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1、（2009年浙江卷）3下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ） A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达,高考回想,D,（2010年浙江卷）2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ） A 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C 将重组DNA分子导入原生质体 D 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞,（2010年浙江卷）30苏云金芽孢杆
2、菌产生的毒蛋白能使螟虫死亡。研究人员将表达这种毒蛋白的抗螟虫基因转入非糯性抗稻瘟病水稻的核基因组中，培育出一批转基因抗螟水稻。请回答： ,A,（2011年浙江卷）将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ） A、每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B、每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C、每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D、每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子,三维P178,（2011年浙江卷）将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的
3、是（ ） A、每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B、每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C、每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D、每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子,蛛丝基因,思考：如何形成重组DNA分子？,绿色荧光蛋白基因的载体,（2011年浙江卷）将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ） A、每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B、每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C、每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D、每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子,C,猜
4、想2012,我省科研人员发现，弯曲的蚕丝由于弯折处易断裂，其强度低于由蜘蛛纺绩器拖牵丝的直丝。并首次在世界上通过转基因方法将“绿色荧光蛋白基因”与“蜘蛛拖牵丝基因”拼接后成功插入蚕丝基因组序列中，并在受体细胞中成功表达高强韧性的蚕丝。,问题1、在这项“基因工程”的操作中，目的基因是？获得目的基因的常用方法有？ 2、采用绿色荧光蛋白基因的主要目的是？形成重组DNA分子的过程中需要用到的酶是？ 3、在这项“基因工程”的操作中，受体细胞是？,作为标记基因,拖牵丝基因,蚕的受精卵,化学方法合成目的基因 聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因,建立基因文库，从基因文库中获取目的基因,获得蛛丝基因方法：,猜
5、想2012,我省科研人员发现，弯曲的蚕丝由于弯折处易断裂，其强度低于由蜘蛛纺绩器拖牵丝的直丝。并首次在世界上通过转基因方法将“绿色荧光蛋白基因”与“蜘蛛拖牵丝基因”拼接后成功插入蚕丝基因组序列中，并在受体细胞中成功表达高强韧性的蚕丝。请同学构建含“蛛丝基因”的转基因蚕的基本步骤。,1、获得目的基因(蛛丝基因)； 2、形成重组DNA分子(“绿色荧光蛋白基因” +“蛛丝基因”+载体)； 3、将重组DNA分子导入受体细胞(蚕的受精卵)； 4、筛选含有目的基因的受体细胞； 5、目的基因(蛛丝基因)的表达。,蛛丝基因,思考：如何形成重组DNA分子？,绿色荧光蛋白基因的载体,一、基因工程的基本步骤,问题探
6、讨：1、基因工程的操作水平是？2、基因工程的技术保障是？,3、下列叙述是否正确？为什么？ （1）限制性核酸内切酶的识别序列是GAATTC，只能在G和A之间切断DNA？ （2）DNA连接酶能够将任意2个DNA片段通过碱基粘合？,1、基因的剪刀限制性核酸内切酶,特点：,作用：,所作用的化学键：,特异性（识别特定核苷酸序列，切割特定切点）,识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。,打开“磷酸二酯键”,二、基因工程的操作工具,2、基因的针线DNA连接酶,将两个具有相同粘性末端的DNA片段连接成一个DNA。,作用：,所作用的化学键：,连接“磷酸二酯键”,二、基因工程的操作工具,3、基因的载
7、体质粒,控制质粒DNA转移的基因,作为基因工程的载体，其上常有抗性基因可以作为标记基因。,含义：,分布：,质粒是能够自主复制的双链环状DNA分子,作用：,存在于细菌等生物的细胞溶胶中,思考：基因工程的载体还有哪些？,噬菌体、动、植物病毒等,问题4、为什么转基因动物的培育常用受精卵作为受体细胞？5、在这项“基因工程”的操作中如何筛选含目的基因的受体细胞？ 6、“蛛丝基因”成功表达的标志是？,7、在基因工程操作基本步骤中，不需要进行碱基互补配对的是？,受精卵具有全能性，可使外源基因（目的基因）在相应组织细胞中表达。,产生高强韧性的蚕丝。,猜想2012,我省科研人员发现，弯曲的蚕丝由于弯折处易断裂，
8、其强度低于由蜘蛛纺绩器拖牵丝的直丝。并首次在世界上通过转基因方法将“绿色荧光蛋白基因”与“蜘蛛拖牵丝基因”拼接后成功插入蚕丝基因组序列中，并在受体细胞中成功表达高强韧性的蚕丝。请同学构建含“蛛丝基因”的转基因蚕的基本步骤。,检测受体细胞是否发出绿色荧光。,将重组DNA导入受体细胞。,三、基因工程的应用,问题探讨: 1、基因工程育种的优点？ 2、一头携带人白蛋白基因的转基因牛，只有其乳汁中能获取人白蛋白，是因为该基因只存在于乳腺细胞中？ 3、什么是基因治疗？,目的性强 打破远缘杂交的不亲和性,基因治疗是向目标细胞中引入正常功能的基因，以纠正或补偿基因的缺陷，达到治疗的目的。,转基因哺乳动物：,显
9、微注射,胚胎体外培养,胚胎移植,转基因植物：,工程菌：,1. 下列关于基因工程的叙述，正确的是: A.基因工程往往以细菌抗药性基因为目的基因 B.重组DNA的形成和扩增是在细胞内完成的 C.基因工程育种能够定向地改造生物性状，快速形成新物种 D.限制性内切酶和DNA连接酶是构建重组DNA必需的工具酶,知能提升,D,（11年山东卷）35. 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。 （1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从处死的雌鼠_中获取。 （2）图中的高血压相关基因作为_，质粒作为_,二者需用_ _切割后连接
10、成重组载体，该过程与质粒上含有_ _有关。,卵巢,目的基因,载体,同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）,限制酶切割位点,（11年山东卷）35. 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。 （3）子代大鼠如果_ _和_，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。 （4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是_、早期胚胎培养和胚胎移植。,体外受精,检测到体内有相关蛋白,出现高血压,（11年四川卷）5.北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个
11、氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（ ） A、过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序 B、多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白， C、过程构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选 D、应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达,B,我国科研人员发现，弯曲的蚕丝由于弯折处易断裂，其强度低于由蜘蛛纺绩器拖牵丝的直丝并首次在世界上通过了转基因方法将“绿色荧光蛋白基因”与“蜘蛛拖牵丝基因”拼接后成功插入蚕丝基因组中，并在受体细胞中得到成功表达。 (1)在这项“基因工程”的操作中，目的基因是 ，采用绿色荧光蛋白基因的主要目的是 。 (2)两基因组合在导人受体细胞前必须进行的步骤是：将其与由细菌体内取得的 进行切割处理，以保证有相同的 并拼接成 。如果引入的受体细胞是细菌，还要对细菌作 处理。,：(1)拖牵丝基因；作为标记(基因) (2)质粒；黏性末端；重组质粒(或重组DNA)；CaCl2(,
