疱疹病毒科课件

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1、第27章 双股DNA病毒,双股DNA病毒是指：基因组核酸为双股DNA的病毒。主要包括以下病毒： 痘病毒科 非洲猪瘟病毒科与虹彩病毒科 疱疹病毒科 腺病毒科 多瘤病毒科与乳头瘤病毒科 嗜肝DNA病毒科 杆状病毒科 ： 为昆虫及甲壳动物的病毒,第27章 双股DNA病毒,第一节 痘病毒科 第二节 非洲猪瘟病毒科与虹彩病毒科 第三节 疱疹病毒科 第四节 腺病毒科 第五节 多瘤病毒科与乳头瘤病毒科,双股DNA病毒的部分特性,第一节 痘病毒科 Poxviridae,本科病毒可引起人和许多动物的痘病，由持续较长时间的轻症至严重症状的致死性感染.,一、痘病毒科的分类,根据病毒的特征、自然宿主和特异性抗原，痘病

2、毒科可分为2个亚科。,脊椎动物痘病毒亚科昆虫痘病毒亚科,禽痘病毒属 正痘病毒属：天花病毒及痘苗病毒 猪痘病毒属 山羊痘病毒属 兔痘病毒属 副痘病毒属 软疣病毒属：对人有致病性 雅巴痘病毒属,二、各属的关系,各种禽痘病毒之间在抗原性上存在交叉关系； 各种哺乳动物的痘病毒之间也存在抗原关系； 禽痘病毒和哺乳动物的痘病毒之间不存在交叉关系。,三、生物学特性,lb -侧体（lateral body） c -芯髓（core）,1、形态： 多为砖形(250nm250nm200nm) 少数为卵圆形(260nm160nm) 副痘,衣壳中含类脂与管状或球管状的蛋白质结构，中为DNA芯髓，芯髓之旁为两个侧体，具有

3、囊膜。,三、生物学特性,2、特性：病毒基因组由单分子的线状双股DNA组成，大小在200kb左右能编码约200种蛋白质，100种是结构蛋白质，具有依赖DNA的RNA聚合酶等，在细胞浆内复制，通过出芽方式出芽，并能在上皮细胞浆中形成胞浆包涵体。,细胞质内复制,CDC,3、抵抗力：对热抵抗力不强。 55,20min或37,24h 丧失感染力; 对冷及干燥有抵抗力。 从皮肤病灶中脱落下来的干痘痂，毒力可保存几个月。 4、培养：能在1012日龄发育鸡胚成纤维细胞上生长繁殖，多数在膜上可形成痘斑。痘病毒的种类不同，痘斑的形态、颜色、大小以及形成时间也不同。,四、致病性,痘病毒可引起各种动物的急性和热性传染

4、病，特征是皮肤和粘膜发生特殊的丘疹和疱疹。兔痘病毒所致的疾病为传染性皮肤纤维瘤和粘液瘤。禽痘病毒所引起的疾病特点是在上皮组织产生增生性和肿瘤性病。,五、诊断,病毒分离：采取无菌的清朗庖液或取痘斑研磨后，加双抗处理后，鸡胚绒毛尿囊膜接种，在37 孵育57天，可见绒尿膜上形成增生性、坏死性痘疱。 将绒尿膜固定制作切片，用苏木素和伊红染色，在上皮细胞的胞浆内可以见到嗜酸性包涵体。,六、常见痘病毒,1、鸡痘病毒,（1）主要特征 形态 病毒子呈砖状椭圆形，为禽痘病毒属的代表种，某些毒株具有血凝素，能凝集鸡、其它禽类、绵羊等的红细胞，对干燥抵抗力较强。 培养 一般应用鸡胚或绒毛尿囊膜培养鸡痘病毒，可形成痘

5、斑，在鸡胚成纤维细胞培养中生长良好，产生CPE，并形成空斑 抵抗力 对干燥的抵抗力极强，在干燥的皮肤结痂中的病毒，阳光照射数周而不被灭活 致病性 鸡痘根据病鸡表现可以分为三种病型，即皮肤型、白喉型和混合型 皮肤型 在鸡冠、肉髯和眼皮等处，产生一种特殊的痘子。 白喉型 主要在口腔和咽喉部分，先是在粘膜上生成一种黄白色的小结节，后逐渐融合形成一层黄白色干酪样的假膜。,皮肤型鸡痘,白喉型鸡痘 口腔和喉部粘膜表面的黄色小结节,防 制,目前主要采用鸡痘疫苗进行预防。 1）鸡痘活疫苗 此苗用于35日龄以上的幼鸡，对雏鸡有一定的毒力 2）鸽痘活疫苗 毒力比鸡痘疫苗弱，用于1日龄雏鸡和产蛋母鸡，一般采用毛囊接

6、种法 3）鸡痘鹌鹑化活疫苗 毒力很低，雏鸡使用安全,使用效果良好,2、绵羊痘病毒,致病性 在自然条件下本病毒只感染绵羊，可致全身性疱疹，肺常出现特征性干酪性结节，各种绵羊对绵羊痘病毒的易感性不同，死亡率从5%50%不等 培养 绵羊痘病毒可在鸡胚绒毛尿囊膜上、绵羊、山羊、犊牛睾丸细胞培养中生长，并产生明显的CPE 预防 定期接种疫苗，常用羊痘氢氧化铝苗或鸡胚化羊痘弱毒疫苗,人是由于直接接触病羊污染的物质也可感染。,3、山羊痘病毒,该病毒与绵羊痘病毒之间存在共同抗原在自然条件下仅感染山羊，表现为发热、有粘液性、脓性鼻漏及全身性皮肤丘疹,4、粘液瘤病毒,致病性：无论野兔、家兔都非常易感，澳大利亚曾引

7、入此病毒，以图消灭过剩的野生家兔。兔感染48h后出现临床症状，首先是眼结膜炎，接着头部广泛肿胀，呈特征性的“狮子头”，严重者体温升高到42，多在48h死亡。培 养： 病料悬液处理后接种鸡胚绒毛尿囊膜，3天后产生直径0.51.0mm的圆形痘疱。,第二节 非洲猪瘟病毒科与虹彩病毒科,痘病毒科,因此，非洲猪瘟病毒单独立为一科 一属一种,第二节 非洲猪瘟病毒科与虹彩病毒科,非洲猪瘟病毒科与虹彩病毒科的主要特征 ：,这两科的病毒均为：线状双股DNA，20面体对称， 有囊膜。,软蜱,病毒的形态及培养 非洲猪瘟病毒：直径175215nm，基因组大小190kb，编码200多种蛋白质。DNA分子具有共价的闭合末

8、端，并有倒置末端重复子及发夹结构。 是唯一已知的核酸为DNA的虫媒病毒。 白细胞感染ASFV后，表面则有一种病毒特异抗原，能吸附正常猪的红细胞，这种血细胞吸附现象可被抗本病毒的免疫血清所抑制，血细胞吸附试验具有毒株特异性。 初始分离的ASFV仅在猪单核细胞和巨噬细胞中复制；适应后可在猪肾细胞(PK15)、Vero细胞等生长。,一、非洲猪瘟病毒,致病性 仅家猪易感，以急性高热为特征，全身出血，病程短，死亡率高。 病毒可由呼吸道入侵，首先在扁桃体和鼻粘膜附近的淋巴结增殖，而后进入血流，形成病毒血症，红细胞及白细胞中含毒。,一、非洲猪瘟病毒,诊断 （1）病毒分离和鉴定 实际应用中，白细胞组织培养的血

9、细胞吸附实验可用于非洲猪瘟与猪瘟的区别诊断 用直接荧光抗体试验检测抗原 用PCR技术检查病毒基因组 （2）血清学试验 ELISA：直接检测病毒感染猪抗ASF病毒抗体 间接荧光抗体试验（IFA） 对流免疫电泳试验：只可用于猪群筛选而不能用作检查单个猪,一、非洲猪瘟病毒,OIE 推荐,免疫本病毒各个毒株之间免疫原性很低，对同株的免疫力也是短暂的，目前尚无有效疫苗可用。,一、非洲猪瘟病毒,注意： 我国目前没有非洲猪瘟，必须严加防范！,分为4个属，其中2个属与鱼类和两栖类疾病相关。 该病毒科某些成员感染昆虫后，可形成病毒颗粒结晶，出现彩虹样蓝绿色光辉，故得名。 能在多种细胞生长(鱼类、两栖类、禽类、哺

10、乳类)，生长温度1232 。 复制与ASFV相似，但有2个差异： 自身不编码RNA聚合酶，而是将宿主细胞的RNA聚合酶II修饰后利用； 复制分为2个阶段： (1)细胞核内复制DNA； (2)在胞浆内复制的DNA形成大于正常基因组10倍的多联体。,二、虹彩病毒,临床常见的有：,第三节 疱疹病毒科 Herpesviridae,疱疹病毒可引起多种动物的疾病。包括：,该科病毒均为：线状双股DNA，20面体对称， 有囊膜。,一、分 类,疱疹病毒甲亚科 疱疹病毒乙亚科 疱疹病毒丙亚科 未定亚科,一、分 类,疱疹病毒甲亚科 疱疹病毒乙亚科 疱疹病毒丙亚科 未定亚科,一、分 类,疱疹病毒甲亚科 疱疹病毒乙亚科

11、 疱疹病毒丙亚科 未定亚科,一、分 类,疱疹病毒甲亚科 疱疹病毒乙亚科 疱疹病毒丙亚科 未定亚科,一、分 类,疱疹病毒甲亚科 疱疹病毒乙亚科 疱疹病毒丙亚科 未定亚科,二、主要特征,病毒颗粒直径150nm，有囊膜，20面体对称，由162个壳粒组成，囊膜上具有许多糖蛋白的纤突。 基因组由单分子双股DNA组成，大小为125235kb，不同成员的基因组组成、大小及结构有很大差异。,三个水痘带状疱疹病毒颗粒的电镜照片,疱疹病毒,核衣壳,水痘带状疱疹病毒,疱疹病毒,疱疹病毒,大小乳多空病毒 3-5x106 腺病毒 23x106 疱疹病毒 90-145x106,三、与养殖业密切相关的几个疱疹病毒,伪狂犬病

12、毒（Pseudorrabies virus） 禽传染性喉气管炎病毒（Avian infectious laryngotracheitis virus） 马立克病病毒（Mareks disease virus） MDV 鸭瘟病毒（Duck plague virus）,（一）伪狂犬病毒,属疱疹病毒甲亚科，又名猪疱疹病毒1型。 猪为原始宿主， 也可感染其他动物，如马、牛、绵羊、山羊等多种动物及多种野生动物 主要特性：符合甲亚科的特征 培养： 易在鸡胚绒毛尿囊膜上生长，接种后34天能形成大小不一的隆起的白色痘斑 可在很多种脊椎动物的细胞培养中生长： 易在兔、仓鼠和猪的肾细胞、兔和豚鼠睾丸细胞以及鸡胚成

13、纤维细胞中生长； 但以兔肾细胞最易感。可形成细胞病变和空斑，感染细胞形成大的包涵体。,4、致病性,成年猪多为隐性感染，或少数出现轻微发热和神经症状，不死者可康复。幼猪感染后呈发热、麻痹、昏迷等症状，死亡率很高； 怀孕母猪能引起流产、死胎或木乃伊胎； 其它动物感染后有很高死亡率，最特征症状为体躯某部奇痒； 病料皮下接种兔，25天死亡，乳鼠脑内接种1周左右死亡； 病毒分布：最初位于扁桃体，感染24小时内可从头部神经节、脊髓及桥脑中分离到病毒； 排毒：康复猪可通过鼻腔分泌物及唾液持续排毒，但粪、尿不带毒。,伪狂犬病毒,伪狂犬病毒,伪狂犬病毒,伪狂犬病毒,伪狂犬病毒,5、诊断,动物试验：用12ml适当

14、稀释的病脑组织悬液皮下接种兔，2 5天后于接种部位出现奇痒症状，最后麻痹致死。 病毒分离：常用猪肾细胞系（PK-15），细胞接毒后24 72小时，出现CPE，细胞单层出现折光性细胞，逐渐增多，最后完全脱落，形成合胞体，其形态和大小各异。 病毒鉴定： 可用特异性抗血清做中和试验鉴定病毒，或用免疫荧光试验鉴定病毒。 用PCR技术鉴定伪狂犬病毒，多用于隐性感染。,伪狂犬病毒,血清学试验,病毒中和试验 ELISA（国际贸易指定试验）： 能迅速检测大量样品。 有些试剂盒还能区分免疫动物和自然感染动物， 多家检察机构明确规定，凡是运送无伪狂犬病区的猪，必须用ELISA试验检测gE抗体。,伪狂犬病毒,6、预

15、防,灭活苗,弱毒苗,基因缺失苗又称为标记疫苗，缺少一种特异性的糖蛋白基因（gG,gE或gC），可区别于野毒感染。在计划根除伪狂犬病的国家，可选用这类标记疫苗。,伪狂犬病毒,（二）禽传染性喉气管炎病毒,(又名禽疱疹病毒1型) 分类：疱疹病毒甲亚科，类传染性喉气管炎病毒属，仅1个血清型. 培养： 仅能在发育鸡胚复制，采用绒毛尿囊膜接种，绒尿膜可见有痘疱样坏死灶 病毒能在鸡胚肝、肾和肺细胞上生长繁殖，并引起CPE 抵抗力： 对热敏感，病毒在-20-60或冻干条件下，可长期保存，至少10年； 对一般消毒药抵抗力不强。在3%来苏儿或1%苛性钠溶液中，不到1分钟即行死亡。,4、致病性,自然感染对象为鸡；

16、各种年龄鸡均可被感染. 仅以成年鸡的症状最典型。 康复鸡可部分成为带毒鸡。 此外，接种过传染性喉气管炎疫苗的鸡能够在较长的时间内散布病毒，成为传染的来源.,禽传染性喉气管炎病毒,特征是病鸡呈现呼吸困难和咳出血性渗出物； 病变主要发生在喉头和气管部分，气管黏膜肿胀、出血、坏死和形成糜烂。,禽传染性喉气管炎病毒,5、微生物学诊断,1）病毒分离 病料采集：发病早期的气管渗出物、气管粘膜及肺组织。 鸡胚接种：46枚910日龄SPF鸡胚或非免疫胚绒尿膜接种，从第3天开始形成痘斑。鸡胚多在接种后5 6天死亡，初代分离，往往不引起鸡胚死亡，须传代后才出现有规律死亡。 雏鸡接种：将分离材料接种5只数日龄内易感雏鸡，接种后3 4天出现明显的症状和病变。,禽传染性喉气管炎病毒,2）病毒鉴定,病毒中和试验 荧光抗体检查气管组织中的病毒 鉴别诊断上应注意同传染性支气管炎、传染性鼻炎、鸡败血支原体病相区别，可采用泄殖腔接种法，即采取病鸡的气管渗出物或其他含病毒的材料，涂擦易感鸡的泄殖腔粘膜，45天后观察涂擦部位是否出现红肿等炎症反应,