4.4 10微生物实验室样本分离操作规程

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1、1微生物实验室样本分离操作规程标本处理、检验与结果报告:1)拭子、分泌物标本 标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至72 小时未见可疑菌落,则报告未培养出普通致病细菌。2)尿液标本 取5ml 尿液,3000 转/分离心5 分钟,取离心沉淀物,接种环取样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至72 小时未见可疑菌落,则报告未培养出普通致病细菌。3)引流液 标本3000 转/分离心5 分钟,取离

2、心沉淀物,接种环取样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至72 小时未见可疑菌落,则报告未培养出普通致病细菌。24)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至72 小时未见可疑菌落,则报告未培养出普通致病细菌。5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时

3、观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至72 小时未见可疑菌落,则报告未培养出普通致病细菌。6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中,加入增菌液2ml,35温箱培养48 小时观察培养液有无混浊,采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至72 小时未见可疑菌落,则报告未培养出普通致病细菌。真菌培养阴性操作程序1、仔细查对标本标签与检验单是否正确,标本质量是否合格,3若收检标本与检验单查对正确,标本质量合格则进行接收检验,否则查找原因并在有关记录本上记录。2、标本处理、检验与结果报告:1)拭子

4、、分泌物标本 标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第4 天未见可疑菌落,则报告未培养出真菌。2)尿液标本 取5ml 尿液,3000 转/分离心5 分钟,取离心沉淀物,接种环取样涂于TTC-沙保罗平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第4 天未见可疑菌落,则报告未培养出真菌。3)引流液 标本3000 转/分离心5 分钟,取离心沉淀物,接种环取样涂于TTC-沙保罗平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置25温

5、箱培养。培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第4 天未见可疑菌落,则报告未培养出真菌。44)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第4 天未见可疑菌落,则报告未培养出真菌。5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第4 天未见可疑菌落,则报告未培养出真菌。6)留置针头、小导管

6、等标本 标本置无菌管中,加入增菌液2ml,35温箱培养48 小时观察培养液有无混浊,采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第4 天未见可疑菌落,则报告未培养出真菌。苛养菌培养阴性操作程序1、仔细查对标本标签与检验单是否正确,标本质量是否合格,5若收检标本与检验单查对正确,标本质量合格则进行接收检验,否则查找原因并在有关记录本上记录。2、标本处理、检验与结果报告:1)拭子、分泌物标本 标本涂于普通血琼脂平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始线,再以无菌接种环画线分离后置C02 缸,35温箱

7、培养。培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第5 天未见可疑菌落,则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。2)尿液标本 取5ml 尿液,3000 转/分离心5 分钟,取离心沉淀物,接种环取样涂于普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始线,再画线分离后置C02 缸,35温箱培养。培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第5 天未见可疑菌落,则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。3)引流液 标本3000 转/分离心5 分钟,取离心沉淀物,接种环取样画线分离接种普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板,置C02 缸,35温箱培

8、养。培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第5 天未见可疑菌落,6则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板原始线,再画线分离后置C02 缸, 35温箱培养。培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第5 天未见可疑菌落,则报告未培养出肺炎球菌、嗜血杆菌等苛养菌。5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于血平板、布氏血平板成原始线,再分离画线后置于C02 缸,放入35温箱培养。另取约1g 标本接种碱性蛋白胨水中,35温箱培养24-72

9、 小时,再转种高盐平板、中国兰平板、山梨醇麦康凯平板。培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继续培养至第5 天未见可疑菌落,则报告未培养出弧菌、螺杆菌等细菌。6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中,加入增菌液2ml,35温箱培养48 小时观察培养液有无混浊,采样转种血平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始线,再画线分离后置于C02缸,35温箱培养。培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落,若继7续培养至第5 天未见可疑菌落,则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。抗酸培养阴性操作程序1、仔细查对标本标签与检验单是否正确,标本质量是否合格,若收检标本与检验单查对正确,标本质量合格则进行接收检验,否则查找原因并在有关记录本上记录。2、标本处理、检验与结果报告:液性引流标本(如腹水、尿液、CSF 等)直接离心留沉淀物,杂菌污染标本(如大便、痰等)取样置无菌管,加入1N NaOH1ml 作用30 分钟,再加入1N HCl1ml 中和,3000 转/分钟离心5 分钟,取沉淀物100l 量接种罗氏培养基,置37温箱培养。每星期观察一至两次培养基斜面,结果连续观察七个星期以上未发现有可疑菌落生长,报告未培养出分枝杆菌。支原体培养检验操作程序

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