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1、-氨基酸含量的测定,（非水滴定法）064 黄磊,-氨基酸的位碳原子上连有氨基和羧基，为两性物质，在水溶液中的Ka和Kb很小，溶液的酸碱性均不明显（羧基Ka2.51010，氨基Kb2.21012），而且会互相干扰，在水溶液中无法被准确滴定，设计一个滴定-氨基酸含量的方法。-氨基酸在水中的形式为：,方法一：在无水冰醋酸中用HClO4滴定-氨基酸中的氨基:冰醋酸酸性比水和氨基酸上的羧基都强，给出质子的能力强，相当于-氨基酸中的氨基碱性增强：,在水中：在HAc中：醋酸的酸性比水强，易给出质子使弱碱质子化，滴定终点突跃较大。,测定过程： （1）HClO4HAc滴定剂的配制：冷至25C的冰醋酸中缓慢加入7
2、2的HClO4溶液，摇匀，再滴加一定量的醋酸酐，摇匀，冷至室温，可用冰醋酸稀释。 （2） HClO4HAc滴定剂的标定：准确称取定量的基准物KHC8H4O4，溶于冰醋酸中，以0.2%结晶紫的冰醋酸溶液为指示剂，从紫色滴定至蓝色。取同样量的同一溶剂作空白滴定。 （3）-氨基酸的滴定：将试样溶于冰醋酸、醋酸酐中，以结晶紫为指示剂，用上述标定好的滴定剂滴定至出现稳定的蓝色。取同样量的同一溶剂作空白滴定。,氨基酸的含量方法二：在苯甲醇混合液中用甲醇钠滴定-氨基酸中的羧基：,在水中：在苯甲醇中：CH3O碱性比OH强，和NH3反应比OH完全，平衡常数大，滴定较完全，滴定突跃明显。,测定过程： （1）CH3ONa的苯甲醇标准液的配制：称取定量的纯金属钠，切片用无水甲醇洗净，分别多次加入冷却的无水甲醇中，溶解后，加入苯稀释。 （2） CH3ONa的苯甲醇标准液的标定：准确称取苯甲酸基准物，溶于二甲基甲酰铵中，用百里酚蓝为指示剂从黄色滴定至蓝色。 （3）-氨基酸的滴定：试样溶于苯甲醇中，用百里酚蓝为指示剂，用标准液滴定至黄色变为蓝色。氨基酸含量,参考书目： 杭州大学化学系分析化学教研室，分析化学手册（第二版）:第二分册：分析化学，化学工业出版社，北京，1997. 武汉大学主编，分析化学（第二版），北京，高等教育出版社，1982.,
