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1、 紫外 紫外 朗伯 紫外 分析条件的选择 测定方法 在医学检验中的应用 (海量营销管理培训资料下载 ) 紫外 按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外 它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行 定性分析 、 定量分析 及 结构分析 , 所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。 紫外 1 与其它光谱分析方法相比，其 仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快 ; 2 灵敏度高 ; 3 选择性好 ; 4 精密度和准确度较高 ; 5 用途广泛 。 1. 紫外 1. 物质对光的选择性吸收 物质对 光 的吸收是 选择性
2、的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是 光谱法的基础 。 (海量营销管理培训资料下载 ) 通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的 吸收曲线 。如图 3 在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长 (海量营销管理培训资料下载 ) 2 有机化合物的紫外 与紫外 形成单键的 电子、形成双键的 电子以及未参与成键的 跃迁类型有： *、 n * 、 *、 n * 四种。 机化合物的电子跃迁 饱合有机化合物 的电子跃迁类型为 *，n * 跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰 低于 200实际应用价值不大。 不饱合机
3、化合物 的电子跃迁类型为 n *， * 跃迁，吸收峰一般 大于 200 (海量营销管理培训资料下载 ) 生色团：是指分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团。人们通常将能吸收紫外、可见光的原子团或结构系统定义为生色团。见表 3 助色团：是指带有非键电子对的基团，如 们本身不能吸收大于 200是当它们与生色团相连时，会使生色团的吸收峰向长波方向移动，并且增加其吸收强度。见表 3 (海量营销管理培训资料下载 ) 红移和紫移 在有机化合物中，常常因取代基的变更或溶剂的改变，使其吸收带的最大吸收波长长波方向移动称为红移 (表 3向短波方向移动称为紫移。 (海量营销管理培训资料下载 ) 有 机化合物的
4、吸收带 吸收带 ( 在紫外光谱中，吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类，可将吸收带分为四种类型。 (1) (2) (3) (4) (海量营销管理培训资料下载 ) 3 无机化合物的紫外 镧系和锕系元素的离子对紫外和可见光的吸收是基于内层 跃迁而产生的。其紫外可见光谱为一些狭长的特征吸收峰，这些峰几乎不受金属离子的配位环境的影响。 1. 过渡金属的电子跃迁类型为 不同 的跃迁，吸收紫外或可见光谱。这些峰强烈受配位环境的影响。 例如 水为配位体，吸收峰在 794以氨为配位体，吸收峰在 663类光谱吸收强度弱，较少用于定量分析。 2. (海量营销管理培训资料下载 ) 3. 电荷迁移光谱
5、某些分子既是 电子给体 ，又是 电子受体 ，当电子受辐射能激发从给体外层轨道向受体跃迁时，就会产生较强的吸收，这种光谱称为电荷迁移光谱。如 苯酰基取代物在光作用下的异构反应。 影响紫外 物质的吸收光谱与测定条件有密切的关系。测定条件（温度、溶剂极性、 同，吸收光谱的 形状 、 吸收峰 的位置、 吸收强度等都可能发生变化。 在室温范围内，温度对吸收光谱的影响不大。 (海量营销管理培训资料下载 ) 2. 溶剂 注意如下几点： （ 1）尽量选用低极性溶剂； （ 2）能很好地溶解被测物，并且形成的溶液具有良好的化学和光化学稳定性； （ 3）溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。 3. 紫外 紫外 量分析
6、外，还可以用于物质的定性分析、纯度鉴定、结构分析。 (海量营销管理培训资料下载 ) 用紫外吸收光谱确定试样的纯度是比较方便的。 如蛋白质与核酸的纯度分析中，可用260的比值，鉴定其纯度。 (海量营销管理培训资料下载 ) 紫外 利用紫外吸收光谱鉴定化合物中的共轭结构和芳环结构还是有一定价值。 例如，某化合物在近紫外区内无吸收，说明该物质无共轭结构和芳香结构。 (海量营销管理培训资料下载 ) 2. 朗伯 设入射光强度为 吸收光强度为 射光强度为 反射光强度为 则 由于反射光强度基本相同，其影响可相互抵消，上式可简化为： 、吸光度和透光度 吸光度 : 为透光度倒数的对数，用 即 A=t 透光度： 透
7、光度为透过光的强度 0之比，用 即 T= 0 二、朗伯 朗伯 一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即 A= 中比例常数 与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。 朗伯 可见分光光度法的理论基础。 (海量营销管理培训资料下载 ) 三、吸光系数 当 l以 c以 g/称为 吸光系数 ，用 A= a cl (海量营销管理培训资料下载 ) 当 l以 c以 为单位， 称为 摩尔吸光系数 ，用 表示。 的单位为 L/它表示物质的浓度为 1， 液层厚度为 1液的吸光度 。 摩尔吸光系数 (海量营销管理培训资料下载 ) 比吸光系数 比吸光系数是指百分含
8、量为 1%， 表示。 %1111.0 M(海量营销管理培训资料下载 ) 四、偏离朗伯 （ 1）入射光为非单色光 （ 3）光程的不一致性。 光源不是点光源，比色皿光径长度不一致，光学元件的缺陷引起的多次反射等，均造成光径不一致，从而与定律偏离。 （ 2）溶液的不均性。 实际样品的混浊，加入的保护胶体，蒸馏水中的微生物，存在散射以及共振发射等，均可吸光质点的吸光特性变化大。 3. 紫外 一、主要部件的性能与作用 基本结构 : 光源 单色器 吸收池 检测器 信号显示系统 样品 (海量营销管理培训资料下载 ) 在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类： 热辐射光源和气体放电光源 1 光源 热辐射光源用
9、于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。 (海量营销管理培训资料下载 ) 单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。 2 单色器 单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用 棱镜和光栅 。 (海量营销管理培训资料下载 ) 吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。 3 吸收池 吸收池的种类很多，0中以 1 (海量营销管理培训资料下载 ) 4 检测器 检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 5 信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。
