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1、布氏杆菌病的检疫及处理,能力目标,知识目标,能通过临诊检疫法诊断布氏杆菌病,能够通过凝集反应法检疫布病,布病的临诊检疫要点,能够进行布病的检疫后处理,凝集反应检测技术,布病检疫后处理,主要内容,主要目的,布病的临诊检疫 布病的实验室检疫 布病检疫后的处理,掌握布病的检疫方法 （凝集反应）,引入,引起牛、羊流产的，对人类危害较严重， 每年必须检疫的人畜共患病有哪些？,操练,观看幻灯片，请同学们判断是什么病？ 主要临诊症状与病变？,幻灯片,母牛流产，产出发育比较完全的死胎,母牛流产，产出发育比较完全的死胎，全身肿胀，有出血斑,流产的母牛从阴道排出污灰白色或棕红色有恶臭的分泌液,胎衣水肿增厚，呈胶样
2、浸润，子叶上出血,胎儿脾脏有不同程度肿胀,发生木乃伊的四月龄胎儿，至8个月尚未产出，体表已呈黑色，眼下陷,阴囊肿胀拖地，病羊行走困难,流产胎盘水肿，子叶出血，坏死，故呈棕黑色，其表面附有坏死物,离体的精索和睾丸，精索呈结节或串珠状,深化,通过上述观看与讨论，请同学们说出布病 的临诊检疫要点。,知识点,布病的临诊检疫要点,布病检疫后的处理,布病的临诊检疫要点,1、母牛多见于妊娠78个月时，发生流产、胎衣滞留和胎儿死亡。公牛常见睾丸炎、附睾炎，睾丸肿痛可伴有中度发热，精液中常含有大量的布鲁氏菌。 2、母猪多在妊娠的3个月流产，表现精神沉郁、食欲不振，乳房、阴唇肿胀，常排出黏性脓性分泌物；流产胎儿的
3、状态各不相同，即有的已干尸化，有的刚死不久，有的是弱仔猪，可能还有正常仔猪等。公猪出现一侧或两侧睾丸炎、附睾萎缩，性欲减退甚至消失，失去配种能力。有些病例还有关节炎，常侵害膝关节和腕关节，表现关节肿大，疼痛、跛行。,布病检疫后的处理,1、从非疫区引种，引进的动物应隔离检疫45天以上，经二次血清学检查为阴性者方可混群。奶牛场每年进行2次定期检疫，发现可疑者，1个月内应重复检查，检出阳性牛扑杀销毁。 2、宰后检出的布病病畜及其胴体、内脏和副产品，一律作销毁处理。 3、做好流产胎儿、污染物、粪便及环境消毒，做好免疫接种工作。,引入,动检站春防时，如何进行布氏杆菌病的检疫？,凝集反应,操练,布氏杆菌的
4、凝集反应 学生分组操作,知识点,平板凝集法,试管凝集法,采血,被检动物局部剪毛消毒后，牛、马、羊颈静脉采血，猪耳静脉采血，无菌采血710ml于灭菌试管内，摆成斜面让备血液自然凝固，经10 12小时，待血清析出后，分离血清装入灭菌小瓶内。有时血清析出量少，或血清蓄积于血凝块之下，可用灭菌细铁丝或接种环沿着试管壁穿刺，使血凝块脱落管壁，然后放于冷暗处，使血清充分析出。,平板凝集法,操作方法：取清洁玻板划分4cm 4cm方格若干，用0.2ml吸管吸取血清按0.08ml、0.04ml、0.02ml及0.01ml的剂量，分别加于一排4个方格内，吸管须稍斜并接触玻板，然后每格血清上垂直滴加平板凝集抗原0.
5、03ml，以牙签或火柴棒将血清与抗原混合均匀，使其形成直径约为2cm的圆形涂层，一根牙签或火柴棒只用于一份血清，稀释混合的顺序由后依次向前进行，拿起玻板轻摇，使充分混合，防止水分蒸发，58min后观察记录结果。,布氏杆菌平板凝集试验加样表,平板凝集法,记录反应： 若100%抗原被凝集，出现大凝集片和小的粒状物，液体完全透明，记为+； 若75%抗原被凝集，有明显凝集片和颗粒，液体几乎完全透明，记为+； 若50%抗原被凝集，有可见凝集块和颗粒，液体不甚透明，记为+； 若25%抗原被凝集，仅可见颗粒，液体浑浊，记为+； 若无凝集现象，记为“”,判定标准：发生+凝集的最高血清稀释倍数为该血清的凝集价。
6、羊、猪和犬血清凝集价1：50以上阳性，1：25为可疑；大家畜和人1：100以上为阳性，1：50为可疑。,试管凝集法,操作方法：取康氏试管8支，立于试管架上，用玻璃笔在每支试管上标明血清号和试管号，按下表加样，置37410小时，再置室温18 24小时，观察记录结果。与此同时，每次凝集试验应用阳性血清（1：800)、阴性血清（1：25）对照和抗原对照，标准阳性、阴性血清经1：25稀释后分别取0.5ml与等量的抗原混合，抗原对照是抗原0.5ml加盐水0.5ml混合。,布氏杆菌试管凝集试验加样表,试管凝集法,记录反应结果： 试管底部有明显伞状凝集物，液体完全透明，抗原全部凝集，以+表示； 试管底部有明
7、显伞状凝集物，75%抗原被凝集，以+表示； 试管底部有倒伞状凝集物，液体中度浑浊，50%抗原被 凝集，以+表示； 25%菌体凝集，则试管底部无伞状沉淀，液体透明不明显，浑浊，以+表示； 若抗原完全不凝集，试管底部无伞状凝集物，只有圆点状沉淀物，液体完全混浊是，以“”表示,判定标准：发生+凝集的最高血清稀释倍数为该血清的凝集价。羊、猪和犬血清凝集价1：50以上阳性，1：25为可疑；大家畜和人1：100以上为阳性，1：50为可疑。,深化,病原检查法检疫布氏杆菌病,病原检查法诊断布病,1、细菌培养：取流产胎儿或其胃内容物、羊水、胎盘的病变部位，无菌操作，用接种棒蘸取病料，在血清肝汤琼脂培养基上划线，37温箱内培养23d，取出观察结果，如平板上有湿润、闪光、无色、圆形、隆起、边缘整齐的小菌落，则为布氏杆菌的可疑菌落。 2、镜检：取培养基的典型菌落涂片，用革兰氏法染色后镜检。布氏菌呈单个散在，少数呈短链，无芽孢、无荚膜的短小杆菌，革兰氏阴性,布氏杆菌,布氏杆菌,归纳总结,能力,知识,能够通过临诊检疫法对布氏杆菌病进行初步检疫 能够通过凝集反应对布病进行检疫 能够进行布病的检疫后处理,布氏杆菌病的临诊检疫要点 凝集反应检测技术 布病检疫后处理,作业,1布氏杆菌病临诊检疫要点2布氏杆病检疫及处理报告,
