1、动物实验方法绪论幻灯片

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1、医学实验动物学,第一章 绪 论实验动物是生命科学的基础和重要的支撑条件之一,它几乎涉及到生命科学有关的各个领域。实验动物的标准化程度直接影响生命科学领域中研究成果的确立、研究水平的高低和研究产品的质量,已发展成为现代科学技术领域不可分割的一个组成部分。实验动物学已发展一门独立的综合性的基础学科,它的发展水平已成为衡量一个国家生命科学发展水平的重要标志。,实验动物学是一门新兴学科 实验动物学是伴随着生物医学的动物实验而发展起来的。虽然从公元前4-3世纪亚里斯多德解剖动物可以认为是动物实验的开始,但从其他学科分化出来作为独立学科的实验动物学的历史较短,以正式定名为准,它的存在大约半个世纪。,实验动

2、物学是一门综合性学科 实验动物学研究的范围广泛,需要引入或借鉴其他学科的研究成果及研究方法,涉及生物学、动物学、畜牧学、兽医学、遗传学、微生物学、营养学、免疫学、胚胎工程、细胞工程、基因工程、环境工程等多门学科。实验动物学有别于动物学、畜牧学、兽医学,也有别于实验医学或比较医学。虽然相互关联,但研究的对象与目的不同,研究方法也不尽相同。实验动物学是一门应用性学科 实验动物学研究实验动物和动物实验方法的学科,实验动物在生物医学研究中,没有任何其他技术和方法完全可以替代,同样动物实验是生命科学及其他一些自然科学研究的重要手段,已经建立了科学的标准化的动物实验方法。,第一节 实验动物学的基本概念及基

3、本内容,一、实验动物(Laboratory Animal,LA)的概念 1988年国家科委颁布的实验动物管理条例中指出:实验动物是指人工饲养,对其携带的微生物实行控制,遗传背景明确或来源清楚的,用于科学研究、教学、生产、检定及其他科学实验的动物。 国家科学技术部于2000年组织专家,对实验动物管理条例修订补充,其中将实验动物定义为:经人工培育、遗传背景清楚、对其质量实行控制、用于科学试验及产品生产的动物。,实验动物的特点 1. 从遗传角度,必须经人工培育,在特定的环境条件下,人工培育而成的动物 2.遗传背景明确、来源清楚。实验动物科学的涵义应是遗传限定的动物。 3.健康状态实施监控:对其携带的

4、微生物、寄生虫实行控制。 4.应用范围明确,实验动物主要是应用于科学实验。有学者称之为“活的分析天平”,如同理化实验,需要精密仪器和高纯度试剂一样。生命科学研究及其相关的试验,要求实验动物对试验因素敏感性强,反应高度一致,使试验研究结果具有可靠性、精确性、可比性、可重复性和科学性。,二、实验用动物的概念 凡是以研究、实验、教育、药品生产、检定等为目的而使用的各种动物统称为实验用动物,包括:实验动物经济动物(家畜、家禽)满足人类社会生活需要而生产的动物野生动物:主要从野外捕获的动物观赏动物:宠物实验动物是一个特定的概念,仅仅是实验用动物中的一个特殊群体。,实验动物与实验用动物的区别,动物实验的概

5、念以实验动物为实验对象的科学实验,包括以实验动物整体水平的综合性反应为评价指标的实验,以实验动物为对象的观测,以实验动物为材料来源的局部器官及系统的实验,以及以实验动物的各种表现参数为权衡尺度的实验室工作。,三、实验动物学(Laboratory animal science,LAS)的基本内容以实验动物为主要研究对象,并将培育的实验动物应用于生命科学等研究的一门综合性学科。包含了一方面对实验动物本身进行生物学特性的系统研究,实施遗传育种、保种以维持其遗传学和生物学特征,培育新品系,并生产繁育出标准化的实验动物;另一方面是用标准化实验动物进行科学实验,研究生命的生理、生化过程,组织形态、机能反应

6、等,并在动物自然发生的疾病及人为制作的病理模型中,观察疾病发生、发展规律,研究药物等各种因素的作用。因而实验动物学支撑了生物与医药学,以及环保、商检、质检和军事科学等广阔的领域。,实验动物学的研究内容实验动物学的任务是研究怎样以优质的实验动物和精确的实验方法,使动物经实验处理后,能获得良好的反应重复性。,实验动物学的基本内容1、实验动物遗传育种学利用遗传调控原理,控制动物的遗传特性,培育新的实验动物品种品系和动物模型,以达到实验动物化的目的。例如怎样保持近交系动物的基因纯合一致,封闭群动物的多基因性,野生动物的驯化研究等。2、实验动物的微生物与寄生虫学研究实验动物的微生物、寄生虫分类及其与人类

7、的相互关系,探讨与实验动物疾病作斗争的措施,实行对实验动物微生物和寄生虫的质量监控。,3、实验动物环境生态学(laboratory animal environmental ecology) 研究影响实验动物生存的环境和条件。如:饲养动物的房舍、温度、湿度、气流、光照、噪音、风速、风压、笼具、饲料、饮水、垫料等。4、实验动物营养学:(labortory animal nutriology) 研究实验动物的营养需要及其对动物生长、发育、繁殖、抗病力及实验结果的影响。,5、实验动物医学(labortory animal medicine) 研究实验动物疾病的诊断、治疗、预防,以控制和消灭实验动物的

8、各种疾病。6、比较医学(comparative medicine) 比较研究所有动物(包括人类)的基本生命现象和异同,并可采用动物与人类疾病不同点的研究,通过建立实验动物疾病模型来研究人类的相应疾病。,实验动物学的基本框架包括实验动物的标准化和动物实验的标准化,实验动物的标准化即标准化实验动物的培育和饲养,动物实验的标准化即怎样在各科医学、生物学研究中准确地选择、正确地使用标准化的实验动物。,实验动物标准化的研究内容按工作程序及阶段划分,实验动物的标准化有三部分组成:实验动物生产条件的标准化:环境、营养控制动物质量的标准化:遗传学、微生物学控制动物实验(应用)条件的标准化,第二节 实验动物学在

9、医学生物学中的地位和作用,一、实验动物在医学生物学发展史中发挥了重要作用 1628年英国人哈维发现血液循环; 1878年德国人科赫发现了结核杆菌; 1885年法国人巴斯勒研制出狂犬病弱毒疫苗; 19世纪德国医生冯.梅林和俄国医生闵可夫斯基实验切除犬的胰腺发现糖尿病的本质; 俄国生理学家巴甫洛夫用犬研究消化生理和高级神经活动研究,提出了条件反射的概念; 1914年日本人山极和石川用沥青诱发皮肤癌成功; 1975年,英国剑桥大学G.Kohler和C.Milstein成功创造了用杂交瘤研制单克隆抗体的技术,是近代生物医学研究中的重大突破,其研究最重要的材料就是BALB/c小鼠; 1997年,“多莉羊

10、”的诞生标志着体细胞克隆技术在器官移植等方面取得了突破性进展。,二、实验动物是现代医学生物学研究的重要条件在医学生物学领域,进行实验研究的条件可概括为AEIR四个基本条件: AAnimalEEquipmentIInformationRReagent,三、实验动物在医学、生物学、工农业等各领域广泛应用 1. 在医学生物学方面 1.1 实验动物是人类的替身 1.2 不能用于人类的某些途径或临床上不易遇到的疾病,如烈性传染病的人工感染,放射病及毒气中毒试验。 1.3 可以根据实验目的随意安排采取样本的时间、方式 1.4 应用于各种教学研究 2. 制药和化学工业方面 3. 生物制品方面 4. 轻工业及

11、食品方面 5. 农业方面 6. 国防和军事科学方面 7. 重工业和环境保护方面,第三节 实验动物学的发展概况,一、发展史的回顾实验动物学发展史(生物医学史)明代李时珍“本草纲目”神农尝百草“,“灵丹妙药”先灌白兔 第一个时期 B.C4.-A.D.3 大体解剖活体解剖是这一时期的主要特征 B.C.4-B.C.3 Aristotle (亚里斯多德)动物、人尸体 B.C.3-B.C.2 Erasistratus 活体动物实验创始人,猪气管,肺呼吸空气的器官 A.D.1- A.D.2 Galen(盖伦)猪,猴等其它动物解剖 第二个时期 A.D.3-16 stopped 基督教,第三时期 16 19世纪

12、 辉煌时期 Vesalius (韦萨留斯1514-1556)现代解剖学奠基人,公开 dog,pig 解剖示教 1628 年 William Harvey(英国) ,蛙、犬、蛇、蟹发现了血液循环是一个闭锁的,人与血的运动闭锁系统 18世纪 Hales(黑尔斯)报道了动物血压的研究结果 1665年 Wren用羽管对犬旅行静脉注射,同年Lower用犬给犬输血 1813年 Bernard用动物研究疾病,创立了“实验医学”一词 1846年 玛登利用鸟类作实验,发现了醚麻醉术 1859 年物种起源,1867年 Joseph Lister 用饱和石炭酸处理伤口,开创了抗菌术 1792年 Jenner 研究牛

13、、马、猪的豆疹,比较人类的天花,第一次科学地认证了疫苗的效能,这是比较医学的典范 1878年 Koch(科赫,德国)研究牛、羊疾病,发现了结核杆菌,证实细菌与疾病的关系 1880年,1885年 Louis Pasteur(巴斯德,法国)禽霍乱疫苗,狂犬病疫苗, 破伤风抗毒素, 1891 年白喉抗毒素 1889年 Baron Joseph Von Mering(德国)和 Oscar MinKowsk(俄国) - insulin 防止虐待动物协会 Society for prevention of cruelty to animals, SPCA - 英格兰 19世纪末,20世纪初,巴甫洛夫消化生

14、理与高级神经活动,第四时期 20世纪初至今 1870年 孟德尔遗传定律, 1909年 丹麦植物学家和遗传学家约翰逊首次提出“基因” 这一名词,用以表达孟德尔的遗传因子概念 1907 年第一株近交系动物 DBA mouse 1910年 洛斯用鸡实验,发现肿瘤病毒病原 1912年 卡雷耳(Carrel)通过动物实验,开创了血管与器官移植实验研究 1914年 山极和市川,用沥青长期涂抹家兔,诱发皮肤癌3,4苯比芘 1921年 Otto Loewi(洛尹)用简单的离体蛙心实验,发现了ACh 1921年 Banting Frederick Grant 发现 insulin,1928 年 金属隔离器无菌技

15、术 1927年 博莱罗克用犬实验,发现休克治疗方法 1936年 Selye通过动物实验创立了“应激学说” 1946年 美国Reyniers等育成无菌大鼠 1953年 葛明用猫作实验,发明心肺旁道器 1959 年 不同微生物等级的实验动物(无菌动物,悉生动物,无特定病原体动物,普通动物) 1965年 格但斯克用猩猩做实验,发现变性脑病的病毒病原 1980 年 Gordon 培育成功transgenic mouse,组织相容性基因的发现(MHC) 1984 年 单克隆抗体 1996年 T淋巴细胞识别 1997 年 英国Wilmut “多利”,二、实验动物科学的进展 1.近交系动物的培育近交:遗传上

16、血缘关系较近的雌雄个体之间的近亲交配。近交类型: 纯交:相同基因型个体之间的交配,AAAA 回交:纯合子与杂合子之间的交配,AaAA 互交:相同杂合子之间的交配,AaAa 2.无菌动物的培育无菌动物是指用现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫动物。,3.突变系动物和转基因动物的培育基因突变动物是指遗传基因发生突变而具有某种特殊性状表型的动物,又称突变系动物。转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。4.免疫缺陷动物的培育免疫缺陷动物是指由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或者多种免疫系统组成成分缺陷的动物。,三、国外实验动物学的发展概况 20世纪50年代后,伴随着生命科学技术的进步,特别是实验科学的兴起,极大地促进了实验动物科学的发展。 1956年联合国教科文组织与医疗科学国际组织和国际生命科学会联合成立了国际实验动物委员会(International Council on Laboratory Animal Science,ICLAS),

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