复习题(仪器分析)

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1、1分子光谱:由分子的吸收或发光所形成的光谱称为分子光谱（molecular spectrum），分 子光谱是带状光谱。 2分子荧光分析: 某些物质被紫外光照射激发到单重激发态后，在回到基态的过程中发射出比原 激发波长更长的荧光，通过测量荧光强度进行定量分析的方法。 3气相干扰： 是指干扰发生在气相过程中（如电离干扰、激发干扰）以气相化学反应引起的 干扰。 4LP-PCR： 利用同位素、荧光素等对引物进行标记，用以直观地检测目的基因。 5毛细管电泳: 是指离子或带电粒子以毛细管为分离室,以高压直流电场为驱动力,依据样品中 各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的液相分离分析技术。 6红外吸收

2、光谱： 又称为分子振动转动光谱。当样品受到频率连续变化的红外光照射时，分子 吸收了某些频率的辐射，并由其振动或转动运动引起偶极矩的净变化，产生分 子振动和转动能级从基态到激发态的跃迁，使相应于这些吸收区域的透射光强 度减弱。 7Fermi 共振： 当一振动的倍频与另一振动的基频接近时，由于发生相互作用而产生很强的吸 收峰或发生裂分。 8荧光发射： 电子由第一激发单重态的最低振动能级基态（ 多为 S1 S0 跃迁），发射 波长为2 的荧光； 10-710 -9 s 。9原子光谱: 原子的电子运动状态发生变化时发射或吸收的有特定频率的电磁 频谱.原子光谱是一些线状光谱,发射谱是一些明亮的细线,吸收

3、谱是一些暗线.10分子吸收光谱:分子对辐射选择性吸收使基态分子跃迁至更高能级的激发态 而发出的特征光谱为分子吸收光谱.11内转化：处于相同的重态的两个离子间的非辐射跃迁.12宽带吸收： 是用紫外可见分光光度法测量溶液中分子或离子的吸收，吸收宽带宽从几纳米 到几十纳米，是用的是连续光源，这种测量方法叫13塔板理论： 在每一块踏板上，被分离柱分在气液两相间瞬时达到一次分配平衡，然后随载 气从一块踏板以脉动式迁移，经过多次分配平衡后，分配系数小的组分先离开 精馏塔，分配系数大的后离开，从而使分配系数不同的组分分离。14高效液相色谱法：是一种新型分离分析技术，它是在经典的液相色谱基础上，引入气象色谱理

4、论， 在技术上采用高压输液泵，梯度洗脱技术，新型高效填充剂以及各种高灵敏度 检测器。15化学发光反应：在化学反应过程中，某些化合物接受能量而被激发，从激发态返回基态时， 发射出一定波长的光。16超临界流体色谱： 是以超临界流体作为流动相的色谱方法，是 20 世纪 80 年代以来发展迅速的一 个色谱分支，所谓超临界流体，是指在高于临界压力和临界温度时的一种物质 状态。17原子光谱： 由原子的吸收或发射所形成的光谱称为原子光谱18振动弛豫： 同一电子能级内以热能量交换形式由高振动能级至低相邻振动能级间的跃迁。 发生振动弛豫的时间 10 -12 s。19内转换： 同多重度电子能级中,等能级间的无辐射

5、能级交换。通过内转换和振动弛豫，高 激发单重态的电子跃回第一激发单重态的最低振动能级。20紫外可见吸收光谱:利用物质的分子或离子对紫外和可见光的吸收所产生的紫外可见光谱及吸收程 度对物质的组成、含量和结构进行分析、测定、推断的分析方法。21分子发光: 基态分子受到能量激发，吸收了一定能量后，跃迁至激发态，激发态分子在很 短时间内以辐射跃迁（发光）形式释放能量并返回基态，便产生了分子发光。22化学干扰： 是指在凝相或气相中，任何导致待测元素离解成基态原子发生变化的化学反应。23电泳技术： 电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带 电荷相反的电极移动的现

6、象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫 做电泳技术（electrophoresis technique）。24高效液相色谱法:以气相色谱为基础，在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法。25电渗流： 毛细管内壁表面的电荷所引起的管内液体的整体流动，来源于外加电场对管壁 溶液双电层的作用26生物传感器： 通常是指由一种生物敏感部件和转化器紧密结合,对特定种类化学物质或生物活 性物质具有选择性和可逆响应的分析装置。27电磁波谱： 按照波长的大小顺序排列可得到电磁波谱，不同的波长属不同的波谱区，对应 有不同的光子能量和不同的能级跃迁。二、填空题（每空 1 分，共 26 分） 1、色

7、谱分析法是利用各待测组分在互不相溶的两相中的吸附、分配、离子交换、 排斥渗透等性质方面的不同而进行分离和分析的方法。2 、通常情况下，样品池需要放在盛液氮的石英杜瓦瓶内，来测定低温磷光。3 、消除物理干扰的最常用方法是配制与被测组成相似的标准溶液。当试液组 成不完全知道时，也可用标准加入法来消除物理干扰。4 、凝胶电泳是由琼脂、琼脂糖、淀粉胶及聚丙烯酰胺等物质作支持体的电泳。5 . PAG 孔径的大小主要由 Acr 和 Bis 这两种单体的浓度决定。可以根据要 分离物质分子的大小，选择合适的单体浓度。6 、根据生物传感器中生物分子识别元件上的敏感材料可分为酶传感器、微生物传感器、 免疫传感器、

8、组织传感器、基因传感器、细胞及细胞器传感器。 7 、原子吸收光谱分析中的主要干扰因素是化学干扰 8 、原子吸收分光光度法是基于从光源辐射出待测元素的特征谱线的光，通过 样品的蒸气时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收 9 、原子吸收分光光度计常用的光源是空心阴极灯10 、被测元素在火焰中与氧形成难离解的氧化物。这是气相干扰的情况。 14 、PAG 是由丙烯酰胺（acrylamide，Acr）单体和 N，N-亚甲双丙烯酰胺 （N，N，N，N-methylene bixacrylamide，Bis）交联剂通过自由基聚合而成的一种多 孔三维网状结构。 15 . 根据生物传感器的信号转换器可分为电化学生

9、物传感器、半导体生物传感器、测热 型生物传感器、测光型生物传感器、测声型生物传感器等 16 、紫外可见分光光度法的适合检测波长范围是 200760nm 17 、在光学分析法中, 采用钨灯作光源的是可见光谱 18 、人眼能感觉到的光称为可见光，其波长范围是 400760nm19 、吸光度为 0.20.7 时，相对误差较小。 20 、原子吸收光谱是线状光谱21、仪器分析以物质的某些物理或物理化学性质（光、电、热、磁等）为基础，并借助于 特殊的仪器，对待测物质进行定性、定量及结构分析和动态分析的一类方法。 12 、根据激发方式不同，分子发光可分为光致发光、热致发光、场致发光和化学发光等。 其中，光致

10、发光根据激发态不同可分为荧光和磷光两种。 15 . 临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维素薄膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双 向电泳和毛细管电泳等。 16 、电泳技术优点：快速、准确、重现性好。 18 、按被测物质对辐射吸收的检测方法差别（明背景下测吸收暗线或暗背景下测共振明线） 分为：吸收光谱与共振波谱。 19 、某些物质被紫外光照射激发到单重激发态后，在回到基态的过程中发射出比原激发波 长更长的荧光，通过测量荧光强度进行定量分析的方法。 三、简答题三、简答题 1、比较紫外、比较紫外-可见分光光度计与可见分光光度计有什么不同可见分光光度计与可见分光光度计有什么不同? (1)区别是测定波长范

11、围不同,紫外一般用氢灯,测定波长范围 180-350nm，可见一般用钨灯， 测定波长范围 320-1000nm.所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以更换光源，能 够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物，发现吸光度超过 2，便不再显示，是正常现 象。 吸光度是透光率的负对数，吸光度超过 2 就是说透光率小于 1%，低于仪器的检出限，就 不再显示了，至于能不能用分光光度计，取决于你测定的波长。2、简述蛋白质电泳技术基本原理及其应用、简述蛋白质电泳技术基本原理及其应用? 聚丙烯凝胶电泳：是利用聚丙烯凝胶为介质来对蛋白质进行分离。一般制成凝胶柱或 凝胶板凝胶是由两部分组成。这两部分凝胶的浓度、蝗

12、虫也组分和例子强度、PH 以及电场 强度都是不同的，即不连续，这样电泳对样品首先在不连续的两相间积聚浓缩而成很薄的 起始区带，然后再进行电泳分离。3、哪些测定条件影响原子吸收光谱分析的灵敏度、哪些测定条件影响原子吸收光谱分析的灵敏度?A、物理干扰：由于试液和标准溶液的物理性质的差异，引起进样速度，晋阳两，原子化效率所产生的干扰。B、化学干扰：由于待测元素与共存组分发生了化学反应，生成了难挥发或难竭力的化合物，使基态原子数目减少所产生的干扰。C、电离干扰：某些易电离元素在火焰中产生电离，是基态原子数减少，降低了元素测定的灵敏度。D、光谱干扰：抓哟有谱线干扰和背景干扰。 4、说明原子吸收光谱仪的主

13、要组成部件及其作用、说明原子吸收光谱仪的主要组成部件及其作用? （1）锐线光源：作用是发射谱线宽度很窄的元素共振线； （2）原子化器：将试样蒸发并使待测元素转化为基态原子蒸气； （3）分光系统：分为两部分；即外光路和单色器。外光路的作用是使锐线光源辐射的共振 发射线能正确的通过或聚焦于原子化区，并把透过光聚焦于单色器的入射狭缝。单色器是 将待测元素的吸收线与领近谱线分开； （4）检测系统：作用是将待测光信号转换成电信号，经过检波放大，数据处理后显示结果。（5）同步调制系统。 5、简要说明气相色谱法的分离原理、简要说明气相色谱法的分离原理?气相：气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在

14、不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。 21、导数光谱法主要优点？ 1.可分辨两个或两个以上重叠光谱，只要光谱的吸收峰有一定的距离，或吸收峰虽完全重 叠，但峰宽不同，导数光谱均可分离； 2.可从强吸收光谱陡峭处，辨认另一组分的弱吸收峰； 3.可从宽大吸收带中精确确定最大吸收波长； 4.可消除浑浊背景和干扰吸收的影响，提高选择性； 5.解决多组分同时测定问题。22、生物发光分析? 1. 灵敏度极高例：荧光素酶和磷酸三腺甙(ATP)的化学发光分析，可测定 210-17。Mol/L

15、 的 ATP，即可检测出一个细菌中的 ATP 含量 2. 仪器设备简单 不需要光源、单色器和背景校正； 3. 发射光强度测量无干扰 无背景光、散射光等干扰； 4. 线性范围宽 5. 分析速度快 缺点：可供发光用的试剂少；发光反应效率低（大大低于生物体中的发光）；机理研究少。24、双向凝胶电泳（二维电泳）？第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的 PI 的不同，将蛋白质 进行分离。第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳 （SDS-PAGE）就是按蛋白质 分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状 。 25、确证性测序、从头序列序列分析的目的？1

16、、确证性测序 通过测定对突变进行定位和鉴定，应用时测定野生型基因上同 源区和突变体的相应序列直接在一张胶片上比较二者序列差异。（已知基因序列）2、从头序列 目的是提供一段 DNA 准确的核苷酸序列。（未知基因序列） .26、PAGE 的 特 点? 1.具有分子筛效应，分辨率高 2.样品不易扩散，用量少，灵敏度可达 10-6g 3.化学性质稳定，分子结构中富含酰胺基具有稳定的亲水基团 4.凝胶不带电荷，消除了电渗现象 5.机械强度好，有弹性，在一定浓度范围内无色透明 6.网孔可调节 27、超临界流体的特性? 对于某些纯物质来说，具有三相点和临界点，如图所示，从图中可以看出，物质在三相点，气、液、固三态处于平衡状态，当处于临界温度和临界压力以上时，则不论施加多大压力， 气体也不会液化，此时即非气体，也非液体，而是以超临界流体形式存在。 21、紫外可见分光光度计基本原理? 基于物质光化学性质而建立起来的分析方法称之为光化学分析法。 分为:光谱分析法和非