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1、关于胆红素的若干问题,宋克征（总工程师） 宁波美康生物科技有限公司,学术讲座,2,一、来源 单核-巨噬细胞系统（网状内皮系统）,（一）胆红素的代谢,3,胆红素线状结构,胆红素的X线衍射结构,二、结构与性能,4,三、胆红素在血液中的运转,白蛋白与胆红素结合的意义 （1）可以进入血液循环。 （2）可以阻止胆红素透过细胞膜，进入血脑屏障。,5,四、与胆红素竞争白蛋白的因素,pH环境和钙离子 某些阴离子药物： 磺胺类抗菌素、巴比妥和水杨酸盐 游离脂肪酸等 白蛋白的分子浓度,6,五、胆红素在肝细胞内的代谢,7,双葡萄糖醛酸酯占85-90 单葡萄糖醛酸酯占10-15,六、结合胆红素的结构,8,七、胆红素在
2、肠道的运转,进入新一轮的胆红素代谢,9,（二）黄疸,黄疸的分类 （1） 溶血性黄疸，肝前性黄疸 （2） 肝细胞黄疸，肝性黄疸 （3） 阻塞性黄疸，肝后性黄疸 （4）体质性黄疸，慢性先天性黄疸,10,（三）胆红素,一、胆红素的结构和性能 二、胆红素存在的意义,11,一、胆红素的结构和性能,胆红素的半衰期为17-23天 胆红素不被肝细胞摄取，不能通过肾小球 85%胆红素与重氮试剂呈直接反应 胆红素具有良好的稳定性 胆红素有一个新名称胆蛋白,非酯型,酯型,12,二、胆红素存在的意义,胆红素多了一个成分。 TBIL=BumBc+dBcB 胆红素的发现让人们认识到临床好转但黄疸不退的真实原因。 胆红素的
3、出现让人们懂得了用测Bc代替直接胆红素的测定，这样可以更加直接地了解真实病情。 计算B/TBIL有助于判断恢复期肝病的预后。 胆红素在正常人以及高Bu病人（新生儿黄疸）中缺乏。 胆红素仅在那些脂型高胆红素血症的病人血清中被检测到。,13,（四）新生儿胆红素,一、新生儿的生理性黄疸 50-60%足月产的婴儿和大于80%的早产儿于出生后2-3天出现黄疸，4-5天出现高峰。一般足月儿两周内消退，早产儿3-4周消退。 生理性黄疸的上限：足月儿205-265mol/L 3.持续时间长 4.可以退而再现,14,三、核黄疸的风险,下面列出的数据供我们检验新生儿胆红素的时候作为警戒性的参考 足月新生儿 胆红素
4、308-362 mol/L 早产病弱儿 胆红素137-205 mol/L 有可能出现新生儿的核黄疸。 提示尽快进入蓝光治疗。光疗十分有效，胆红素会迅速下降。用420-470nm波长，每日可下降51.3-85.5 mol/L。 光疗的机理 在蓝光照射下，体内的胆红素很快会从ZZ构型转化为EE构型，使胆红素的极性增加，能溶于水，从而有害的毒性胆红素（Bu）会大量从尿和胆汁中排出体外。,15,（五）胆红素的检测,一、SFDA对胆红素测定的新要求 标准化：企业标准、行业标准、国家标准，逐级升高。 量值溯源：通过一条比较链，使检测的结果或标准值与国家标准联系起来。 检测系统：完成一个项目所涉及的仪器、试
5、剂、校准品、质控品、操作程序等的组合，量值溯源要求采用整个检测系统。 基体效应,16,基体效应,分析样品中，除分析物以外的所有其他物质和组分，称为该分析物的基体，亦称“介质”或“基质”。 检测系统检测样品中的分析物时，处于分析物周围的所有非分析物对分析物参与反应的影响，称基体效应。对定标和质控的基体效应应予以特别关注。 对基体效应大小的估计强调采用回收实验。,17,二、测准胆红素的基本方法,方法不复杂，测准很困难！ 胆红素的特性不稳定 存在三怕：怕热、怕光、怕氧化 罗氏公司对胆红素不稳定的估计 cfas校正液使用说明书对胆红素可用的稳定时间的规定,18,正常值质控 异常值质控,19,3.基本方
6、法的设计,必须充分考虑、周到地照顾到以上关于稳定时限的规定。 安排好定标和质控的两个环节，是能否测准的根本关键。 在实际的操作中，思想上要有“动”的观念，去观察分析结果而作相应的修正，如果观察不仔细，很容易脱靶，使结果超出允许范围。,20,三、化学氧化法测胆红素的实践,按检测系统规定做好准备，实施举例如下： 仪器：Hitachi7060 试剂：美康化学氧化法测总直胆红素双试剂 校准品：以罗氏cfas为模板，美康公司自产T/D两项混合校正液（冻干品） 质控品：以罗氏高低二水平质控为模板，美康公司自产T/D两项混合质控液（冻干品） 操作参数,21,5.操作参数,方法：两点终点法；反应总时间，10分
7、钟；光径，1.0cm；波长，546nm/450nm（主）；样品:R1:R2为8:240:60(L) 步骤：样品R1孵育5分钟，测空白吸光度A1， 加入R2反应5分钟，测最后吸光度A2。 计算：,22,6.注意,贯彻“动”的观念，具体操作严格做到定标与质控使用中严格遵守规定的时限要求，还要做到同步操作。 以上规定，可随不同牌号的仪器，做适当的修改，但不能改动比例。 结果评判：试剂空白吸光度684 mol/L DBIL342 mol/L r2 0.995 几点体会,23,d.几点体会,对临床的肝细胞黄疸、阻塞型黄疸样品直胆/总胆50% 有时DBIL结果出现零值。这是正常现象，答案应在胆红素代谢中去找。 权威杂志上刊登的一篇论文说：健康人几乎不存在Bc，检验部门应确保正常人直接胆红素1.7 mol/L。 极偶然、极个别时候DBIL出现负值。只要质控、定标正常，允许个别现象的发生。 如有批量结果发生偏高或偏低的时候，请及时反映给公司售后服务部。,24,讲座到此结束。 谢谢！,
