（课件）尿液及体液一般检查

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1、尿液及体液一般检查,上海交通大学医学院 胡晓波 副教授,(一)尿液标本的种类kinds of urine specimens,1首次晨尿morning urine 2随机尿random urine 3餐后尿postprandial urine 4定时尿timed urine,尿液标本的保存与防腐 storage and antisepsis of urine specimens,1冷藏refrigeration 2. 防腐antisepsis,尿液的理学检查 urine physical examination：,尿量volume 颜色colourh混浊度turbidity 气味odour,尿

2、量urine volume,多尿polyuria 少尿oliguria 无尿anuria,尿色urine color,正常尿液的颜色 红色 浓茶色、振荡后有黄色泡末 棕黑色 乳白色,气味odor,正常尿液 新鲜排出的尿液有氨臭味 烂苹果味 大蒜臭味 腐臭味 老鼠尿样臭味,尿液化学检查 urine chemical examination,干化学尿液分析仪的发展史,1956年，美国Ames和Lilly两家公司几乎同时创建了测定尿糖的Clinistix和TesTape试剂带。 1957年，美国Ames推出测定尿液蛋白Albustix试剂带。 1958年，推出尿糖和尿蛋白的二联Uristix试剂带，

3、次年有推出尿糖、尿蛋白、和尿pH的三联Combistix试剂带。Multistix试剂带。 20世纪70年代，半自动尿液分析仪,按测试项目分类,8项尿液分析仪 尿蛋白、尿糖、尿pH、尿酮体、尿胆红素、尿胆原、尿潜血和尿亚硝酸盐 9项尿液分析仪 尿白细胞 10项尿液分析仪 尿比重 11项尿液分析仪 颜色或维生素C 12项尿液分析仪 颜色和浊度,尿液分析仪原理,尿液pH试带法：酸碱指示剂法，测试模块中含有甲基红（pH4.66.2)和溴麝香草酚蓝（pH6.07.6)，两种酸碱指示剂适量配合可反映尿pH5.09.0的变异范围。,肾功能 食物 生理活动 药物 疾病,常见影响尿液pH的因素,尿比重（比密）

4、称重法、浮标法、折射计法试带法多聚电解质（甲乙烯稀酸酰马来酐）含有随尿标本中离子浓度而解离的酸性基团，离子浓度越多，酸性基团（氢离子浓度）解离越多，而使模块中的pH改变，这种改变可由模块中的酸碱指示剂变化显现出来,pH6.27.0 比密的变化范围在1.0001.030 蛋白质浓度增加使比密结果增加,尿胆红素,试带法在强酸的介质中直接胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应生成红色的复和物。,尿胆原,试带法： 在强酸性条件下，尿胆原与对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应，生成樱红色缩合物，模块发生从黄色到红色的颜色变化。 在强酸条件下尿胆原和对-甲氧基重氮四氟化硼发生重氮盐偶联反应，生成胭脂红色化合物。,尿液

5、pH 胆红素的形成量 肝细胞功能 胆道梗阻,尿 液胆红素 尿胆原正 常 阴性 少量 肝前性黄疸 阴性 显著增加 肝原性黄疸 阳性 轻度增加 肝后性黄疸 阳性 减少或无,葡萄糖glucosereference interval定性：阴性定量：2.78mmol/L,尿中是否出现葡萄糖取决于三个因素： 动脉血液中葡萄糖浓度 每分钟流经肾小球的血浆量 近端肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的能力,摄食性糖尿、神经、精神性糖尿,糖尿,葡萄糖尿,非葡萄糖尿,生理性糖尿,病理性糖尿,妊娠期糖尿,真性糖尿病,胰岛外性糖尿,肾性糖尿,胰岛外性高 血糖性糖尿,半乳糖尿 果糖尿 戊糖尿 其他糖尿,尿糖定性试验,1.班氏法（

6、Benedict法）含有醛基的葡萄糖，在高热及碱性溶液中能将蓝色的硫酸铜还原为黄色的氢氧化亚铜及红色氧化亚铜，出现黄色至砖红色沉淀物。,加班氏试剂1ml,加热,取尿液0.1ml加入上述试剂中,再加热,冷却,判断结果,尿糖定性结果判断: 实验结果 结果判断 相当含量（g/L） 仍呈蓝色 - 蓝绿色，无沉淀 0.1 绿色，有少量 + 0.10.5 绿黄色沉淀 黄绿色，有较多 + 0.51.0 沉淀 土黄色，有大量 + 1.02.0 沉淀 砖红色沉淀，上 + 2.0 清液无色,2.试带法：试带模块中主要含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和色源及其他物质。葡萄糖氧化酶（ glucose oxidase ,G

7、OD）作用于尿液中葡萄糖，使其形成葡萄糖醛酸和过氧化氢（H2O2），后者在过氧化氢酶（POD）的催化释放出O，后者使色源呈现不同的颜色变化。,蛋白质protein reference interval 定性：阴性定量：0.1g/L,尿蛋白,血浆蛋白,组织蛋白,肾小球性,肾小管性,混合性,溢出性,组织性,泌尿系统、泌尿外系统,肾病综合征、肾病性蛋白尿,原发、继发肾小球疾病,肾小管间质病变、中毒性肾病,浆细胞病、血管内溶血、肌肉损伤,肾脏疾病、炎症、中毒、泌尿道结石,泌尿道、生殖道炎症、出血、排泌物污染,尿蛋白定性,1.磺柳酸法:在酸性条件下，磺基水杨酸的阴离子和蛋白氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋

8、白盐沉淀。,敏感度 0.050.1g/LNCCLS将其定为干化学检查蛋白的参考方法，并推荐为检查尿蛋白的确证试验。,加磺硫酸2滴,实验结果 结果判断 相当含量（g/L） 清晰透明无 - 0 改变 黑色背景下， 0.1 极轻度混浊 明显白色混浊， + 0.10.5 但无颗粒 明显混浊， + 0.52.0 出现颗粒 大量絮状沉淀 + 2.05.0 但无凝块 严重混浊， + 5.0 有大凝块,2.加热醋酸法加热煮沸使蛋白变性、凝固，然后加酸使尿液pH接近尿蛋白质等电点，在含有适量无机盐状况下，蛋白质更易于变性沉淀。,3.试带法pH指示剂的蛋白误差原理蛋白质具有两性离子的电荷性，在溶液中，能被指示剂相

9、反电荷的静电吸引，而生成蛋白指示剂复合物，引起指示剂的进一步电离，从而使其所显示的pH颜色发生转变，这种色泽变化的差别，与蛋白质的含量成正比。,试带法影响因素： 尿液pH值 尿液所含蛋白成分 尿液中的干扰物 尿液存放的时间及污染,隐血试带法：尿液中的血红蛋白或其破坏释放的游离血红蛋白均含有亚铁血红素，后者具有过氧化物酶样活性，可使过氧化物分解释放出新生态氧O，O能使无色的邻甲联苯胺变成蓝色。,2.试带法： 亚硝基铁氰化钠，在碱性条件下可与尿液中的乙酰乙酸、丙酮起反应，呈现紫色。,尿液必须新鲜，及时送检 不同病程酮体成分的变化会给检测结果带来差异。,尿酮体,1.湿化学法：,尿亚硝酸盐试带法：当尿

10、液中有大肠埃希氏菌增加时，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐，其可将模中的氨基磺胺重氮化而成重氮盐，后者与1，2，3，4-四氢并喹啉-3偶联，使模块产生红色，借以诊断患者是否被肠杆菌科细胞感染。,尿路感染的病原微生物种类 体内适量硝酸盐的存在 尿液标本留取的时间 药物的影响,菌尿症常见微生物及致病率,白细胞计数试带法：中性粒细胞胞浆中含有的酯酶作用于模块中吲哚酚酯，使其产生吲哚酚，后者与重氮盐反应形成紫色化合物，其颜色的深浅与细胞的多少呈比例关系。,维生素C试带法：VitC在酸性条件下使染料还原，模块颜色发生改变。,血红蛋白、胆红素、葡萄糖、亚硝酸盐,尿液分析试纸,项目 缩写符号 反应原理 酸碱度 pH

11、 pH指示剂 蛋白质 PRO pH指示剂的蛋白质误差法 葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶法 隐血 BLD 血红蛋白类过氧化物酶法 胆红素 BIL 偶氮反应法 尿胆原 URO 醛反应法、重氮反应法 酮体 KET 硝基铁氰化钠法 亚硝酸 NIT 亚硝酸盐还原法 白细胞 LEU 酯酶法 比密 d（SG） 多聚电解质离子解离法 抗坏血酸 ASG 还原法,提出尿液干化学分析仪筛检的标准：当干化学尿液试带质量合格、尿液分析仪运转正常情况下，试验结果中白细胞、红细胞、蛋白及亚硝酸盐全部为阴性时，可以免去显微镜检查。,干化学过筛适用范围的局限性,肾科和泌尿科病人的尿液不适合于干化学过筛显微镜检查。 以镜检结果作为

12、诊断依据或疗效观察时，不宜使用干化学方法作为过筛。 要结合临床表现判断结果。不可只看干化学分析，忽视镜检。 尿液的外观与尿沉渣有一定的相关性。当尿液外观异常时，应注意显微镜检查。 干化学试剂带的质量、稳定性及质量控制与过筛的准确性密切相关。,组合型试带,肾病型四联试带：pH、蛋白、隐血、比密 糖尿病型五联试带：pH、蛋白、葡萄糖、酮体、比密 肝脏病型二联试带：胆红素、尿胆原,结果分析：,（二）尿标本制备prepare of urine specimen：,1.离心centrifugation 离心10ml尿（离心管）水平离心机有效半径为15cm，相对离心力为378G1500转5分钟,弃上清液，

13、取剩余约0.2ml混匀,吸取混匀液0.02ml于载玻片上,盖片（18*18mm或22*22mm），防止产生气泡,低倍镜下：全片观察，计数管型（20个视野）高倍镜下：细胞计数、复查管型、结晶（10个视野）,2.不离心not centrifugate3.染色 stain,二尿细胞成分检查及临床意义 urinary cell element examination and clinic significance,（一）红细胞red cell,参考值reference interval：混匀一滴尿 0偶见/高倍视野 离心尿 03个/高倍视野,1.量quantity,肉眼血尿：如果每100ml尿液中含有

14、0.1ml以上的血液时，肉眼能看到不同程度的浑浊红色，称为肉眼血尿。Visual hematuria:Excretion of urine containing blood, which can be demonstrated by eyes. Usually RBCs are more than 50/HPF by the microscope.,显微镜血尿microscopic hematuria：100ml尿液中含有0.1ml以下的血液，肉眼看不见，只有通过显微镜才能发现，称显微镜血尿。Microscopic hematuria:Excretion of urine containing blood, which can be demonstrated only by the microscope and usually equal or more than 3/HPF.,