几个热点问题,广州第一军医大学南方医院,侯金林 孙 剑 王战会 骆抗先,乙型肝炎病毒基因组变异,HBV变异,临床诊断,发病机制,抗病毒治疗,S 基因变异,HBV 基因型特点 前C/C基因变异,P基因变异与核苷类似物耐药,HBV基因组与干扰素应答,HBV变异,临床诊断,发病机制,抗病毒治疗,HBV 基因型特点,乙型肝炎病毒基因组变异,HBV基因异质性，8个基因型 （AH） HBV基因型的地域性分布特点,HBV基因型的地域性分布特点,B and C - 远东、亚洲A 北欧、美国D 地中海,HBV亚型和基因型的关系HBV基因型 HBV亚型A型 adw2和ayw1 B型 ad
2、w2和ayw1C型 adr、ayr和adw2D型 ayw2和ayw3E型 ayw4F型 adw4、ayw4和adw2G型 adw2,HBV前S基因PCR及酶切电泳图,A,B,C,D,Others,1 %,57 %,8 %,30 %,4 %,中国大陆地区HBV基因型分布,n = 694,中国大陆部分地区HBV基因型分布（n = 694）,AF121241,X80924,AB033558,AB033559,AB048701,AB048702,AB048703,X85254,X65257,J02203,AJ131956,U95551,X65258,X65259,X68292,AF043594,Z35
3、716,X72702,X97848,X80925,X97849,AF151735,X02496,Y07587,AF121239,AF121242,AF121240,M32138,X80926,AF280817,Phylogenetic tree of 30 strains of HBV genotype D (Neighbour Joining),IFN-a (total dose),Age (years),ALT (xULN),Responders (n),Non-responders (n),HBV基因型/变异与干扰素应答,148 例 HBeAg 阳性慢性乙型肝炎病人,Europe (n=
4、103) China (n=45),480 MU / 16 wks 960 MU/ 32 wks,36 14,3.9 3.1,42,61,468 MU / 26 wks,30 8,7.0 7.1,22,23,A,B,C,D,E F G,Total (n=148),欧洲和广东地区HBV基因型分布,Europe (n=103),6%,46%,35%,13%,3%,China (n=45),64%,36%,% of patients,Core Promoter T1762A1764,Precore Stop Codon A1896,C基因启动子、前C 终止变异与干扰素应答,Resp.,Non-Res
5、p.,p = 0.005,Resp.,Non-Resp.,HBV 基因型与C基因启动子和前C 终止变异,% of patients,Core Promoter T1762A1764,Precore Stop Codon A1896,after Rx,p = 0.001,A (n=42),B (n=17),C (n=40),D (n=33),不同HBV基因型核心基因的变异性,HBV Core amino acid position,B = 3.72.1 aa/patient (n=12),A = 1.71.9 aa/patient (n=24),C = 3.32.5 aa/patient (n=
6、27),% of patients with mutations,D = 4.02.3 aa/patient (n=24),HBV 核心基因变异与IFN-a 应答,Responders,Non-Responders,no aa changes,p = 0.0007,(n=36),(n=51),(n=28),(n=28),no of acquiredaa mutations,p = n.s,HBV主要基因型特点总结,Genotype BCP A1896 No. of Core Changes IFN responsiveness,A B C D,1.4,6.0,4.8,4.1,+,+?,+,+?
7、,结论,HBV基因型A对标准干扰素治疗应答率较其它基因型高，这可能与A基因型分子结构特点相关.干扰素治疗后的HBeAg血清转换不是因为获得A1896变异累积的结果. 干扰素治疗失败不是因为治疗过程中获得了HBV C基因变异株的结果.,HBV变异,临床诊断,发病机制,抗病毒治疗,P基因变异与核苷类似物耐药,乙型肝炎病毒基因组变异,乙型肝炎病毒核苷类似物耐药性,发生在什么部位？如何命名的？ 发生率多高？ 有何意义？（与肝炎活动、病毒反跳、HBeAg阴转、重型化） 病人发生YMDD突变后如何处理？,HBV多聚酶的突变,与拉米夫定反应降低相关的2个主要位点突变型: 代偿型 主要类型 密码子 # 528
8、 552 氨基酸 F L L A Q ./ Y M D DM VIM I很少检测到其他位点的变异. 关于其他位点变异株的意义还远未被阐明. 这些位点的突变包括: L428V/I, L430M, F514L, A529T,tp,spacer,rt,rt,rh,preS1,preS2,HBsAg,F,A,B,C,D,E,现行命名系统,A 385-395 423-439 511-L528M-537 545-M552-555 578-589 595-605B/C/F 383-393 421-439 509-L526M-535 546-M550-556 576-587 593-603D 372-382
9、410-426 498-L515M-524 535-M539-545 565-576 582-592E/G 382-392 420-436 508-L525M-534 545-M549-555 575-586 592-602,标准命名系统,A 到 G 37-47 75-91 163-L180M-189 200-M204-210 230-241 247-257,乙型肝炎病毒耐药命名,Stuyver et al. Hepatology 2001,乙型肝炎病毒核苷类似物耐药性,发生在什么部位？如何命名的？ 预测因素、发生率多高？ 有何意义？（与肝炎活动、病毒反跳、HBeAg阴转、重型化） 病人发生Y
10、MDD突变后如何处理？,预测因素,体重 基线ALT 基线HBV DNA HBV基因型？ 治疗中HBV DNA 下降水平103拷贝/毫升血清,YMDD 变异 发生率,在治疗的前36周内，PCR方法极少检测到 (检测敏感度 = 500 拷贝/mL)变异株 在经拉米夫定治疗后的HBeAg阳性患者中检出YMDD 变异HBV的概率为: 1 年 = 24% (Lai et al., 2001) 2 年 = 38% (Liaw et al., 2000) 3 年 = 49% (Leung et al., 1999) 4 年 = 66% (Chang et al., 2000) 出现YMDD 变异株并不等同于
11、临床耐药,乙型肝炎病毒核苷类似物耐药性,发生在什么部位？如何命名的？ 发生率多高？ 有何意义？（与肝炎活动、病毒反跳、HBeAg阴转、重型化） 病人发生YMDD突变后如何处理？,台湾地区拉米夫定治疗过程中YMDD突变,病例： 55 例慢性乙型肝炎 治疗方案：拉米夫定100毫克，104 周. 结果：55%（32/55）YMDD突变；有YMDD突变者90% ALT升高；45%出现YMDD 24周后急性发作；24% ALT大于10倍正常值以上。3例失代偿。 结论：YMDD突变后HBV DNA反跳引起肝炎活动，有YMDD突变病例仍可发生HBeAg转阴。,Liaw et al. 1999,广州南方医院检
12、测YMDD耐药策略,YMDD变异株,ALT flare,n=32,n=20,YMDD screen By RFLP at baseline and every 4 weeks Mutations outside YMDD in vitro study,n=198,表型耐药 Phenotypic 基因型耐药Genotypic,临床耐药 Clinical Resistance,HBV DNA level at the time of appearance of YMDD mutant VS baseline,Baseline,After emergence of YMDD mutant,101,H
13、BV DNA level (Copies/ml),P=0.279,102,103,104,105,106,107,108,Baseline ALT,ALT after emergence of YMDD mutant,50,100,150,200,250,HBeAg positve N=13,300,ALT level,350,HBeAg negative N=6,85.6,327.7,117.8,76.4,P=0.046,P=0.353,ALT level at the time of appearance of YMDD mutant VS baseline,0,200,400,600,800,1000,1200,1400,98.5.18,98.11.8,99.7.5,99.12.19,00.12.6,01.8.6,02.4.6,02.4.9,02.4.18,02.6.10,02.6.17,02.6.19,02.6.26,02.7.5,02.7.24,02.8.21,02.9.27,0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,HBeAg Positive,LAM,YMDD,YIDD,HBeAg Negative,Biopsy,Biopsy,出现 YMDD突变后肝功能失代偿（1）,
