石蜡包埋步骤

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石蜡包埋步骤_第1页
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1、石蜡包埋步骤石蜡包埋步骤1 1 组织脱水、渗透与包埋组织脱水、渗透与包埋脱水:脱水:1 150% 乙醇(90min)70% 乙醇(90min)85%乙醇(90min) 95%乙醇 (90min)100%乙醇(60min)100%乙醇(60min)。注:注:若组织数量过多时,应分开脱水(若组织数量过多时,应分开脱水(20 个组织左右)个组织左右)1 1脱水的体积至少为组织提及的脱水的体积至少为组织提及的 4 倍倍2 2乙醇纯度越高时,脱水的时间减少,否则引起组织过硬乙醇纯度越高时,脱水的时间减少,否则引起组织过硬3 3最好能搅拌,使脱水充分最好能搅拌,使脱水充分4 4透明:透明:2 2 1/2

2、乙醇1/2 二甲苯 二甲苯 二甲苯,每步 60min。 注:在二甲苯的时间不宜过短或过长。时间过短引起透明不充分,影响后面渗注:在二甲苯的时间不宜过短或过长。时间过短引起透明不充分,影响后面渗 透包埋;时间过长则引起组织变脆。透包埋;时间过长则引起组织变脆。渗透:渗透:3 31/2 二甲苯1/2 石蜡(90min)石蜡 I (120min)石蜡 II(120min),62。 注:若出现从脱水到渗透时间太长,可在注:若出现从脱水到渗透时间太长,可在 1/21/2 二甲苯二甲苯1/21/2 石蜡或石蜡石蜡或石蜡 I 的步骤的步骤 停下停下,即将进入即将进入 1/21/2 二甲苯二甲苯1/21/2

3、石或石蜡石或石蜡 I 后,立即冷却,将组织封进里面,到第后,立即冷却,将组织封进里面,到第 二天复融;第二天融解时温度不能超过二天复融;第二天融解时温度不能超过 65,并且需到完全溶解时开始进入步骤,并且需到完全溶解时开始进入步骤 算时间。算时间。包埋:包埋:4 4 将组织放入盛有石蜡的模具中,摆好位置,于石蜡包埋机的冷台上冷却。 注:包埋时,切忌用手按石蜡盒中间,因为冷凝后,中间仍较软。注:包埋时,切忌用手按石蜡盒中间,因为冷凝后,中间仍较软。2 2 切片和贴片切片和贴片将包埋好的组织块于切片机中约 5m,放于漂片机中展开,再将切片捞于多聚 赖氨酸附膜载玻片上,编号,70干烤 1h,贴片后 60烤 5h。

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