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1、,地西泮联合乙醇小鼠半数致死量的测定,韦乔龙 韦悦 黎晓夏 孔敏敏 黄仕忠 王倩 庾汇玥 周炟君,2011级预防医学11班,现在社会竞争日益激烈，从而使得很多人感到压力越来越大，失眠已成为现代社会中是一种较为常见的疾病，它严重地威胁着我们的健康和生活，使很多人处于亚健康状态。 地西泮具有很好的催眠作用而不良发应比较小，且单用地西泮作为催眠药即使是超过正常量数倍一般都不会导致使用者死亡，这也是作为受到睡眠困扰的人群首选药物的原因。但是地西泮与其它中枢抑制药如乙醇合用时，中枢抑制作用增强，加重嗜睡、昏睡、呼吸抑制、昏迷、严重者可致死。鉴于很多人都喝酒，而且在饮酒后有服用安眠药的需要，本实验就是通过
2、地西泮、乙醇联合给小鼠用药，观察记录30min内小鼠的死亡数量探讨地西泮和乙醇合用对小鼠的半数致死量（LD50）。,(1),1,CHAPTER,材料,方法,(2),(3),材料与方法,1.1,实验动物,小鼠 40只， 均健康、活动自如、营养状况良好，雌雄不限， 提前禁食（不禁水）12h。,材料与方法,1.2,试剂与仪器,地西泮注射液( 生产厂家:吉林济邦药业有限公司 商品规格: 2ml:10mg 批准文号:国药准字AH121101) 无水乙醇 (生产厂家:上海三鹰化学试剂有限公司) 小鼠笼、1ml注射器、灌胃器、电子称、苦味酸、5ml吸量管、 1ml吸量管、试管。,(4),通过以上步骤获取小白
3、鼠对地西泮联合乙醇致死率100%的乙醇浓度ED100和致死率为0%的乙醇浓度ED0 。然后在此剂量范围内，按等比数列分成4个剂量组，各组剂量的公比（）为 。求得r后，自第一剂量组（）开始乘以r，可得相邻的下一组的剂量。各组剂量分别为ED0 、ED0 、r2 ED0、r3 ED0。,材料与方法,1.3,方法,取4只小鼠，随机分成两组，先以0.2mg/10g地西泮注射液给小鼠腹腔注射，然后其中一组小鼠灌胃0.15ml/10g30%乙醇，另一组灌胃0.15ml/10g70%乙醇，在 30min内观察小鼠是否死亡（死亡指标：呼吸和心跳停止），再根据结果调整乙醇浓度进行实验。,(5),预实验,预实验结果
4、ED0=40%、ED100=70%，r=1.2 各剂量组为40%、48%、58%、70%。,材料与方法,1.3,方法,(6),正式实验,将32只小鼠随机分为4组进行试验，每组8只，先以0.2mg/10g地西泮注射液给小鼠腹腔注射，出现昏睡状态后各组按0.15ml/10g灌胃不同浓度(40%、48%、58%、70%)的酒精，观察记录30min内小鼠的死亡数量。,材料与方法,1.4,统计方法,(7),统计采用LD50 CALC 2.0软件 计算LD50。,2,CHAPTER,结果,(8),结果,2.1,小鼠观察结果,(9),各组小鼠在注射地西泮后均出现闭目、静卧、步态不稳 、行动迟缓等症状，在进行
5、乙醇灌胃后出现流涎、心率加快、呼吸幅度加深、呼吸频率加快，自主活动明显减少、个别小鼠出现抽搐、痉挛等症状，甚至短时间内死亡。最后各组小鼠死亡或者昏睡。,结果,2.2,LD50结果,(10),采用LD50 CALC 2.0软件计算LD50显示无结果。,表1 地西泮联合乙醇LD50计算用表,3,CHAPTER,讨论,(11),讨论,3.1,(12),在预试验中测得地西泮联合酒精对小鼠ED0、ED100的酒精浓度分别是40%、70%，正式实验时，最小给药剂量组的死亡率为 12.5，最大给药剂量的死亡率为50，出现很大的误差。其原因可能与实验的抽样误差有关，主要来源是个体的差异。同时由于实验条件和时间
6、的限制，不能进行进一步的实验探索，所以得到的实验数据误差太大，采用LD50 CALC 2.0软件计算LD50显示无结果。,讨论,3.2,(13),本实验注射的地西泮剂量是由人的常用量换算而来，在实验过程中发现，小鼠在注射地西泮昏睡后，再进行乙醇灌胃出现心率加快、呼吸加深加快，自主活动明显减少、个别小鼠还出现抽搐、痉挛症状，甚至短时间内死亡。由于实验条件和时间的限制，没有进行乙醇对照组，无法证明两者是否具有协同作用，但由现有文献查得饮酒后服用地西泮容易使大脑皮层细胞很快转入抑制状态，如果延髓被抑制，则可以引起死亡。 综上所述，在使用安定的同时，不要饮酒。,4,CHAPTER,参考文献,(14),
7、参考文献,(15),颜光美药理学 M北京 ：高等教育出版社，2004：105112,许典双美酒+西药=毒酒 EBOL(200673)2006111,祝国强，刘庆欧医药数理统计方法 M北京 ：高等教育出版社,张思敏 ，梁国彦 ，庄泽锴 等. 乙醇合用地西泮的量效关系.中山文学学报论丛，2007年第27卷第3期,王远征 ，董庆鹏 ，张月 ，张擎 ，武静茹. 烟雾环境对乙醇中毒小鼠死亡率的影响徐州医学院学报ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU 2009，29(5),5,CHAPTER,分工安排,(16),分工安排,(17),周炟君 实验提案 实验设计 论文写作 ppt制作,黎晓夏 黄仕忠 实验设计修改 称量小鼠,王 倩 现场指挥调控 论文答辩,韦乔龙 韦 悦 腹腔注射 小鼠灌胃,孔敏敏 庾汇玥 药品配置 记录数据 分析数据,指导老师 陈光霓,谢谢欣赏,
