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1、医院感染监测技术与方法,福建省第二人民医院 蚁少华,医院感染监测：,长期、系统、连续地收集、分析医院感染在一定人群中的发生、分布及其影响因素，并将监测结果报送和反馈给有关部门和科室，为医院感染的预防、控制和管理提供科学依据。 医院感染监测，一般包括人和环境两面，对人的监测可分为对病人和工作人员；对环境的监测，通常包括空气、物表、手卫生、仪器设备、消毒、灭菌效果等监测。,一、监测依据,监测的目的,是为了控制感染。揭示医院感染的发生、发展规律及医院感染管理的现状，为控制医院感染提供依据、方向和途径。 不以控制为目的监测是无意义的监测，不以监测为依据的控制是盲目的控制。,医院消毒是预防医院内感染的重
2、要措施之一，消毒效果的监测是评价其消毒设备、消毒药剂、消毒方法、消毒效果是否达标的唯一手段。,监测人员需经过专业培训。 掌握一定的消毒知识，熟悉消毒设备和药剂性能，具备熟练的检验技能。 选择合理的采样时间。 遵循严格的无菌操作。,医院消毒效果监测时需遵循以下原则：,二、监测要点,医院感染的监测方法,必须开展医院感染监测 发病率、多发部位与科室 高危因素 病原体及耐药性 应采取全院综合性、目标性监测方法 每月汇总分析、每季汇报反馈、每年评估 漏报率调查与病原学耐药性监测,监测内容:1.医院感染病例监测（医院感染发病率、医院感染罹患率 、漏报率）2.对医院内部日常监测检查（规章制度、报告、检验单、
3、学习培训等）,几种重要部位医院感染的预防控制,外科手术部位感染预防与控制 导管相关血流感染预防与控制 导尿管相关尿路感染预防与控制 多重耐药菌（MDRO）医院感染预防与控制,3. 消毒/灭菌效果监测消毒/灭菌物品监测：消毒物品不得检出致病性微生物，灭菌物品不得检出任何微生物。 使用中的消毒剂/灭菌剂：进行生物和化学监测。 压力蒸汽灭菌器：进行工艺监测、化学监测和生物监测。 紫外线消毒：紫外灯管照射强度监测。 血液净化系统：透析入口液、透析出口液监测、B液、热源监测等。,4. 环境卫生学监测:重点部门（对手术室、重症监护病房/室（ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植病房、血液病房、血液透
4、析室、供应室无菌间、治疗室、换药室等） 空气消毒效果的监测 物体表面消毒效果的监测 医护人员手消毒效果的监测,三、监测采样,空气采样:,采样时间:消毒处理后与进行医疗活动之前这段时间内采样。 布点方法：高度：与地面垂直高度150cm布点数：室内面积30m2，取室内一条对角线上的3点（中心一点，两端各距墙1m两点）；室内面积 30m2，取五点（中心一点，东、西、南、北均距墙1m的四点）。,采样方法： 一般用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5分钟后送检培养。注意事项： 采样平板直径不同，以后计算公式代入值不同。 平板摆放如取一条对角线，避免离门近的一条。 采样前，不要有人员在室内走动，关闭门
5、窗，至少静态10分钟以后再采。 工作人员不要靠近自动门，以免影响监测结果。,物体表面采样：,采样时间： 消毒处理后4小时内进行采样。 采样面积： 被采表面 100cm2,取全部表面； 被采表面 100cm2,取100cm2。,采样方法： 用5cm5cm的标准灭菌规格版，放在被检物体表面，用浸有无菌采样液的棉拭子，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，去掉手接触部分，将棉拭子放入10ml采样液的试管中送检。 门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。,5cm,横竖来回各五次,注意事项： 规格板要干热法灭菌处理。 不规则物体表面的采样，尽量准确估算实
6、际面积。,医护人员手采样,采样时间： 消毒后从事诊疗操作前进行采样。 采样方法： 被检人五指并拢，手心向上。将浸有采样液的棉拭子从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积按30cm2计算），并随之转动采样棉拭子，去掉手接触部位，装入试管内送检。,注意事项： 不同的洗手法，标准要求不同。 双手都要采样。 洗手后不要接触未消毒的物品。 用消毒巾擦干，或控干手上的水分。,医疗用品采样,采样时间在消毒/灭菌处理后，存放有效期内采样。 采样方法可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液器按无菌检查法执行。不能用破坏性方法取样的医疗用品，用浸有采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面100cm2, 取全部
7、表面；被采表面100cm2,取100cm2。,注意事项 灭菌物品采样有环境要求。 接触皮肤和黏膜的医疗用品，消毒标准要求不同。,内窥镜采样,消毒后内窥镜的采样方法： 内窥镜（如胃镜、肠镜）内腔面：用20ml无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集。 内窥镜外表面：按医疗用品表面方法采样，从活检出口向上计算面积，采集100cm2。,从活检出口接,从内镜活检孔口注入,血液透析系统采样,标本采集：单一透析系统：采样点为透析液进口及出口，消毒后用无菌试管接原液10ml即可。疑有透析液污染或严重感染病例时，应增加采样点，如：原水口、软化水出口、反渗水
8、出口、透析液配液口。 监测时间：每月一次。 检查结果超过参考标准时，须再复查。怀疑或确定病人在治疗中有热原反应或菌血症时，应随时检测。,消毒/灭菌剂采样,采样时间: 正在使用中的消毒/灭菌剂。 采样方法： 用10ml无菌试管吸取一定量消毒剂，注入干燥无菌试管，待检。 监测频率： 含氯消毒剂、过氧乙酸等每日监测一次 2%戊二醛每周至少一次（重点科室每日监测）,压力蒸汽灭菌效果监测,压力蒸汽灭菌效果监测是一组综合监测，包括工艺监测、化学监测、生物监测。 按WS 310.3-2009 医院消毒供应中心 第3部分：清洗消毒及灭菌效果监测标准。,干热灭菌效果监测 环氧乙烷灭菌效果监测 按WS 310.3
9、-2009 医院消毒供应中心 第3部分：清洗消毒及灭菌效果监测标准。,紫外线消毒效果监测,紫外线辐照计测定法：开灯 5min 后，将测定波长为 253.7nm 的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离 1m 的中央处，待仪表稳定后，读取紫外线灯管的辐照度值。 紫外线强度指示卡监测法：开启紫外线灯5min后，将指示卡置紫外灯下垂直距离1m处，有图案一面朝上，照射1min（紫外线照射后，图案正中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色），观察指示卡色块的颜色，将其与标准色块比较，读出照射强度。,生物监测法：同空气消毒和表面消毒效果检测方法 结果判断：普通30W直管型紫外灯，新灯辐照强度90uW/c
10、m2，使用中灯管辐照强度70uW/cm2，高强度灯管辐照强度180uW/cm2为合格。,注意事项：测定时电压 220VV，温度 2025，相对湿度60， 紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用(要求一年校准一次) 指示卡应获得卫生许可批件，并在有效期内使用。 放于灯管中央部位，仪器探头与拉杆保持垂直。,1米,干热灭菌效果监测,适用于耐高温诊疗用品、油脂、粉末、玻璃、金属制品常用160 2h。 化学检测法：用既能指示温度又能指示时间化学指示剂。观测颜色和性状的改变。 物理检测法：热电偶温度检测仪。 生物监测法：枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC 9372）株。361培养48小时。,监测样品送检
11、时间,采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过2小时,若样品保存于0-4条件时,送检时间不得超过24小时。,四、检验及结果评价,空气消毒效果,检验： 细菌总数：将琼脂平板，置于361温箱培养 48h，计数细菌菌落数。 致病菌检验 金黄色葡萄球菌： 溶血性链球菌：,检验结果计算方法：A为平板面积（cm2） T为平板暴露时间（min）：5min N为平均菌落数（cfu） 9cm直径的平皿 计算常数为157,结果判定,无菌检验,无菌检验是指检查经灭菌的敷料、缝线、一次性使用的医疗用品、无菌器械以及适合于无菌检查的其它品种是否无菌的一种方法。 无菌检验应在洁净度为100级单向流空气区域
12、内进行，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染；对单向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。,无菌检验前准备,洗脱液与培养基无菌性试验:无菌试验前 3d，于需-厌养培养基与霉菌培养基内各接种 1ml 洗脱液，分别置 3035与 2025培养 72h，应无菌生长。 阳性对照管菌液制备:金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003生孢梭菌CMCC(B)64941 白色念珠菌CMCC（F）98001,无菌操作,小件医疗器械(缝合针、针头、刀片等)取5件直接浸入 6 管需-厌氧培养管(其中一管作阳性对照)与 4 管霉菌培养管。 培养基用量为 15ml/管。 大件医疗器械(手术钳、镊子等)取 2 件用沾有无菌
13、洗脱液的棉拭子反复涂抹采样，将棉拭子投入 5ml 无菌洗脱液中，将采样液混匀，接种于需-厌氧培养管与霉菌培养基。接种量为 1ml/管，培养基用量为 15ml/管。,培 养,在待检样品的需-厌氧培养管中，接种预先准备的金黄色葡萄球菌阳性对照管液 1:1000 稀释 1ml。 将需-厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于 3035培养 5d，霉菌培养管与阴性对照管于 2025培养 7d。 培养期间逐日检查是否有菌生长，如培养基出现混浊或沉淀，经培养后不能从外观上判断时，可取培养液转种入另一支相同的培养基中或斜面培养基上，培养 48h72h 后，观察是否再现混浊或在斜面上有无菌落生长，并在转种的同时，取
14、培养液少量，涂片染色，用显微镜观察是否有菌生长。,结果判定,灭菌合格： 阳性对照在 24h 内应有菌生长，阴性对照在培养期间应无菌生长。如需-厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊但经证明并非有菌生长。 灭菌不合格： 如需-厌氧菌及霉菌培养管中（除阳性对照外）任何1管显混浊并证实有菌生长。,注意事项,送检时间不得超过 2h，若样品保存于 04，则不得超过24h。 被采样本表面积100cm2取全部表面；被采样本表面积100cm2，取 100cm2。 若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。,医院器械按使用时发生交叉感染的危险程度，分为三个消毒等级: 严格：进入正常无菌组织或血管系统的器
15、械。要求无菌。如腹腔镜。 半严格：主要指与完整的粘膜接触而一般不穿透无菌组织的器械。如上消化道内窥镜至少应该接受高水平消毒。 不严格：通常不接触患者或仅接触完整皮肤。如听诊器。,医疗用品,医疗用品卫生标准：进入无菌组织、器官或接触破损皮肤、黏膜：无菌。 接触黏膜：细菌总数20cfu/g或100cm2； 接触皮肤：细菌总数200cfu/g或100cm2； *气管镜、胃镜、肠镜要求达到高水平消毒。 *腹腔镜、脑室内窥镜、关节镜要求无菌。,内窥镜,菌落计数： 将送检液用旋涡器充分震荡，取0.5ml， 加入2只直径90mm无菌平皿，每个平皿分别加入已经熔化的45-48营养琼脂15ml-18ml，边倾注
16、边摇匀，待琼脂凝固，于35培养48小时后计数。 致病菌检测： 将送检液用旋涡器充分震荡，取0.2ml分别接种9cm血平皿、中国兰平皿和SS平皿，均匀涂布，35培养48小时，观察有无致病菌生长。,内窥镜内腔面： 细菌菌落总数（cfu/镜）=平均平板菌落数20 内窥镜镜身 ：,内镜检验结果计算,内镜结果判定,消毒后的内镜应当每季度进行生物学监测并做好监测记录。 灭菌后的内镜应当每月进行生物学监测并做好监测记录。 消毒后的内镜合格标准为：细菌总数20cfu/件，不能检出致病菌； 灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。,血液透析系统 结果判定：透析入口液，细菌总数200cfu/ml。透析出口液，细菌总数2000cfu/ml。透析液的内毒素检测至少每3个月一次，内毒素 2 EU/ml 。,手和皮肤黏膜消毒效果,细菌总数检测: 将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打 80 次。 用无菌吸管吸取 1.0ml 待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的 45的营养琼脂 15ml18ml，边倾注边摇匀。 待琼脂凝固，置 361温箱培养 48h，计数菌落数。,
