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1、第六章 细菌的分布与消毒灭菌,第一节 细菌的分布 第二节 消毒与灭菌,第一节 细菌的分布,一、细菌在自然界的分布（一）土壤中的细菌 （二）水中的细菌 （三）空气中的细菌 二、细菌在人体的分布（一）人体中常见的细菌（二）正常菌群及其意义,一、细菌在自然界的分布,（一）土壤中的细菌 土壤中含有大量的微生物，来自天然生活在土壤中的自养菌和腐物寄生菌以及随动物排泄物及其尸体进入土壤的细菌。 它们大部分在离地面1020厘米深的土壤处存在。土层越深，菌数越少，暴露于土层表面的细菌由于日光照射和干燥，不利于其生存，所以细菌数量少。 以细菌为主，放线菌次之，另外还有真菌、螺旋体等。 绝大多数对人是有益的，参与
2、大自然的物质循环，分解动物的尸体和排泄物；固定大气中的氮，供给植物利用；土壤中可分离出许多能产生抗生素的微生物。 进入土壤中的病原微生物容易死亡，但能形成芽胞的细菌如破伤风杆菌、气性坏疽病原菌、肉毒杆菌、炭疽杆菌等可在土壤中存活多年。因此土壤与创伤及战伤的厌氧性感染有很大关系。,一、细菌在自然界的分布,（二）水中的细菌 水中的细菌来自土壤、尘埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。 水中微生物种类及数量因水源不同而异。一般地面水比地下水含菌数量多，并易被病原菌污染。 在自然界中，水经常地进行着自净作用。日光及紫外线可使表面水中的细菌死亡，水中原生生物可以吞噬细菌，藻类和噬菌体能抑制一些细菌生长；另外水中
3、的微生物常随一些颗粒下沉于水底污泥中，使水中的细菌大为减少。 水中的病菌如伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、钩端螺旋体等主要来自人和动物的粪便及污染物。因此，粪便管理在控制和消灭消化道传染病有重要意义。,一、细菌在自然界的分布,（三）空气中的细菌 来源于人畜呼吸道的飞沫及地面飘扬起来的尘埃。 空气中缺乏营养物及适当的温度，细菌不能繁殖，常因阳光照射和干燥作用而被消灭。只有抵抗力较强的细菌和真菌或细菌芽胞才能存留较长时间。 室外空气中常见产芽胞杆菌、产色素细菌及真菌孢子等； 室内空气中的微生物比室外多，尤其是人口密集的公共场所、医院病房、门诊等处，容易受到带菌者和病人污染。如飞沫、皮屑、痰液、脓汗和
4、粪便等携带大量的微生物，可严重污染空气。某些医疗操作也会液成空气污染，如高速牙钻修补或超声波清洁牙石时，可产生微生物气溶胶；穿衣、铺床时使织物表面微生物飞扬到空气中，清扫及人员走动尘土飞场也是医院空气中微生物的来源。 室内空气中常见的病原菌有脑膜炎奈瑟氏菌、结核杆菌、溶血性球菌、白喉杆菌、百日咳杆菌等。 空气中微生物污染程度与医院感染率有一定的关系。,二、细菌在人体的分布,（一）人体正常菌群的分布 皮肤：最常见的是革兰氏阳性球病，其中以表皮葡萄球菌为多见，有时亦有金黄色葡萄球菌。当皮肤受损伤时，可引起化脓性感染，如疖、痛。在外阴部与肛门部位，可找到非致病性抗酸性耻垢杆菌。 口腔：口腔温度适宜，
5、含有食物残渣，是微生物生长的良好条件。口腔中的微生物有各种球菌、乳酸杆菌、梭形菌、螺旋体和真菌等。 胃肠道：因部位而不同，胃酸的杀菌作用，健康人的空肠常无菌。成年人的空肠和回肠上部的细菌很少，甚至无菌，肠道下段细菌逐渐增多。大肠积存有食物残渣，又有合适酸硷度，适于细菌繁殖，菌量占粪便的1/3。大肠中微生物的种类繁多，主要有大肠杆菌、脆弱类杆菌、双歧杆菌、厌氧性球菌等，其他还有乳酸杆菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、变形杆菌、真菌等。,二、细菌在人体的分布,（一）人体正常菌群的分布 呼吸道：鼻腔和咽部经常存在葡萄球菌、类白喉杆菌等。在咽喉及扁桃体粘膜上，主要是甲型链球菌和卡他球菌占优势，此外还经常存在着潜
6、在致病性微生物如肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌等。正常人支气管和肺泡是无菌的。 泌尿生殖道：正常情况下，仅在泌尿道外部有细菌存在，如男性生殖器有耻垢杆菌，尿道口有葡萄球菌和革兰氏阴性球菌及杆菌；女性尿道外部与外阴部菌群相仿，除耻垢杆菌外，还有葡萄球菌、类白喉菌和大肠杆菌等。阴道内的细菌随着内分泌的变化而异。从月经初潮至绝经前一般多见的为阴道杆菌（乳酸杆菌类）；而月经初潮前女孩及绝经期后妇女，阴道内主要细菌有葡萄球菌、类白喉杆菌、大肠杆菌等。 机体的多数组织器官是无菌的，若有侵入的细菌未被消灭，则可引起传染。因而在医疗实践中，当手术、注射、穿刺、导尿时，应严格执行无菌操作，以防细菌感染。,二、细
7、菌在人体的分布,（二）正常菌群及其意义 正常菌群的概念：在正常人体皮肤、粘膜及外界相通的各种腔道（如口腔、鼻咽腔、肠道和泌尿道）等部位，存在着对人体无害的微生物群，称之为正常菌群。 包括细菌、真菌、螺旋体、支原体等。它们在与宿主的长期进化过程中，微生物群的内部及其与宿主之间互相依存、互相制约，形成一个能进行物质、能量及基因交流的动态平衡的生态系统。 正常菌群大部分是长期居留于人体的又称为常居菌，也有少数微生物是暂时寄居的，称为过路菌。,二、细菌在人体的分布,（二）正常菌群及其意义 正常菌群的生理作用： 1. 生物拮抗作用 2刺激免疫应答 3营养作用,二、细菌在人体的分布,（二）正常菌群及其意义
8、 正常菌群的病理作用条件致病菌菌群失调菌群失调症,条件致病菌,条件致病菌：在一定条件下，正常菌群中的细菌也能使人患病，因此，这些细菌称为条件致病菌。 特定条件常见为：1.由于机体的防卫功能减弱,引起自身感染。 2.由于正常菌群寄居部位的改变，发生了定位转移，也可引起疾病。3.不适当的抗菌药物治疗致菌群失调。,菌群失调,菌群失调：在正常情况下，人体和正常菌群之间以及正常菌群中各细菌之间，保持一定的生态平衡。如果生态平衡失调，以至机体某一部位的正常菌群中各细菌的比例关系发生数量和质量上的变化，称为菌群失调。 菌群失调的常见诱因：主要是使用抗生素、同位素、激素，患有慢性消耗性疾病时肠道、呼吸道、泌尿
9、生殖道的功能失常也是重要原因。去除诱因后一般可使菌群复常，也有长期失调难于逆转的情况。,菌群失调症,菌群失调症：如菌群失调没有得到有效控制出现临床表现，引起二重感染，称为菌群失调症。 临床上常见的菌群失调症有： 耐药性葡萄球菌繁殖成优势菌而发生腹泻，偶尔发生致死性葡萄球菌脓毒血症； 变形杆菌和假单胞菌生长旺盛并侵入组织发生肾炎或膀胱炎； 白色念珠菌大量繁殖，引起肠道、肛门或阴道感染，也可发展成全身感染； 艰难梭菌在结肠内大量繁殖，并产生一种肠毒素及细菌毒素，导致假膜性肠炎。,第二节 消毒与灭菌,消毒 ：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。用以消毒的药品称为消毒
10、剂。 灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。 抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗生素。 防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。 无菌：不存在活菌。 卫生清理：将微生物污染了的无生命物体表面还原为安全水平的处理过程。,热力灭菌法 辐射杀菌法 超声波杀菌法 滤过除菌法 干燥与低温抑菌法,（一） 物理消毒灭菌法,干热灭菌法 焚烧：废弃物、尸体灼烧：接种环、试管口干烤：玻璃器皿红外线：医疗器械 湿热灭菌法 巴氏消毒法煮沸法流动蒸汽消毒法间歇蒸汽消毒法高压蒸汽灭菌法,1. 热力灭菌法,(1)焚烧和烧
11、灼,烧灼：是直接用火焰杀死微生物，适用于微生物实验室的接种针等不怕热的金属器材的灭菌。焚烧：是彻底的消毒方法，但只限于处理废弃的污染物品，如无用的衣物、纸张、垃圾等。焚烧应在专用的焚烧炉内进行。,(2)干烤灭菌,利用干烤箱，加热1601802小时，可杀死一切微生物，包括芽胞菌。适用于不能带水份的玻璃容器，金属器械等。,(3)煮沸,煮沸100，5分钟，能杀死一般细菌的繁殖体。许多芽胞需经煮潮56小时才死亡。 水中加入2%碳酸钠，可提高其沸点达105。既可促进芽胞的杀灭，又能防止金属器皿生锈。 煮沸法可用于饮水和一般器械（刀剪、注射器等）的消毒。,(4)流动蒸气消毒,流通蒸汽灭菌法：利用100左右
12、的水蒸汽进行消毒，一般采用流通蒸汽灭菌器（其原理相当于我国的蒸笼），加热15到30分钟，可杀死细菌繁殖体。消毒物品的包装不宜过大、过紧以利于蒸汽穿透。 间歇灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽，以达到灭菌的目的。一般用流通蒸汽灭菌器，100加热1530分钟，可杀死其中的繁殖体；但芽胞尚有残存。取出后放37孵箱过夜，使芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次，如此连续三次以上。本法适用于不耐高温的营养物（如血清培养基）的灭菌。,(5)高压蒸气灭菌,高压蒸汽灭菌是在专门的压力蒸汽灭菌器中进行的，是热力灭菌中使用最普遍、效果最可靠的一种方法。 优点是穿透力强，灭菌效果可靠，能杀灭所有微生物。 通常压力为103.42
13、kPa，温度121.3，1530分钟即能彻底杀灭细菌芽胞。 适用于耐热、耐潮物品。,（6）巴氏消毒法,利用热力杀死液体中的病原菌或一般的杂菌，同时不致严重损害其质量的消耗方法。由巴斯德创用以消毒酒精类，故名。加温61.162.8半小时，或71.71530秒钟。常用于消毒牛奶和酒类等。,非电离辐射：紫外线、红外线、微波电离辐射：高速电子、X射线、射线,2. 辐射杀菌法,紫外线,含义：是一种低能量的电磁辐射，波长范围为240280nm,最适的波长为260nm，这与DNA吸收光谱范围相一致。 杀菌原理：是紫外线易被核蛋白吸收，使DNA的同一条螺旋体上相邻的碱基形成胸腺嘧啶二聚体，从而干拢DNA的复制
14、，导致细菌死亡或变异。 特点及应用：穿透能力弱，不能通过普通玻璃、尘埃，只能用于消毒物体表面及空气、手术室、无菌操作实验室及烧伤病房，亦可用于不耐热物品表面消毒。 注意：杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼睛均有损伤作用，使用时应注意防护。,红外线,红外线辐射是一种0.771000微米波长的电磁波,有较好的热效应,尤以110微米波长的热效应最强。 红外线的杀菌作用与干热相似，利用红外线烤箱灭菌的所需温度和时间亦同于干烤。多用于医疗器械的灭菌。 人受红外线照射较长会感觉眼睛疲劳及头疼；长期照射会造成眼内损伤。因此，工作人至少应戴能防红外线伤害的防护镜。,微波,微波是一种波长为1毫米到1米左右的电磁波，
15、频率较高，可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，但不能穿透金属表面。 微波能使介质内杂乱无章的极性分子在微波场的作用下，按波的频率往返运动，互相冲撞和磨擦而产生热，介质的温度可随之升高，因而在较低的温度下能起到消毒作用。 微波照射多用于食品加工。在医院中可用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品食具、药杯及其它用品的消毒。 微波长期照射可引起眼睛的晶状混浊、睾丸损伤和神经功能紊乱等全身性反应，因此必须关好门后才开始操作。,电离辐射,包括高速电子、X线和r线等。 具有较高的能量与穿透力，可在常温下对不耐热的物品灭菌，故又称“冷灭菌”。 其机理在于产生游离基，破坏DNA。 可用于消毒不耐热的塑料注射
16、器和导管等；亦能用于食品消毒而不破坏其营养成份。,3. 滤过除菌法,含义：是用滤器机械地滤去液体或空气中的细菌的方法。 应用：用于不耐热、也不能以化学方法处理的液体或气体。 缺点：不能除去病毒、支原体以及L型细菌等小颗粒微生物。 滤器的种类很多常用的有： 薄膜滤器 蔡氏滤器 玻璃滤器高效颗粒空气滤器,微生物对强度高的超声波很敏感。其中以革兰氏阴性菌最敏感，而葡萄球菌抵抗力最强。虽然超声波强烈地振动可使菌群死亡，但往往有残存者。因此，这种方法在消毒灭菌方面无实用价值。 主要用以裂解细胞分离提取细胞组分或制备抗原。 超声波灭菌的机理尚不清楚，可能是细菌外表受细微气泡的作用，扰乱细胞内容物及破坏细胞壁致细菌崩解而死亡。,4. 超声波杀菌法,干燥法：常用于保存食物。浓盐或糖渍食品，可使细菌体内水分逸出，造成生理性干燥，使细菌的生命活动停止。 低温法：低温可使细菌的新陈代谢减慢，当温度回升到适宜范围又能恢复生长繁殖。常用作保存细菌菌种。冷冻真空干燥法是目前保存菌种的最好方法。,
