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1、玉米组织培养,主要内容：,植物组织培养的意义. 玉米组织培养的目的. 研究进展. 目前玉米组织培养的主要方法.,植物组织培养的意义,植物组织培养可以生产大量的优良无性系. 细胞融合可打破种属间的界限，克服远缘杂交不亲和性障碍. 可获得单倍体、三倍体及其它多倍体、非整倍体. 组织培养的植物细胞也成为在细胞水平上分析研究的理想材料.,玉米组织培养的目的,玉米组织培养的目的是让外植体能够高频率地诱导出愈伤组织，建立高效 的体细胞再生体系 ，为玉米遗传转化和细胞工程研究创造有利条件 。,玉米组织培养的研究回顾,Larue在 1949年用甜玉米的胚乳作外植体，首次诱出玉米愈伤组织，但未获得再生植株 。
2、1975年，Green和Phillips首次用A188的幼胚作外植体，诱导出二倍 体 愈伤组织 ，并再生得 到第一株无性系植株。,玉米组织培养的研究现状,现在已经能从多种外植体中诱导出愈伤组织，并再生出植株。例如：幼胚、花 药、幼穗等，其中幼胚是最易诱导，也是目前最常用的外植体。,玉米组织培养的主要方法（简介）,1、玉米花粉和花药组织培养玉米花粉和花药的培养一般可获取单倍体植物，有利于促进玉米遗传育种工作的有效进展。,2、 玉米茎尖和根尖离体培养玉米植株的根尖和茎尖分生组织具有良好的分化性能。玉米茎尖和根尖离体培养有利于促进完整玉米植株的生长,并且在取材上不受季节限制。,3、玉米幼胚的组织培养
3、玉米幼胚属于二倍体， 且分生能力较强。幼胚是最易诱导， 也是目前最常用的外植体， 但幼胚取材的时间受到严格的季节限制。,玉米幼胚组织培养的全过程,1、准备工作 接种室消毒 准备诱导培养基（N6+肌醇+L-脯氨酸1.38g/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L+水解酪蛋白0.5g/L+2,4-D2mg/mL) 灭菌,2、外体消毒及挑幼胚75%酒精擦玉米外层叶片 至超净工作台，用75%酒精擦玉米外层叶片，剥一层擦一层至完 用刀去掉1/3玉米籽粒 挑幼胚 接种到准备好的诱导培养基上（暗培养）,3、继代准备继代培养基(N6+水解酪蛋白0.1g/L+L-脯氨酸0.69g/L+甘露醇20g/L+蔗糖30g/L
4、+琼脂6.5g/L+2,4-D1mg/ml) 诱导两次后，转入继代培养基每7天继代一次，直至出透明、黄色、坚硬的愈伤组织，可用于转化（一般继代三次）,4、转化 浸染培养（22-25，暗培养3天） 恢复培养（暗培养3天） 筛选培养 分化培养 生根培养 壮苗,5、移栽及管理 移栽前，应对移栽用的基质进行灭菌。 移栽前，可将培养物不开口移到自然 光照下锻炼2-3天，然后再开口练苗1-2天，以适应将来自然湿度的条件。 玉米组培苗移栽时首先应把根部的培养基清洗干净，以免受细菌或真菌污染而影响幼苗生长。 移栽,玉米茎尖组织培养的全过程,1、准备工作 接种室消毒 准备培养基（MS+蔗糖30g/L+琼脂6.5
5、g/L) 灭菌,1、玉米种子消毒 在500ml三角瓶中装入200300粒玉米种子 用75%酒精清洗8min 0.1%升汞5min 无菌水洗2遍 加入无菌水静置8h 0.1%升汞8min 无菌水洗5遍 装入钣盒 28暗培养3天,2、接种取出培养三天后的种子，接种到MS固体培养基中，根向下伸入培养基中，芽向上，芽萌发得不太好的继续放进饭盒中再培养。 接种到MS固体培养基中的芽放回28暗培养3-4天。,3、玉米茎尖转化 取出MS固体培养基中的芽放在无菌滤纸上 切根,镊子夹胚轴，在茎尖处用刀尖切半边。,在茎尖生长点划一小口。,转化后，接种于MS培养基中，进行暗培养。,3、移栽及其管理培养35天后，将其移栽至至花盆中，其 中注意事项与前面的相同。后期的管理也于前者相近。,谢 谢,
