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1、骨 髓 细 胞 学 检 查,晋中二院检验科 高蕊,主要内容血细胞的生成与发育正常血细胞形态常用血细胞化学染色骨髓细胞检查的临床意义常见血液病血细胞特征急性白血病的MICM分型,一、 概述,1、血液细胞发育过程 多能干细胞 定向祖细胞 原始细胞幼稚细胞 成熟细胞,2、骨髓检查适应症,对一些血液病进行确诊、观察疗效、 判断预后如白血病、再障、骨髓瘤等;,目的,协助诊断疾病如贫血、ITP、MDS等;,查找病原体如黑热病小体、疟原虫、狼疮细胞等。,适应症,不明原因肝脾、淋巴节肿大,不明原因的发热、骨痛、恶病质,血液细胞数异常、出现幼稚细胞,禁忌症血友病、严重凝血功能障碍等,二、骨髓检查步骤与正常骨髓象
2、,(一)、低倍镜检 判断骨髓增生程度;粗略估计巨核细胞情况;发现有无特殊细胞如转移癌、尼曼匹克细胞。,骨髓增生程度判断,根据有核 / 成熟红细胞比例分五级:,增生程度 有核 / 成熟红细胞 有核细胞数/HP 病因,极度活跃 1 :1 100 白血病,明显活跃 1 :10 50100 白血病、 增生性贫血,增生活跃 1 :20 2050 正常骨髓象,增生减低 1 :50 510 慢性再障,增生极度减低 1 :200 5 急性再障,(二)、油镜观察计数200500个有核细胞,根据各系形态特点进行分类 。,(三)、结果报告 骨髓报告单上有详细内容(包括骨髓象血象特征、组化染色),并提出诊断意见和建议
3、 。,(四)、正常骨髓象特征,1. 增 生 活 跃 2. 粒 红 比 正 常(24/1) 3. 粒 系(约4060)、红 系(约20):增 生 良 好、 各 阶 段 比 例 适 当细 胞 形 态 无 明 显 异 常 4. 巨 核 细 胞: 易见、产 板 巨 多 见 5. 淋 巴(约20)、单 核( 约4) 6.可 见 少 量 非 造 血 细 胞 7. 无 特 殊 细 胞 及 寄 生 虫,三、常用组化染色,过氧化物酶 ( POX) 2. 非特异性酯酶( NSE) 3 .特异性酯酶 (SE) 4. 糖原染色 (PAS) 5. 中性粒细胞碱性磷酶 (NAP) 6. 铁粒染色,四、常见血液病血象和骨髓
4、象,一、贫血 增生性贫血 包括缺铁贫、失血、溶贫 血象: HB、RBC、HCT均,网红,WBC正常 骨髓象:增生活跃或明显活跃红系增生显著,粒 / 红比值,巨核系正常,1、缺铁性贫血(IDA),增生明显活跃。 粒红比值减低。 红细胞系明显增生,幼稚红细胞百分比常30%,以中、晚幼红细胞为主。幼红细胞体积小,边缘不规整,胞核小而致密,胞浆量少,因血红蛋白合成不足而着色偏碱。成熟红细胞体积小,中心淡染区扩大,严重时可呈环状红细胞。易见嗜多色性红细胞。 粒细胞系相对减少,但各阶段比例及细胞形态大致正常。 巨核细胞系正常。 铁染色:细胞外铁阴性、铁粒幼红细胞百分比减低。,2、巨幼贫(MA),增生明显活
5、跃。粒红比值明显减低。 红系明显增生,幼红细胞百分比常40%,以早及中幼红细胞为主。出现各阶段巨幼红细胞,巨幼红细胞与相应阶段的正常红细胞相比,胞体及胞核均增大,核染色质纤细、疏松,着色浅淡。胞浆量丰富,呈核浆发育不平衡,细胞核的发育落后于胞浆。成熟红细胞明显大小不均,呈高色素性。易见巨红细胞、异形红细胞、Howell-Jolly小体及点彩红细胞等。 粒细胞系相对减少,可见各阶段巨粒细胞,以晚幼粒、杆状核细胞最多见,其特点是胞体增大,胞核肿胀,核染色质疏松。成熟粒细胞有核分叶过多现象。 巨核细胞数目大致正常,但亦可见巨型变,部分巨核细胞呈分叶状。,3、溶血性贫血(HA),增生明显活跃。 粒红比
6、值明显减低或倒置。 红细胞系显著增生,幼红细胞百分比常50%,以中幼红细胞为主,其他阶段的幼红细胞亦相应增多,易见核分裂象。成熟红细胞中易见大红细胞、嗜多色性红细胞及Howell-Jolly小体。 粒细胞系相对减少,各阶段比例及细胞形态大致正常。 巨核细胞系一般正常。 网织红细胞比例增高。,4、再 障 (AA),血象:HB、RBC、 WBC均 网红,骨髓象: 增生减低或极度减低 红粒巨三系均减少, 成熟淋巴相对增多, 非造血细胞增多,二、白血病,急性白血病较多于慢性白病,成人以急粒多见,儿童急淋多见,急性淋巴细胞白血病(ALL),有核细胞增生极度活跃或明显活跃。 以原始和幼稚淋巴细胞为主,30
7、%(NEC),可高达5090%,伴有形态异常。成熟淋巴细胞较少见。(NEC,non-erythroid count,即非红细胞计数,指除去幼红细胞、淋巴细胞、浆细胞、肥大细胞、巨噬细胞外的有核细胞百分比). 粒细胞系统增生受抑制,粒细胞减少,甚至少见。 红细胞系统增生也受抑制,幼红细胞少见或不见。 巨核细胞系多数显著减少或不见,血小板减少。 退化细胞明显增多,蓝细胞(涂抹细胞)多见,这是急淋的特征之一。,ALL(L1,L2,L3),ALL(L1,L2,L3),急性非淋巴细胞白血病 (ANLL),骨髓增生明显活跃或极度活跃。 可见某一系或多系原始和幼稚细胞增生。原始细胞30%(NEC)。 细胞成
8、熟障碍 :裂孔现象,大量原始细胞伴少量成熟细胞。 细胞形态畸形:细胞大小、外形和核浆 细胞分裂异常 骨髓中其他系细胞受抑制,急性原粒细胞白血病未分化型 ANLL-M1,骨髓增生极度活跃或明显活跃,少数病例增生活跃甚至减低。 原始细胞90%(NEC)。早幼粒细胞很少,中幼粒细胞及以下各阶段细胞罕见或不见。 在少数病例白血病细胞内可见Auer小体,核分裂细胞较多见。 多数病例幼红细胞及巨核细胞明显减少,淋巴细胞也减少。,急性原粒细胞白血病部分分化型 ANLL-M2a,骨髓增生极度活跃或明显活跃. 原始细胞占3089%(NEC),并可见到早幼粒细胞、中幼粒细胞和成熟粒细胞10%, 约50%病例白血病
9、细胞内可见Auer小体,核分裂细胞较多见。 幼红细胞及巨核细胞明显减少,淋巴细胞也减少。 特征:是形态变异及核质发育不平衡,表现为细胞大小异常,形态多变,胞体畸形有瘤状突起,核形畸变,如凹陷、折叠、扭曲、肾形、分叶等,也可表现为核发育迟缓,胞质出现少数嗜苯胺蓝颗粒。,ANLL-M2b,骨髓增生明显活跃或增生活跃。 红细胞系及巨核细胞系增生均减低。 粒细胞系增生明显活跃,原始粒细胞及早幼粒细胞明显增多,以异常中性中幼粒细胞为主,30%(NEC)。 异常中性中幼粒细胞:形态明显异常,核浆发育显著不平衡,核染色质细致、疏松,有12个大而清楚的核仁,与原粒细胞的核结构相似,但胞浆中已有较多细小而分布较
10、密集的特异性中性粒细胞,胞体较大,核可不规则,胞浆丰富,易见空泡。,急性颗粒增多的早幼粒细胞白血病 ANLL-M3,多数病例增生明显或极度活跃,个别病例增生低下。 分类以颗粒增多的异常早幼粒细胞为主,30,其胞核大小不一,胞浆中有大小不等的异常颗粒,部分病例早幼粒细胞胞浆中有Auer小体,有的病例一个细胞可有数至数十根,呈柴捆样排列,称为“柴捆细胞”。根据胞浆中颗粒的大小又将M3型分为两种亚型。 M3a(粗颗粒型):胞浆中嗜苯胺蓝颗粒颗粒粗大,密集或融合,染深紫红色,可掩盖核周围甚至整个细胞。 M3b(细颗粒型):胞浆中嗜苯胺蓝颗粒密集而细小,核扭曲、折叠或分叶,易与急单白血病混淆。,ANLL
11、-M3a/M3b,ANLL-M3,急性粒-单核细胞白血病 ANLL-M4,骨髓增生极度活跃或明显活跃。 粒、单核两系同时增生。 红系、巨核系受抑制。根据其粒系和单核细胞系形态不同,将其分为四个亚型。 M4a :原始和早幼粒细胞增生为主,原、幼单核细胞20(NEC)。 M4b:原、幼及单核细胞增生为主,原始和早幼粒细胞20(NEc)。 M 4c:原始细胞既具有粒细胞系,又具有单核细胞系形态特征,30(NEC)。 M4E0 :除上述特点外,异常嗜酸粒细胞大于5%(NEC),其嗜酸性颗粒粗大而圆,常伴粗大而多的嗜碱性颗粒。,ANLL-M4,急性单核细胞白血病 ANLL-M5,骨髓增生极度活跃或明显活跃。 原单加幼单细胞30%。 有两种亚型。 M5a(未分化型)以原单为主,80(NEC),幼单细胞较少。 M5b(部分分化型) 原单、幼单及单核细胞均可见到。骨髓中原始和幼稚单核细胞30%(NEC),原单核细胞30%,圆形,核偏位,染色质疏松或凝集成块,胞浆深蓝,有泡沫感,颗粒有或无,见双核、多核或火焰状瘤细胞。 成熟红细胞呈缗钱状分布。,