从自然界筛选及鉴定乳酸菌毕业论文

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1、哈尔滨商业大学毕业设计（论文）哈尔滨商业大学毕业设计（论文）从自然界筛选产乳酸微生物及菌 种初步鉴定学 生 姓 名 薛 潇 指 导 教 师 梁金钟 专 业 生物工程 学 院 食品工程学院 2013 年 06 月 06 日IGraduation Project (Thesis) Harbin University of CommerceLactic acid microorganisms filtration from nature and stain identification Student Xue Xiao Supervisor Liang Jinzhong Specialty Bioe

2、ngineering School Food Engingeering 2013-06- 06II毕毕业业设设计计（论论文文）任任务务书书姓名：薛潇学院：食品工程学院班级：1 班专业：生物工程毕业设计（论文）题目：从自然界筛选产乳酸微生物及菌种初步鉴定立题目的和意义：不同的自然界环境中生存的微生物优势菌种也不同。各种食品、农副产品等营养组成不同，从中可以分离出不同的微生物。对于样品中含量较低的菌处，要针对其生物学特点合理设计分离方法，如富集培养、选择培养、利用其特殊的生理反应产生特定的生长现象等，以便于从大量杂菌中选出目的菌种。乳酸菌的分离采用 BCP 琼脂平板分离法。本课题需要通过研究从自然

3、界筛选产乳酸微生物及菌种初步鉴定，讨论过程中多种因素对筛选和鉴定的影响。通过实验几种不同方面及形态学鉴定，生理生化鉴定的对未知乳酸微生物分析，确定这一菌种的形态及其生理生化属性。技术要求与工作计划：本实验经过对国内外大多数文献的参考查阅，了解乳酸菌的现状和研究方向以及采用合理的实验方法。本实验采用从泡菜汁中选育出来的乳酸菌，通过在 BCP 乳酸菌培养基中进行筛选得到乳酸菌，并对其进行乳酸菌产乳酸的性能测定，进行传代稳定性的测试，而后通过以上的依次筛选选出一株优质菌株，进行培养，对其进行形态学和生理生化特性的鉴定实验来确定所选育的乳酸菌的菌种类型。III时间安排：2012 年 11 月 01 日

4、-2012 年 11 月 10 日：查找实验相关资料及文献；2012 年 11 月 11 日-2012 年 11 月 12 日：撰写毕业设计任务书；2012 年 11 月 13 日-2012 年 11 月 15 日：撰写毕业设计开题报告；2012 年 11 月 16 日-2012 年 11 月 17 日：准备相关的实验仪器及试剂、菌种等；2012 年 11 月 18 日-2013 年 01 月 20 日：做实验并记录实验数据；2012 年 11 月-2013 年 01 月：边做实验边整理资料写论文2013 年 05 月 06 日：进行毕业论文中期检查及答辩20013 年 6 月：进行毕业论文答

5、辩。 指导教师要求：全面检索国内外文献资料，详细了解国内外研究概况和研究动态，力求有所创新。根据实验方案开展研究，做好实验原始记录，包括文字记录和图片记录，数据一定要真实可靠，不许进行篡改。对实验数据进行科学选用和处理，如引用他人的数据、观点和论述必须注明出处，决不允许发生抄袭现象。遇到问题和困难要学会利用所学的理论知识进行全面分析并加以解决。论文撰写要规范，符合学校的要求，按时完成研究任务。（签字） 年 月 日教研室主任意见：（签字） 年 月 日院长意见：（签字） 年 月 日IV毕毕业业设设计计（论论文文）审审阅阅评评语语V一、指导教师评语：指导教师签字：年 月 日 毕毕业业设设计计（论论文

6、文）审审阅阅评评语语VI二、评阅人评语：评阅人签字：年 月 日 毕毕业业设设计计（论论文文）答答辩辩评评语语VII3、答辩委员会评语：四、毕业设计（论文）成绩：专业答辩组负责人签字：年 月 日五、答辩委员会主任单位： （签章） 答辩委员会主任职称： 答辩委员会主任签字： 年 月 日哈尔滨商业大学毕业设计（论文）摘 要酸菜是东北地区的一种传统发酵食品，以自酿酸菜为采集菌种的来源。通过从酸菜汁中分离筛选得到未知乳酸菌菌株。采用 BCP 选择培养基的分离方法对菌种进行筛选分离，得到 50 株乳酸菌菌株。再通过复筛得到 4 株表现良好的菌株。通过层析和酸碱滴定对乳酸菌进行定性和定量试验。通过测定 OD

7、 值和 PH 值来绘制生长曲线。通过实验总结出乳酸菌的最佳 pH 值为 7.0 和最适盐浓度为 0%-2%以及最佳温度为 37，并对菌种进行生理生化鉴定。实验结果为 H2O2酶试验为阴性，硫化氢产生为阳性，柠檬酸盐为阳性，产酸不产气，明胶液化为阴性，石蕊牛奶为阳性，葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖的糖原实验为阳性。关键词关键词：酸菜；乳酸菌；鉴定哈尔滨商业大学毕业设计（论文）IAbstractPickle is a traditional fermented foods in the Northeast of China. This experiment used self-brewed Pickle

8、 juice as the sources of collecting and breeding bacteria. The unknown strains of lactic acid bacteria were isolated and screened from the Pickle juice. This experiment used BCP method to select medium for isolating and screening bacteria. The drawing of growth curves based on the OD values and the

9、PH values.The results showed that the the optimum conditions for lactic acid bacteria were pH7.0, 0%-2% of salt concentration and 37. And the physiological and biochemical characteristics of the unknown bacteria were identificated. The results showed that H2O2 enzyme test was negative; hydrogen sulf

10、ide was positive; citrate was positive; there was acid production but no gas production; gelatin liquefaction was negative; litmus milk was positive; glycogen tests of glucose, sucrose, fructose, lactose were positive.Key words: sauerkraut; lactic acid bacteria; identification哈尔滨商业大学毕业设计（论文）II目 录摘 要

11、.IAbstractII1 绪 论1 1.1 乳酸菌的概述.11.2 乳酸菌的基本属性.11.3 乳酸菌的发展时期及分类.2 1.3.1 乳酸菌的发展时期2 1.3.2 乳酸菌的分类2 1.4 乳酸菌的发酵特性.2 1.5 乳酸菌的应用.3 1.5.1 乳酸菌在食品领域的应用3 1.5.2 乳酸菌制剂4 1.6 乳酸菌的生理作用和作用机理.4 1.6.1 乳酸菌的生理作用4 1.6.2 乳酸菌的作用机理5 1.7 乳酸菌的国内外发展现状.6 1.7.1 乳酸菌的发展历史6 1.7.2 乳酸菌的发展现状7 1.8 乳酸的生产及应用.7 1.8.1 乳酸的概述7 1.8.2 L乳酸的生产8 1.8

12、.3 乳酸提取工艺10 1.9 本课题的目的及研究的意义.122 实验部分13 2.1 实验材料与仪器.13 2.1.1 实验材料13 2.1.2 实验仪器13 2.1.3 实验试剂14 2.1.4 实验培养基14 2.2 实验方法.15 2.2.1 从自制酸菜汁中分离提纯乳酸菌的思路和原理15 2.2.2 培养条件15 2.2.3 菌种储藏15 2.2.4 样品采集15 2.2.5 乳酸菌的分离和筛选16 2.2.6 乳酸菌的产酸定性定量试验16 2.2.7 乳酸菌的生理生化鉴定173 结果与讨论18 3.1 乳酸菌的形态学鉴定.18哈尔滨商业大学毕业设计（论文）III3.1.1 初步分离1

13、8 3.1.2 乳酸菌的复筛18 3.1.3 菌株形态19 3.2 乳酸菌的产酸定性定量试验.20 3.2.1 菌株产乳酸试验20 3.2.2 乳酸定量试验20 3.3 乳酸菌的生长过程鉴定.21 3.2.1 乳酸菌在 37恒温培养 pH 值变化21 3.2.2 菌株最适生长起始 pH 值的确定.21 3.2.3 乳酸菌株耐盐性的确定22 3.2.4 乳酸菌的不同温度生长鉴定23 3.3 乳酸菌的生理生化鉴定.25结 论28参考文献29致 谢31哈尔滨商业大学毕业设计（论文）01 绪 论1.1 乳酸菌的概述乳酸菌是对能利用可发酵碳水化合物产生出大量乳酸的革兰氏阳性细菌的通称。自然界中乳酸菌分布

14、十分广泛，可以存活在各种动物的消化道及其其他器官里。在乳制品、发酵植物食品、自然界的湖泊和泥土都有所发现。人们常常利用乳酸菌产酸等特性来处理和加工食品，延长食物的储存时间和提高食品的适口性。乳酸菌从发现、分离到分类体系的建立，经过了大约一个世纪。目前，在自然界中已发现的乳酸菌在细菌分类学上至少可划分成 23 个属，共有 200 多种。涉及到的有关属则更多，有的只是某些属中的少数成员。除极少数外，其中绝大部分都是人体内必不可少的且具有重要生理功能的菌群，其广泛存在于人体的肠道中。目前已被国内外生物学家所证实，肠内乳酸菌与健康长寿有着非常密切的直接关系。而人体肠道内乳酸菌拥有的数量，与人类年龄成倒

15、数增长曲线。在平时，健康人比病人多 50 倍，长寿老人比普通老人多 60 倍。当人到老年或生病时，乳酸菌数量可能下降 100 至 1000 倍，直到老年人临终完全消失。因此，人体内乳酸菌数量的实际状况，已经成为检验人们是否健康长寿的重要指标。现在，由于抗菌素的广泛应用，使人体肠道内以乳酸菌为主的益生菌遭受到严重破坏，抵抗力下降，健康受到极大的威胁。所以，增加人体肠道内乳酸菌的数量就是明智之举。人体肠道内以乳酸菌为代表的益生菌数量越多越好。也完全符合诺贝尔得奖者生物学家梅契尼柯夫“长寿学说”里所得出的结论：乳酸菌=益生菌=长寿菌。在面对抗生素的日渐无能为力的现状，不断寻求新的更加有效的生物抗菌产品是正确选择。瑞典科学家研究发布的结果：治疗胃和大肠炎症时直接喝乳酸菌比用抗生素更好，危险性基本没有。而在日本，乳酸菌制品占据日本乳制品市场的85%以上，二十