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1、文件编号：YCXZYYJYK_SOP_02月亮县 中医院项 目页码：第- 1 -页，共 4 页 版本：第 3 版，第 1 次修订检验科样本采集与拒收样本采集与拒收 SOP生效日期：20180101编写者：张三三审核者：李四四批准者：李四四 时 间：20180101时 间：20180101时 间：20180101SOP_02-2SOP_02-2 院感样本采集标准操作程序院感样本采集标准操作程序1 检验项目 环境空气的监测、物体表面的监测、手和皮肤黏膜的监测、内镜的监测、医疗器械的监测、血液净化系统的监测、使用中消毒灭菌剂的监测、压力蒸汽灭菌器的监测等2 物品准备与检验申请2.1 领取标本容器。请
2、拿检验申请单到检验科登记领取。 领取容器表领取容器表标本及监测目的空气培养物体表面、手及皮肤黏膜监测内镜监测医疗器械(活检钳)监测血液净化系统监测使用中消毒剂监测压力蒸汽灭菌器监测所需容器营养琼脂平板含灭菌生理盐水的试管无菌试管含灭菌肉汤的试管无菌试管无菌试管自备2.2 填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括科别、标本类型及送检目的、送检时间。申请单上须注明采样具体部位、采集位点编号、标本性质等。如空气培养应注明是那个房间及那个点；物体表面应注明是何物品；手和皮肤应注明左手或右手；血液净化应注明是入口还是出口；使用中消毒液应注明属那类消毒液。3 标本采集方法3.1 空气监
3、测3.1.1 采样时间：在消毒处理后、进行医疗活动前进行采样3.1.2 采样方法：平板暴露法：室内面积30m2，设内、中、外对角线 3 点，内、外布点部位距墙壁 1m 处；室内面积30m2，设四角及中央 5 点，四角的布点部位均距墙壁1m。采样时将普通营养琼脂平板（直径 9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距地面 80-150cm。采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露 5min，盖好立即送检。注意：采样前关好门、窗，在无人走动的情况下，静止注意：采样前关好门、窗，在无人走动的情况下，静止 10min10min 进行采样。进行采样。3.2 物体表面监测3.2.1 采样时间：在消毒处理后 4h
4、 内进行采样。3.2.2 采样方法：被采样物体面积100cm2，应取全部物体表面；物体面积100cm2，则取100cm2。用 5cm5cm 的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子 1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦 5 次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4 个规格板面积，然后剪去或折去采样人手接触部位，将棉拭子投入装有 10ml 采样文件编号：YCXZYYJYK_SOP_02月亮县 中医院项 目页码：第- 2 -页，共 4 页 版本：第 3 版，第 1 次修订检验科样本采集与拒收样本采集与拒收 SOP生效日期：20180101编写者：张三三审核者：李四四批准者：李
5、四四 时 间：20180101时 间：20180101时 间：20180101液（含相应中和剂的磷酸缓冲液）的试管内送检。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。3.3 手和皮肤、黏膜监测3.3.1 采样时间：一般要求在接触病人、从事医疗、护理活动前进行采样。3.3.2 采样方法：（1） 、手的采样：被检人五指并拢，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子 1 支，在双手指屈面从指根到指端往返涂擦各 2 次（一只手涂擦面积约为 30cm2） ，并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入 10ml 含相应中和剂的采样液试管内送检。（2） 、皮肤粘膜采样：用 5cm5cm 的标准灭菌规格
6、板，放在被检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦 5 次，并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入 10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。不规则的皮肤黏膜用棉拭子直接涂擦采样。皮肤黏膜采样处，若表面不足 5cm5cm 可用相应面积的规格板采样。3.4 内镜监测3.4.1 采样时间：在消毒后使用前进行进行采样。3.4.2 采样方法：用无菌注射器抽取 10ml 含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用 15ml 无菌试管从活检出口收集，立即送检。3.5 医疗器械监测3.5.1 采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内进行采样
7、。3.5.2 采样方法：取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械 5 件直接浸入 6 管需-厌氧培养管（其中一管作阳性对照）与 4 管霉菌培养管。培养基用量为 15ml/管。（1）取 5 付注射器，在 5ml 洗脱液中反复抽吸 5 次，洗下管内细菌，混合后接种需-厌氧菌培养管（共 6 管，其中 1 管作阳性对照）与霉菌培养管（共 4 管） 。接种量：1ml注射器为 0.5ml，2ml 注射器为 1ml，5-10ml 注射器为 2ml，20-50ml 注射器为 5ml。培养基用量：接种量为 2ml 以下为 15ml/管，接种量 5ml 为 40ml/管。（2）手术钳、镊子等大件医疗器械取 2 件用蘸有
8、无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采样，将棉拭子投入 5ml 无菌洗脱液中，将采样液混匀，接种于需-厌氧培养管（共 6 管，其中1 管作阳性对照）与霉菌培养基（共 4 管） 。接种量为 1ml/管，培养基用量为 15ml/管。3.5.3 注意事项：送检时间不得超过 6h，若样品保存于 0-4，则不得超过 24h；被采样本面积100cm2 取全部面积，被采样本面积100cm2，取 100cm2；若消毒因子为化学文件编号：YCXZYYJYK_SOP_02月亮县 中医院项 目页码：第- 3 -页，共 4 页 版本：第 3 版，第 1 次修订检验科样本采集与拒收样本采集与拒收 SOP生效日期：20180101
9、编写者：张三三审核者：李四四批准者：李四四 时 间：20180101时 间：20180101时 间：20180101消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。3.6 血液净化系统监测3.6.1 采样时间：在透析用水和透析液制作好后即将进行透析前采样。3.6.2 采样方法：用无菌注射器吸取透析用水或透析液 2-5ml，放入无菌管中送检。3.7 使用中消毒剂、灭菌剂监测3.7.1 采样时间：更换前、使用中的消毒剂与灭菌剂3.7.2 采样方法：在无菌条件下，用无菌注射器抽吸 1ml 被检液加入 9ml 含相应中和剂的稀释液中混匀送检。3.8 压力蒸汽灭菌器监测3.8.1 采样时间：使用中的压力蒸汽灭菌器3.
10、8.2 采样方法：将 2 个自含式生物指示物分别装入灭菌小纸袋内，放于一标准测试包中心部位。预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器及下排气压力蒸汽灭菌器标准测试包均置于灭菌柜内排气口上方。手提压力蒸汽灭菌器将储物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。经1 个灭菌周期后，取出标准试验包或储物盒中的自含式生物指示菌片，将安瓿折断或挤破，让管内溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基玉嗜热脂肪杆菌芽胞菌片融为一体，与 1 支阳性对照管一起送细菌室。附：1 各类环境中空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数卫生标准环 境 类 别范围空气 菌落总数(cfu/m)物体表面 菌落总数(cfu/m)医护人员 手菌落总 数(cfu/m)空
11、气、物 表、医护 人员手致 病菌 类层流洁净手术室、层流洁净病房1055不得检出 类普通手术室、产房、婴儿室、早产儿 室、普通保护性隔离室、供应室无菌 区、烧伤病房、重症监护病房20055不得检出 类儿科病房、妇产科检查室、注射室、 换药室、治疗室、供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间5001010不得检出 类传染病科及急诊1515不得检出注：（1）、空气和物体表面的致病菌是指金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌。文件编号：YCXZYYJYK_SOP_02月亮县 中医院项 目页码：第- 4 -页，共 4 页 版本：第 3 版，第 1 次修订检验科样本采集与拒收样本采集与拒收 SOP生效日
12、期：20180101编写者：张三三审核者：李四四批准者：李四四 时 间：20180101时 间：20180101时 间：20180101（2）、医护人员手的致病菌：、类区域致病菌指金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、 铜绿假单胞菌；、类区域致病菌指金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌。 （3）、母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门 菌。 （4）、母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房医务人员手上，不得检出 沙门菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌。2 内镜、医疗器械、血液净化系统、消毒灭菌剂、压力蒸汽灭菌器细菌菌落总数卫生标准类别执行标准内镜消毒后内镜：20cfu
13、/件，不能检出致病菌；灭菌后内镜：无细菌生长医疗器械进入人体：无细菌生长；接触黏膜：20cfu/100cm，致病微生物不得检 出；接触皮肤：200cfu/100cm，致病微生物不得检出血液净化系统透析用水：200cfu/ml；透析液：2000cfu/ml，不得检出致病菌消毒灭菌剂消毒剂：100cfu/ml，不能检出致病菌；灭菌剂：无细菌生长压力蒸汽灭菌器阳性对照：阳性，监测结果：阴性3 层流手术室空气监测3.1 采样时间： 级洁净手术室和洁净辅助用房检测前，系统应已经运行 15min，其他洁净房间应已运 行 40min。 3.2 采样方法：平板暴露法：用直径 90mm 培养皿在空气中暴露 30min，盖好后送检。 3.3 层流手术室空气监测细菌菌落数卫生标准执行标准（个/30min）环境类 别手术区周边区类0.20.4类0.751.5类24类55
