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1、22.2 动物细胞融合与单克隆抗体,太空婚礼,2002年月日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”电融合仪内孕育新生命。一段时间后，我国首批”太空娃娃”终于顺利诞生。对照实验结果表明，细胞融合率大大提高。,“太空婚礼”,神舟放飞强国梦,“太空婚礼”科研项目一：,“太空婚礼”科研项目二：,你能主持“太空婚礼”中的科研项目吗？,挑战自我,植物体细胞杂交技术,动物细胞融合技术,知识回顾 植物体细胞杂交过程,植物细胞 A（番茄）,植物细胞 B（马铃薯）,去
2、除细胞壁,原生质体 A,原生质体 B,原生质体融合,正在融合的原生质体,再生出细胞壁,杂种细胞,脱分化,愈伤组织,杂种植株(番茄马铃薯),再分化,1.动物细胞融合的概念 2.动物细胞融合的原理 3.诱导动物细胞融合的方法 4.动物细胞融合的意义和应用,任务：阅读教材第52页 时间：2分钟 问题：,一、动物细胞融合,1.概念：,动物细胞融合:也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。,2、原理：,细胞膜的流动性,3.诱导方法：,物理方法：,化学法：,生物法：,灭活的病毒,电激等,聚乙二醇（PEG),灭活是指用
3、物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。,4.意义：,突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。,5.应用：,最重要的用途是制备 单克隆抗体,主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法,（同左）,灭活的病毒,物理（离心、振动、电刺激）,化学（聚乙二醇）,诱导方法,使细胞分散后诱,导细胞融合,去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物、动物细胞融合的比较,20世纪90年代初，英国科学家成功地利用“生物导弹”
4、单克隆抗体瞄准并杀死了癌细胞，使患血癌的一名67岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失了。被称为“生物导弹”的单克隆抗体，能够跟踪和杀死细菌、病毒或癌细胞。,1传统抗体的获得方法、特点 2单克隆抗体的制备过程 3单克隆抗体的应用、优点 4. 单克隆抗体的概念,任务：阅读教材第52页54页 时间：5分钟 问题：,2、什么是抗体？,二、单克隆抗体,回顾,3、抗体的分布？,抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。,主要分布在血清中。,1、什么是克隆？,“克隆”从英文“clone”音译而来，是指从一个共同祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DN
5、A分子，细胞或个体。在细胞水平指动物细胞培养.,4传统抗体的获得 (1)方法：向动物体内反复注射某种_，使动物产生_；从动物_中分离所需抗体。 (2)特点：_、纯度低、_差。,抗原,抗体,血清,产量低,特异性,B淋巴细胞特点,每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。,B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。,动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。,1、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？,不可能,2、我们学过的什么细胞具有这样的能力？,癌细胞,3、有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？,细胞融合,生产单克隆抗体思路,一个B淋巴细胞只分
6、泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交细胞,既能产生特异性抗体，又能大量繁殖,B淋巴细胞,注射特定抗原蛋白,骨髓瘤细胞,培养骨髓瘤细胞,融合,（只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？融合细胞几种类型？,骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞 B淋巴细胞- B淋巴细胞 B淋巴细胞-骨髓瘤细胞,多种杂交细胞,在具有筛选作用的培养基上培养,专一抗体检验阳性,克隆上述杂交细胞,分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞,单克隆抗体,注射到小鼠体内,体外培养,5、单克隆抗体的制备过程,第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。,第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。,该细胞继承双亲
7、细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。,杂交瘤细胞有何特点？,特异性强，灵敏度高,免疫小鼠,培养骨髓瘤细胞,融合,骨髓瘤细胞,B淋巴细胞,注射特定抗原蛋白,选择培养基上培养,专一抗体检验阳性,专一抗体检验阳性,注射到小鼠体内,体外培养,单克隆抗体,克隆杂交细胞,分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞,多种杂交细胞,杂交瘤细胞有何特点？,本过程利用的那些技术？,动物细胞融合技术 动物细胞培养技术,是否注射抗原,（只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？几种融合细胞？,两次筛选的目的分别是什么？,2、单克隆抗体制备过程,与传统制备的抗体相比具有什么特点？,5单克隆抗体的制备,脾,骨髓
8、瘤细胞,B淋巴细胞,杂交瘤细胞,增殖,产生抗体,克隆化,抗体,体外培养,小鼠腹腔,细胞培养液,腹水,1、（只考虑两两融合）融合细胞几种类型？2、本过程中进行了两次筛选，目的分别是什 么？第1次筛选要淘汰哪些细胞？3、杂交瘤细胞有何特点？,骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞 B淋巴细胞- B淋巴细胞 B淋巴细胞-骨髓瘤细胞,该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。,第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞,第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。,4.在制备单克隆抗体的过程中，选用哪两种细胞进行融合？为什么选择这两种细胞？,浆细胞和骨髓瘤细胞 浆细胞能产生单一抗体，但不能无
9、限增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生单一抗体。,究,探,作,合,6单克隆抗体的应用 (1)优点：_、_、产量大。 (2)应用 作为诊断试剂，具有准确、_、简易、_的优点。 用于_和_。,特异性强,灵敏度高,高效,快速,治疗疾病,运载药物,生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）,7.概括单克隆抗体的概念,单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体,1 动物细胞融合技术的原理、过程、概念、应用 2 单克隆抗体的制备过程及应用,1、(2011年滦县高二检测)能使动物细胞融合的特有的诱导因素是( ) A离心 B灭活的病毒 C电激 D振动,B,2、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，
10、得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞,A,3、“生物导弹”是指 A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物,D,4、动物细胞融合技术最重要的用途是 A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞,B,A 、 B细胞为动物细胞,请据图回答问题:,A细胞,B细胞,C细胞,D细胞,(1)若A细胞为骨髓瘤细胞B细胞为淋巴细胞,那么D细胞称为 细胞,D细胞具有两个亲本细胞的特征,一方面因具有骨
11、髓瘤细胞的 性质,通过 方式产生大量细胞,我们称之为 过程;另一方面能分泌大量的抗体,我们把该过程分泌的抗体称 .,杂交瘤,有丝分裂,无限增殖,单克隆,单克隆抗体,练一练,(2)D细胞中产生的抗体其化学本质是 ,合成该物质的场所是 ,它是由控制合成的,合成过程包括和 两个重要步骤.,球蛋白,核糖体,基因,转录,翻译,(3)D细胞中产生的抗体具有 作用,与血清抗体相比其优越之处在于 强高.,免疫,特异性,灵敏度,1.右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案,制备单克隆抗体,不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞。,(1).该实验方案的目的是：_,(2).该方案能达到预期效果吗？为什么？,(3).A是从小鼠的脾脏中取得_ 该细胞能够产生_ 。,(4).图中B为_过程，常用_作为诱导剂，该细胞继承_的遗传特性，既能_ ,又能_。,B淋巴细胞,抗体,细胞融合,灭活的病毒,双亲细胞,产生专一抗体,无限增殖,(5)._ 技术是单克隆抗体的技术支持。,动物细胞培养,（6）单克隆抗体的特点 _，并可大量制备。,特异性强，灵敏度高,1 完成练习册习题 2 总结本章知识体系,
