肿瘤实验动物模型的制备

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1、上海交通大学医学院教 案课程名称:实验动物学 第 1,2 次课 2008 年 3 月 4 日教师姓名 佟大年 职称 医师 教研室 外科 教学时数 2 学时授课题目 肿瘤实验动物模型的制备 教学对象 03 级五年制授课地点 第六人民医院动物实验室 教学方式 多媒体授课、实验课本课的重点、难点:重点:1 肿瘤实验动物模型的分类及基本原理2 常用肿瘤实验动物模型的制备难点:肿瘤实验动物模型的制备本次课应用的教具:1 动物和器械SD 大鼠手术刀 一把直手术剪 一把眼科剪 一把蚊式血管钳 直、弯各两把手术镊 有齿、无齿各一把缝针 小圆针、三角针各一枚丝线 适量小拉钩 一把2. 教具:多媒体教学(幻灯片)

2、以及部分动物实验模型实例图片 3. 教材参考书:秦环龙主编的普通外科实验动物学讲义教材主要教学内容:(可另附页)一、实验动物的肿瘤模型的分类:1. 自发性肿瘤模型2. 诱发性肿瘤模型3. 移植性肿瘤模型4. 人体肿瘤的异种移植性肿瘤模型二、胃癌动物模型的制备胃腺粘膜穿挂含甲基胆蒽(MC) 线结。含 MC 的线结是用普通细线,在一端打结后,将线结置于盛有 MC 的小玻璃试管内,再在酒精灯上微微加温使 MC 液化渗入线结而成。小鼠禁食几个小时后,在无菌手术下打开腹腔,将胃取出,在腺胃前壁作一长约 2cm 的切口,缝针自切口进入胃腔,然后从幽门小弯侧粘膜面经肌层和浆膜穿出,在浆膜表面打结固定,使合

3、MC 线结紧贴于粘膜,顺序分别将腺胃切口和腹壁缝合。到达预定观察期时,将动物处死,取内脏进行组织学检查。三、人肝癌的原位移植人癌标本的选择:所取标本均经术前、术中、术后诊断为典型的原发癌,并且患者术前未接受任何化疗、放疗及免疫治疗。首代移植术:将患者手术新鲜标本保持无菌,离体后立即置入 RPMI1640 培养液中,在无菌条件下将瘤组织修剪成 12mm3 大小瘤块,同时将备好的正常裸鼠全麻。方法是将硫苯妥钠用生理盐水稀释后,按 30mgkg1 体重 (即 0.30.4ml只1)行腹腔注射,取左侧卧位,常规消毒皮肤,在右肋缘下行长 l cm 斜切口,打开腹腔,暴露移植脏器腔,将准备好的人癌组织块植

4、入,0/8 吻合线缝合,棉签粘血、止血,确保无明显出血后用酒精棉球消毒,0/3 丝线、眼科小角针或圆针全层连续缝合切口,然后擦净周围血迹并消毒后放回笼中。整理用物、房间用 0.2过氧乙酸消毒。传代移植术:当原位移植瘤长至 12cm3 时(约移植后 35 周) ,将其全麻。在无菌条件下取出肿瘤。移植方法与步骤同首代移植术。同时将每次传代的部分瘤组织作病理、电镜及其它生化指标测定。本次课小结要点1 了解肿瘤动物模型的基本原理及主要分类2 对常用肿瘤动物模型的制备有初步了解3 锻炼基本的外科操作技术本次课复习思考题1 肿瘤动物模型的主要分类及各自的定义2 人肝癌的原位移植动物模型制备的基本步骤下次课预习要点

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