《动物细胞融合和单克隆抗体》由会员分享，可在线阅读，更多相关《动物细胞融合和单克隆抗体（23页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、荧光标记的小鼠细胞和人细胞融合实验,2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,动物细胞融合也称细胞杂交。是指_ 动物细胞结合成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的 _ 细胞，称为 _ 。,两个或多个,杂交细胞,单核,1.概念,一、动物细胞融合,生物种类 细胞来源 成功年代 酵母菌鸡 原生质体血红细胞 1975年 人胡萝卜 腹水癌细胞原生质体 1976年 人小鼠 纤维肉瘤细胞畸胎瘤细胞 1978年,已成功的动物细胞融合实例还有哪些？,处理方法,诱导手段,结果,A细胞,融合,有丝分裂,杂交细胞,灭活的病毒,用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程,2.过程：,B细胞,灭活病毒诱导细胞
2、融合,原理 使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。,A细胞,B细胞,灭活病毒 物理化学,杂交细胞,2.过程,3.原理：,细胞膜的流动性,使远缘杂交成为可能； 主要用途：制备单克隆抗体,4.意义和应用：,近日，美国研究人员发现了以一种白细胞为靶点并将其直接杀灭的人源化单克隆抗体，这有望为治疗白血病提供新的方法。,问题1 有何缺陷？,产量低、纯度低、特异性差,1 传统抗体与单克隆抗体,问题2 如何让B淋巴细胞产生单一大量抗体？,克 隆,抗 体,克隆,一个 B淋巴细胞,细胞群,抗体,单,克 隆,抗 体,二、单克隆抗体,什么细胞可以无限增殖？,如何才能将两种细胞的特点结合
3、起来？,1975年，米尔斯坦和柯勒 1984年，诺贝尔生理学或医学奖。,问题3,问题4,骨髓瘤细胞,2.制备过程：,诱导方法有哪些？,培养液中有几种细胞？,怎样筛选出杂交瘤细胞，优点？,注射抗原目的是什么？,克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选？,大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法？,2010-3-26,13,B淋巴细胞,注射特定抗原蛋白,骨髓瘤细胞,培养骨髓瘤细胞,融合,融合细胞几种类型？,骨瘤细胞-骨瘤细胞 B淋巴细胞- B淋巴细胞 B淋巴细胞-骨瘤细胞,多种杂交细胞,在具有筛选作用的培养基上培养,专一抗体检验阳性,克隆上述杂交细胞,分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞,单克隆抗体,
4、注射到小鼠体内,体外培养,2、制备过程,第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞,第2次筛选：筛选产生特异抗体的杂交瘤细胞。,遗传特性： 产生专一抗体、无限增殖。,杂交瘤细胞有何特点？,特异性强，灵敏度高,单克隆抗体概念,由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞群，产生的化学性质单一、特异性强的抗体。 优点：特异性强、灵敏度高,诊断疾病 抗人绒毛膜从促性腺极速单克隆抗体,优点：准确、高效、简易、快速,用于治疗疾病和运载药物（主要用于癌症治疗，也可运载药物，如 “生物导弹”）,（导向作用，作为载体，生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤） （位置准确、疗效高、副作用小）,4.单克隆抗体的应用：,二、单克隆抗体
5、,【堂堂清】,1.单克隆抗体的优点是_,特异性强、灵敏度高、可大量制备,2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的原因是 _,每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,3.产生抗体的细胞是_ 产生单克隆抗体的细胞是_,效应B细胞（浆细胞）,杂交瘤细胞,4.杂交瘤细胞的特点: _,既能无限增殖，又能分泌特异性抗体,5.首次筛选是为了获得_ 第二次筛选时为了获得 _,杂交瘤细胞,既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,课堂小结,动物 细胞 融合,动物细胞A,动物细胞B,动物细胞_,_ 法诱导,培养,物理 化学 生物,杂交细胞 （单核）,有丝分裂,膜融合 质融合,单克隆抗体,杂交细胞,杂交瘤细胞,骨
6、髓瘤 细胞,分泌特异抗体 的杂交瘤细胞,杂交瘤细胞群,提取,已免疫的 B淋巴细胞,动物细胞融合技术,动物细胞培养技术,单克隆抗体的制备,既能大量繁殖 又能产生专一抗体,特异性强 灵敏度高 可大量制备,课堂 小结,注射 抗原,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞,A,巩固练习,B,3.单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的（ ） A.B淋巴细胞 B.T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞,D,1.动物细胞融合技术最重要
7、的用途是 （ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞,4.（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是（ ） A.效应B细胞 BT淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D杂交瘤细胞,A B C D,5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ） 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A. B. C. D.,C,4.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案,不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞。,(1).该实验方案的目的是：_,(2).该方案能达到预期效果吗？为什么？,(3).A是从小鼠的脾脏中取得_ 该细胞能够产生_ 。,(5).C过程指细胞培养，该过程包括_培养和_培养两个阶段，其中_代以内的的细胞属于细胞株。,灭活的病毒,制备单克隆抗体,B淋巴细胞,抗体,(4).图中B为_过程，常用_作为诱导剂，该细胞继承_的遗传特性，既能_,又能_。,分泌抗体,细胞融合,双亲细胞,无限增殖,原代,传代,50,制备单克隆抗体,
