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1、第十六章 品种真实性及品种纯度的室内测定 （种子的遗传质量）,一、品种纯度的含义,1.品种纯度检验包括两方面的内容:品种真实性和品种纯度。 2.品种真实性是指一批种子所属品种、种或属与文件描述是否相符。 3.品种纯度是指品种个体与个体之间在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数（或株、穗数）占供检验本作物样品数的百分率表示。 4.品种纯度检验的对象:种子、幼苗或较成熟的植株。 5.鉴定品种真实性时，需要使用对照样品，对照样品应能代表被鉴定品种原有的特征特性。,二、品种纯度检验的方法分类,1.根据其所依据的原理不同主要可分为形态鉴定、物理化学法鉴定、生理生化法鉴定、分子生物学方法鉴定、细胞
2、学方法鉴定。 2.依据检验的对象分为：种子纯度测定、幼苗纯度测定、植株纯度测定； 3.根据检验的场所分为：田间纯度检验、室内纯度检验和田间小区种植鉴定等。,三、形态鉴定的优缺点1.种子形态测定：优点是简单易行，省时快速，直观经济。缺点是准确性较差，种子形态受环境影响和发育状况影响较大。适合于种子形态性状丰富、籽粒较大的作物，对于相当多的品种难以鉴定。 2.幼苗形态测定：优点是比较简单，所需时间相对较短。缺点是可靠性不高，结果不太准确，用于鉴别的性状较少，无法鉴别性状差异不明显的品种。 3.田间小区种植鉴定：优点是鉴定品种范围广、准确度高。是测定品种纯度最准确、可靠的方法。缺点是周期长，费用高，
3、受环境和人为因素等的影响较大。,四、目前品种纯度室内检测方法1.种子形态鉴定法2.苯酚染色法3.蛋白质和同工酶电泳法4.DNA分子检测。目前最常用的是聚丙烯凝胶电泳法（PAGE)，但其应用作物较少，目前仅限于小麦、大麦和玉米等作物。近几年DNA分子检测技术发展迅速，如SSR等分子标记技术具有多态性信息量高、重演性好、稳定性高等优点，有较大的发展潜力和应用前景,五、苯酚染色法的基本原理,不同品种的种子内苯酚氧化酶的含量不同，其催化苯酚被氧化成苯醌的速度也不同，在一定时间内，根据种子被染成黑色的程度不同就可以鉴定不同品种。注意：苯酚染色鉴定小麦种子纯度时，应将小麦籽粒放入垫有1%苯酚溶液湿润滤纸的
4、培养皿内，而不是浸入苯酚溶液中。,六、室内纯度测定的基本程序,从送验样品中随机数取一定数量的样品，测定异品种种子或杂株（穗）数，再计算品种纯度。最终结果保留一位小数。 种子纯度鉴定用的试验样品是独立扦取的送验样品,七、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 分离蛋白质的原理,1.电荷效应2.分子筛效应3.浓缩效应,八、品种纯度电泳检测 的一般过程,1.样品的提取 2. 凝胶的制备 3.加样电泳 4.染色 5.谱带观察分析,九、品种纯度电泳检测 的优缺点,优点：（1）鉴定结果较为准确可靠，操作简单易行；（2）省时快速；（3）成本低廉，易于推广。 缺点：（1）适用于遗传基础稳定的常规种和 单交种，对于遗传
5、基础复杂（亲源关系较近） 的材料难于鉴别；（2）有时结果不很稳定。,第十八章种 子 健 康 测 定 （种子的卫生质量）,一、种子健康测定的内容,种子健康测定主要是测定种子是否携带有病原菌(如真菌、细菌及病毒)，有害的动物(如线虫及害虫)等健康状况。,二、种子健康测定方法,1.未经培养检查：不能说明病原菌的生活力。包括 （1）直接检查（2）吸胀种子检查（3）洗涤检查（4）剖粒检查（5）染色检查（6）比重检查（7）射线检查。 2.培养后检查：包括（1）吸水纸法（2）砂床法（3）琼脂皿法（4）噬菌体法（5）血清学酶联免疫吸附试验法等。 这里所讲的未经培养或培养指的是病原物，而不是种子。,三、检测的程
6、序,1.试验样品：至少为400粒净种子，或从送验样品分取相当重量的净种子。 2.仪器设备（了解） 3.测定方法和程序：根据种子种类、病害的种类以及检测的目的选择。 4.结果表示与报告：以供检样品感染种子数的百分率或样品重量中病原体的数目表示结果。把结果填报在种子检验报告“其他项目测定”栏目内，要写明病原菌的拉丁学名。填报结果必须同时说明所用的测定方法，包括所用的预措方法和用于检验的样品或部分样品的数量。,第十九章 田间检验,一、田间检验的概念 1.田间检验-是指在种子生产过程中，在田间对品种真实性进行验证，对品种纯度进行评估，同时对作物的生长状况、异作物、杂草等进行调查，并确定其与特定要求符合
7、性的活动。田间检验时，品种真实性和品种纯度的检查，实质上是一种过程控制，不是严格意义上的产品检验。因此田间检验的目的是核查种子田，证实品种特征特性是否名副其实（品种真实性），证实不可能存在可能有损将要收获种子质量的各种情况（品种纯度）。,（1）异作物-是指不同于本作物的其他作物，如小麦种子田中的大麦，玉米种子田中的高粱，大豆种子田中的绿豆等。 （2）杂草-是指在种子收获过程中难以分离的及有害的检疫性杂草，例如：大豆种子田中的苍耳，小麦种子田中的燕麦草、毒麦、黑麦状雀麦，水稻种子田中的稗草等。,2.品种的特征特性- 是指品种的植物学形态特征和生物学特性。（1）植物学形态特征-是指某一作物品种在形
8、态性状上区别于其他品种的征象、标识，如植株的高矮、叶色、叶形、花色等。 （2）生物学特性-是某一作物品种区别于其他品种的生物学性状，即对作物本身生存和繁殖有利的性状，如作物的生育期、光周期、种子的休眠期、种子的落粒性、抗病、抗旱性等。,3.质量性状-是指由一对或少数几对基因控制，在分离群体中表现为非连续分布的性状。质量性状受环境的影响较小，基因间的相互作用有明显的显性、隐性区别，如玉米籽粒的颜色，豌豆的花色等。 4.数量性状-是指由微效多基因控制，在分离群体中表现为连续分布的、可以用数量单位表示的性状（如株高、穗重） 。 数量性状受环境的影响较大，后代表现不明显的显性和隐性，是多个位点上的基因
9、累加作用的结果。 在田间检验过程中，应以质量性状为主，结合使用数量性状。,5.变异-是指生物的亲代与后代、后代不同个体之间的性状有差异的现象。如同一小麦品种的同一世代或前后代之间不同植株表现出的株高、粒重等性状的差异。变异有可遗传变异和不遗传变异两种。 （1）可遗传变异-是指由于遗传物质发生变化（包括基因突变、染色体畸变和重组等）引起的，这种变异可以遗传给后代。 （2）不遗传变异也称表型变异，是由于环境条件影响引起的变异。这种变异不可以遗传给后代。在田间检验时，要注意区分可遗传变异和不遗传变异，特别是数量性状容易受环境条件的影响而发生变化。,6.自然变异-是指作物在自然条件下，不加人工控制发生
10、的变异。自然变异的原因有染色体重组、断裂、缺失，天然杂交，自然界化学、物理因素引起的突变（自发突变）等。自然变异是引起品种在长期使用过程中纯度降低的原因之一。 7.杂株率-是指检验样区内所有杂株（穗）占检验样区本作物总株（穗）数的百分率。 8.散粉株率-是指检验样区内花药伸出颖壳并正在散粉的植株占供检样区内本作物总株数的百分率。对于玉米种子田，散粉株是指在花丝枯萎以前超过50mm的主轴或分枝花药伸出颖壳并正在散粉的植株。,9.淘汰值-是指在充分考虑种子生产者利益和较少可能判定失误的基础上，将样区内观察到的杂株与标准规定值进行比较，作出有风险接受或淘汰种子田决定的数值。 10.原种-是指用育种家
11、种子繁殖的第一代至第三代，经确认达到规定质量要求的种子。11.育种家种子-是指育种家育成的遗传性状稳定、经品种审定通过的品种或亲本种子的最初一批种子，用于进一步繁殖原种种子。 12.大田用种-是指由常规原种繁殖的第一代至第三代或杂交种，经确定达到规定质量要求的种子。,二、田间检验的目的核查种子田的品种特征特性是否名副其实（品种真实性） ，以及影响收获种子质量的各种情况（品种纯度） ，从而根据这些检查的质量信息，采取相应的措施，减少剩余遗传分离、自然变异、外来花粉、机械混杂和其它不可预见的因素对种子质量产生的影响，以确保收获时符合规定的要求。,三、田间检验的作用 1.检查制种田的隔离情况，防止因
12、外来花粉污染而造成的纯度降低。 2.检查种子生产技术的落实情况，特别是去杂、去雄情况。严格去杂，防止变异株及杂株（包括剩余遗传分离和自然变异产生的变异株）对生产种子纯度的影响。在种子生产过程中，通过田间检验，提出去杂去雄的建议，保证严格按照种子生产的技术标准生产种子。,3.检查田间生长情况，特别是花期相遇情况。通过田间检验，及时提出花期调整的措施，防止因花期不育造成的产量和质量降低。同时及时除去有害杂草和异作物。 4.检查品种的真实性和鉴定品种纯度，判断种子生产田生产的种子是否符合种子质量要求，报废不合格的种子生产田，防止低纯度的种子对农业生产的影响。 5.通过田间检验，为种子质量认证提供依据
13、。,四、田间检验的原则1. 田间检验员应识别可区分品种间的特征特性，熟悉种子生产方法和程序； (人员） 2.应建立品种间相互区别的特征特性描述(即品种描述)； （依据） 3.依据不同作物和有关信息（尤其是小区种植鉴定的前控结果），策划和实施能覆盖种子田的、有代表性的、符合规定要求的取样程序和方法；（方法） 4.检验应在苗期、花期、成熟期进行，但至少应在品种特征特性表现最充分、最明显的时期检查一次（如花期）。（时期） 5.田间检验员应独立地对田间状况作出评价，出具检验结果报告。如果检验时某些植株难以从特征特性加以确认，在得出结论之前需要进行第二次或更多次的检验。 （评价）,五、田间检验员的要求
14、1.应通过培训和考核合格； 2.熟悉和掌握田间检验方法和田间标准、种子生产的方法和程序等方面的知识，对被检作物有丰富的知识，熟悉被检品种的特征特性； 3.具备能依据品种特征特性确认品种真实性，鉴别种子田杂株并使之量化的能力； 4.每年保持一定的田间检验工作量，处于良好的技能状态； 5.应独立地报告种子田状况并作出评价，检验结果对委托检验的机构负责。,六、田间检验员的支持根据需要，要求检验的各方给予田间验 员提供下列方面的支持： 1. 被检种子田的详细信息； 2.小区种植鉴定的前控结果； 3.被检品种有效的品种标准描述； 4.检验必备的其他手段。,七、田间检验项目（一）生产常规种的种子田主要检查
15、的 内容：1.前作、隔离条件；2. 品种真实性；3.杂株百分率；4.其他植物植株百分率；5.种子田的总体状况（倒伏、健康等情况）。,（二） 生产杂交种的种子田主要检查的内容1.隔离条件；2.花粉扩散的适宜条件；3.雄性不育程度；4.串粉程度；5.父母本的真实性、品种纯度；6.适时先收获父本（或母本）。父母本的品种纯度直接影响生产出杂交种的质量，必须严格控制。,八、田间检验时期种子田在生长季节期间可以检查多次，但至少应在品种特征特性表现最充分、最明显的时期检查一次，以评价品种真实性和品种纯度。常规种至少在成熟期检验一次，杂交种花期必须检验2-3次，蔬菜作物在商品器官成熟期必须增加一次检验。如：玉
16、米杂交种制种田，一般检查五次。第一次在开花前检查隔离条件和杂株，在开花期间（母本有5%植株花丝抽出后至萎缩前）检查23次；在种子成熟期检查一次。一些作物田间检验时期可参考表19-1和表19-2。 一般作物的花期是品种特征特性表现最充分、最明显的时期。,表19-1 主要大田作物品种纯度田间检验时期,表19-2 主要蔬菜作物品种纯度田间检验时期,九、种子田生产质量要求1.种子田不存在检疫性病虫害，是我国有关法规规定的强制性要求。 2.前作：种子生产者应提供前作档案，确保前作不存在污染源。前作的污染源通常表现为下列3种情况：（1）同种的其他品种污染；（2）其他类似植物种的污染；（3）杂草种子的严重污染。例如：水稻、玉米、小麦、棉花、大豆种子田不存在自生植株；油菜种子生产时，要求种子田前作若为十字花科植物，则至少间隔两年；西瓜种子生产时，要求种子田前作不应有自生植株，不允许重茬栽培。,3.隔离条件：隔离条件是指与周围附近的田块有足够的距离，不会对生产的种子构成污染的危害。有关隔离条件，存在着以下2种情况： 与同种或相近种的其他品种的花粉的隔离； 与同种或相近种的其他品种的防止机械收获混杂的隔离。一些作物的隔离条件参见表19-4。对种子田进行隔离的目的是为了防止生物学混杂和机械混杂造成的污染。 4.田间杂株率和散粉株率主要农作物的田间杂株率和散粉株率见表19-6。,
