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1、18.10.8,华中农业大学动物科技学院,1,第五章 配种与受精 第一节 自然交配 第二节 人工授精 第三节 受 精,第13讲,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,2,第一节 自然配种,自然交配（Natural mating） 自由交配 分群交配 圈栏交配 人工辅助交配,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,3,人工授精（Artifical insemination，AI）：人工条件下，利用器械采集种公畜的精液，经过品质检查、稀释保存等处理后，再用器械将精液输送到发情母畜生殖道内，使母畜受孕。,第二节 人工授精,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,4,一、人工授精的发展概况,1
2、8.10.8,华中农业大学动物科技学院,5,二、人工授精的利弊,提高优秀种公畜利用率 减少种公畜的数量，饲料成本及养殖面积 减少疾病的传播 促进不同体积的公畜和母畜的交配 能够远程运输 能够在使用前检查精子的质量 使生产过程变得更加灵活,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,6,二、人工授精的利弊,需要有熟练的技术员 严格的操作程序,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,7,（一）种公禽/畜的选择及调教,1.体型外貌选择生长发育正常、健壮阴茎发育正常性欲旺盛2.调教训练采精前12周加强营养台畜,三、人工授精方法及操作步骤,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,8,台畜准备:台畜有真
3、、假两种,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,9,（二）采精方法技术,1、采精方法（1）截取法母畜诱情法假阴道法: 外壳、内胎、集精杯及附件,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,10,假阴道法：马、牛、羊、驴,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,11,（2）电刺激采精法负极插入直肠内4cm，圆周运动刺35次，通电13秒正极刺入公畜髂骨区皮下，050伏特计0100毫安计,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,12,（3）按摩采精法背腹式：大体型（鸭、鹅）背式按摩法：鸡、小体型的鸭和鹅,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,13,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,
4、14,减少感染员工安全,（4）手握法：猪,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,15,牛：2-3次/周，每天连续采精2次；马：2-3次/周，配种季节1次/d；猪：3-4次/周，隔天1次；羊：1-3次/天，每周休息2d；,2.采精的频率,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,16,.采精频率公鸡：35次周，下午， 23年：=1：4060公鸭：34次周，下午，23年：= 1：1520公鹅：34次周，上午，34年：= 1：1520,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,17,（三）精液稀释,1.目的 扩大容量抑制微生物活性降低精子消耗 长期保存与长途运输,18.10.8,华中农业大学动物
5、科技学院,18,2.成份及作用扩容剂：葡萄糖，生理盐水营养剂：糖类、卵黄、牛奶,（三）精液稀释,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,19,保护剂a、缓冲物质：pHb、弱电解质、非电解质电解度：精子，保存c、防冷刺激物质（冷休克）卵黄-卵磷脂：融点低，不易结冰,（三）精液稀释,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,20,保护剂d、抗冻物质甘油、DMSO（二甲基亚砜 ）e、双抗：青、链霉素f、酶类：过氧化氢（代谢有害物）激素：OXT、PGE维生素：精子活力,（三）精液稀释,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,21,3.倍数牛：10-20 ；羊：10-20猪：2-3 ；马：3-5鸡：
6、5- 15,（三）精液稀释,浓度检测仪(Spectophotometer),18.10.8,华中农业大学动物科技学院,22,4.方法 30水浴中：精液、稀释液（同温） 倒入稀释液，慢、轻摇动 由4-5倍稀释，再10-20倍稀释；马上镜检,（三）精液稀释,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,23,5、注意 清洗、消毒 现配现用 三蒸水or去离子水：PH中性 药品：分析纯、电子天平（0.1mg） 卵黄：新鲜、去掉卵黄膜及卵蛋白 奶类：新鲜、无糖淡奶、过滤、煮沸去皮 酶类、抗生素、V、激素：稀释冷却再加 保温、尽快：鲜精稀释液30min内,（三）精液稀释,18.10.8,华中农业大学动物科技学
7、院,24,（四）精液保存,1.液态保存 （1）常温保存（15-25） 弱酸（充二氧化碳） 隔绝空气：充氮气 （2）低温保存（05）精子冷休克，添加卵黄、牛奶等温度缓慢下降,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,25,2. 冷冻保存冷源：液氮（-196）、干冰（-79）颗粒：0.1ml、 1200万个/0.1ml细管：0.25ml、1000万个/0.25ml活力：0.35冷冻保护剂：甘油，DMSO,（四）精液保存,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,26,A、 颗粒法采精稀释4平衡滴冻冷冻（液氮熏蒸或埋于干冰）液氮 简便，成本低，大量储存 剂量不标准，易污染,（四）精液保存,18.10
8、.8,华中农业大学动物科技学院,27,B、细管法 采精稀释降温和平衡（4）分装冷冻（液氮熏蒸或干冰埋藏）液氮 剂量标准、易于标记，容积小，适于机械化生产,（四）精液保存,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,28,C、冻精解冻方法 3540温水解冻 05低温冰水解冻法 颗粒冻精解冻：加解冻液,（四）精液保存,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,29,1、方法直接输精法：鸡、小体型鹅、猪直肠把握法：牛阴道扩张器法：受胎率低 2、输精部位 阴道： 鸡、小体型鹅 阴道或子宫颈： 牛、羊、兔 子宫内： 马、猪,（五）人工输精,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,30,18.10.8,华
9、中农业大学动物科技学院,31,牛直肠把握法：人工授精,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,32,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,33,3、时间 (第一次) 排卵前4-6hs 兔：2-6hs 羊：10-36hs 马：48hs 牛：9-24hs 猪：19-30hs（发情后）,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,34,4、间隔与输精剂量鸡：1次3-5天 0.025-0.1ml 0.5-1亿 牛：1-2/16-20 0.2-2.0ml 0.3-0.5亿羊：1-2/16-20 0.05-0.1ml 0.1-0.2亿马：2-3/24/48 15-30ml 1.5-3亿猪：1-2 /1
10、2-48hs 20-40ml 10-20亿鸭：1次5-7天 0.03-0. 5ml 0.6-0.8亿,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,35,第三节 受 精,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,36,一、精子的准备 1、精子运行 三个精子库子宫颈“隐窝”子宫内膜腺壶峡连接处峡部一侧,第三节 受 精, 三个屏障子宫颈子宫内膜腺宫管连接处,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,37,三个动力鞭毛运动激素作用：OXT和PG生化动力：呼吸作用、 PH升高,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,38,被淘汰精子的清除白细胞吞噬 流出体外：阴道粘液,18.10.8,华中农业大学动物科
11、技学院,39,阴道（牛、羊、猪、兔） 屏障：子宫颈 尾部活动力子宫颈（精库） 屏障：子宫内膜腺 尾部活动力子宫（子宫内膜腺：精子库） 屏障：宫管连接处 平滑肌运行壶峡连接处 （精子库） 壶腹部：受精,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,40,（1）获能（Capacitation）：精子外膜的形态、 生理、生化等变化除去去能因子（附睾液中）代谢增强（释放水解酶）获得受精能力活动能力提高,2、受精前特殊反应,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,41,精子头部的质膜、顶体外膜融合、破裂，释放内容物（透明质酸酶、顶体素）的过程 精子在一定时间内穿透卵子的放射冠 促进精子与卵子融合,（2）顶
12、体反应（Acrosome reaction）,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,42,精子结构上的获能假性顶体反应：衰老、死亡时顶体破裂Ca离子有关,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,43,（3）去能（decapacitation),精清中(如附睾分泌)含去能因子 精子表面蛋白等的附着 去能物质无种间特异性 去能是可逆的,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,44,（4）超激活(surperactivation),尾部鞭打频率增加，运动速度加快 钙离子起关键作用,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,45,二、卵子的准备卵子的接纳与运行 输卵管伞部纤毛运动 卵子外周卵丘
13、细胞运动,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,46,输卵管输卵管收缩液体的流动纤毛的摆动最后准备和第二次成熟分裂,二、卵子的准备,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,47,卵和胚在生殖道的运行,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,48,三、受精位置、时间位置：壶腹部 时间：排卵后23h 受精：两性原核合并形成合子,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,49,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,50,四、受精过程 1、精子穿过放射冠（Corona radiata）猪精子释放透明质酸酶 其它 排卵几小时，脱去放射冠,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,51,18.
14、10.8,华中农业大学动物科技学院,52,2、精子穿过透明带(zona pellucida) 特异的精子受体：ZP1、ZP2、ZP3 顶体含种间差异的脂酶、酸性磷酸酶 种属特异性 3、精子进入卵黄（Vitellus）精子与卵黄融合尾部不进入，留在卵周隙,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,53,皮质反应(Cortical reaction) 膜电荷改变、去极化 卵黄膜内皮质颗粒排入卵周隙分泌蛋白或酶引起卵黄膜和透明带反应 防止其它精子再进入卵黄膜,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,54,卵黄膜反应（vitelline reaction）收缩、加厚、封闭： 卵黄膜与皮质颗粒分泌黏多
15、糖形成保护层（透明膜） 阻止第二个精子入卵 避免多精子受精,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,55,透明带反应（zona reaction）皮质颗粒分泌的类胰蛋白酶破坏精子特异受体改变了透明带的性质防止精子的穿入,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,56,4、原核形成（pronucleus formation）雄原核形成头部膨大核疏松，核膜消失形成新核膜,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,57,雌原核形成 卵细胞第二次减数分裂：精子入卵不久 卵细胞：形成雌原核 体积不断增大：16-18倍 雄、雌原核：同时发育,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,58,5配子配合（syngame）雄、雌原核充分发育卵子的核仁、核膜消失两原核紧密接触，迅速收缩染色体重组，形成合子（单细胞胚胎）,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,59,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,60,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,61,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,62,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,63,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,64,多精入卵受精如：鸟类、爬行类等 单精受精如：哺乳动物,18.10.8,华中农业大学动物科技学院,65,五、异常受精,
