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1、ABO新生儿溶血病筛查,韩丽娟,新生儿溶血病 （hemolytic disease of the newborn,HDN）,是指母胎血型不合所致的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病。胎儿从父方遗传所获ABO血型抗原为母方所缺乏，分娩过程中该胎儿血型抗原进入母体，使母体产生抗该血型抗原的抗体（IgG类）。当母体再次妊娠时，抗该血型抗原的抗体（IgG类）可通过胎盘进入胎儿血液循环，使胎儿在宫内或出生后发生大量红细胞破坏，出现一系列溶血性征象的疾病。在我国以ABO血型不合最常见，约占85.3%，但预后良好。RhD血型不合在我国发病率较低，约占14.6%，但往往出现中等程度或重度HDN。其它如MN、Kell
2、血型系统等极少见，约占0.1%。,新生儿溶血病筛查目的,ABO新生儿溶血病筛查的目的是确定新生儿血型是否与母亲相合，证实患儿血清中是否有来自母体的抗体，以及患儿红细胞是否被来自母亲的免疫性抗体致敏。,检测方法,微柱凝胶法（抗人球蛋白试验）,检测原理,抗球蛋白试验主要用于检测血清中的不完全抗体和（或）补体。大部分IgG抗体与具有相应抗原的红细胞在盐水介质中能够特异性结合，但不发生肉眼可见的凝集反应，该类性质抗体为不完全抗体。不完全抗体主要是IgG类，IgG免疫球蛋白为7s的单体结构，分子量小。由于不完全抗体只能与一方红细胞抗原决定簇结合，不能同时与双方红细胞抗原决定簇结合。所以在盐水介质中，不完
3、全抗体只能致敏红细胞而不能使红细胞出现可见的凝集反应。加入抗球蛋白试剂后，抗球蛋白分子的Fab片段与包被在红细胞上的球蛋白分子的Fc片段结合，从而通过抗球蛋白分子的搭桥作用而产生红细胞凝集，未被抗体致敏的红细胞不会发生凝集，因此采用此方法能够检测出血清中是否存在不完全抗体。,诊断标准,直抗、游离、释放试验确定ABO新生儿溶血病 （不包括O细胞阳性结果）见下表：,组合介绍,新生儿溶血病筛查 新生儿ABO+RhD血型鉴定 直接抗人球蛋白试验 游离抗体检测 抗体放散试验,结果解释,直抗实验：是用于直接抗球蛋白试验的方法，检验新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。一旦发现新生儿红细胞直抗阳性，既成为诊断新生
4、儿溶血病的有利证据。ABO新生儿溶血病的直抗实验必须仔细操作才能得到明确结果。严重的也只能呈现弱阳性反应。游离实验：是检测新生儿血清中的血型抗体，如果检出抗体并能够和新生儿红细胞反应，游离实验则为阳性。,结果解释,在三项实验中，直抗实验和释放实验都是检测红细胞上致敏的血型抗体，看似重复，其实这两个实验各有特点。通过直抗实验，我们可以区分ABO新生儿溶血病和其它血型系统引起的新生儿溶血病。ABO新生儿溶血病的直抗都很弱，一般不会超过“1+”。而其它血型系统引起的溶血病，特别是Rh新生儿溶血病，其直抗强度通常都超过“1+”，因此，我们可以通过直抗实验的强度预判新生儿溶血病的类型。,结果解释,另外，
5、直抗阳性越强，通常意味着新生儿溶血病的病情越重，这一特点也是释放实验所不具备的。释放实验的特点是敏感度高，由于释放实验所使用的红细胞比直抗实验多几百倍，因此有可能达到较高的敏感度。释放实验是“三项实验”中敏感度最高的一项实验，也是判定新生儿溶血病最有利的证据。,影响因素,患儿血样采集时间：对于ABO HDN，血清学检测血样应该在出生后3-7天采集并完成实验，对于Rh HDN，血清学检测血样应该在出生24小时内采集并完成实验，如果超过规定时间采集的血样，由于被致敏的红细胞大部分遭到破坏，三项试验可能出现阴性结果，又会使真正的新生儿溶血病漏检。,影响因素,放散试验的时间和温度：温度过高或时间过长，抗体可能变性；温度过低或时间缩短，抗体从红细胞上解离不完全。 被检标本：用EDTA抗凝血，避免出现假阳性；红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应；标本不宜久置，防止红细胞上已致敏的抗体游离到血浆中，造成假阴性或阳性程度降低，尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。,适宜人群,临床怀疑由于母婴血型不合产生的血型免疫抗体导致新生儿出生后早期出现进行性黄疸加深均可进行检测。,注意事项,开单组别：临检组 标本类型：EDTA抗凝血 标本采集：真空采血管（紫色）采集静脉血2毫升 检测时间：每天检测,谢谢大家,
