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1、观察根尖分生组织细胞有丝分裂,必修一 实验九,一、实验目的1、制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片；2、观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。,二、实验原理:1、 高等植物体内，有丝分裂常见根尖、茎尖等分生区细胞。各个细胞的分裂是独立的。通过在显微镜下观察各个时期细胞内染色体（染色质）的存在状态，判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期（间期、前期、中期、后期和末期）。2、碱性染料（龙胆紫溶液或醋酸洋红液）能将染色体（或染色质）染成深色。3、盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散，用盐酸处理植物的根尖，可以使根尖细胞彼此容易分离。,三、材料用具： 1、洋葱（或大蒜）
2、根尖， 2、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管等， 3、解离固定液 ：盐酸和酒精混合液(1:1） 4、龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）,1.生根培养：将切除老根的洋葱或大蒜的磷基置于盛水的小烧杯上，于2225下进行生根培养。,四、实验步骤,磷 基,2.取材：待根长到5cm左右时剪取根尖2-3mm。,取材部位,看一看植物细胞的 分裂（根尖）,根冠,分生区,伸长区,成熟区,根尖纵剖结构示意图,3、装片的制作：,观察,4、显微镜观察：,思考：为何只截取根尖23mm？有利于找到分生区细胞解离的目的： 使组织中的细胞相互分离开。漂洗的目的：洗去药液，防止解离过度。用碱性染料染色目的：使染色质和染色体着色，便于
3、观察。制片的目的：使细胞分散开（成一层细胞），利于观察。,（6）分生区的特点是什么？,（7）本实验所观察到的细胞还能继续分裂吗？,细胞小，排列密而整齐，细胞壁薄，细胞核大，细胞质浓，无液泡。具有很强的分裂能力，能够不断的分裂产生新细胞，再由这些细胞分化形成其他组织。,原本细胞都是叠加在一起的，在显微镜下很难观察清楚，酒精和盐酸就是使细胞分散分离并杀死细胞，显微镜观察的是死亡的细胞那时处于的状态，所以，有的细胞正处于中期，有的处于间期。,镜检结果分析,进行有丝分裂的细胞分裂相,间期： 完成DNA分子的复制和 有关蛋白质 的合成。,镜检结果分析,间期分裂相图,前期： 核仁和核膜逐渐消失。 核内染色
4、质逐渐浓缩为细长而卷曲的染色体，每一染色体含有两染色单体，它们具有一个共同的着丝点；两级发出纺锤丝形成纺锤体。,镜检结果分析,前期分裂相图,中期： 染色体形态、数目清晰，便于观察。 各染色体的着丝点排列在赤道板上，纺锤丝与染色体的着丝点相连。,镜检结果分析,中期分裂相图,后期：各染色体着丝点分裂为二，其每条染色单体也相应地分开，并各自随着纺锤丝的收缩而平均移向两极，每极有一组染色体，数目和原来的相同。,镜检结果分析,后期分裂相图,末期：核膜、核仁重新出现，分开在两极的染色体各自组成新的细胞核，在细胞中央出现细胞板形成新的细胞壁，使细胞分裂为二，形成二个子细胞。这时细胞又进入分裂间期。,末期分裂
5、相图,实验结束后： 1、将盖玻片和载玻片擦洗干净。 2、显微镜复原，套上塑料袋。 3、整理试验台。,本实验的一些替代和改进之处： 材料的替代：大蒜；大葱；蚕豆；绿豆；小麦 2.取材的长短：所有材料的根最好是培养到0.51cm，此时细胞分裂相最多。 3. 试剂的改进：稀释的龙胆紫染液（用10冰醋酸以3：1比例稀释质量浓度为0.01g/ml的龙胆紫染液）；2的醋酸洋红染液；改良苯酚品红染液，1：1稀释的医用紫药水,根尖的固定：目的是迅速将组织和细胞 杀死，并使细胞结构尽可能保持生活时的状态。把处于分裂旺盛时期的根尖放入装有卡诺氏固定液的培养皿内（3份95的酒精和1份99的冰醋酸混合而成），盖上培养
6、皿盖固定1224h,再用95酒精冲洗2次后，转入70酒精中置4冰箱中保存待用。 5.实验仪器的替代：用化学实验室学生实验中用的瓷质反应板（又称点滴板或比色板）来替代玻璃皿，既方便操作又容易清洗。,6. 解离、漂洗、染色仪器的改进：在反应 板的一个穴中滴入质量分数为15盐酸和95酒精的混和液（1：1）数滴（穴的容积约为5ml），另一穴中滴12滴0.01g/ml龙胆紫溶液，其余的穴中滴加清水用于根尖漂洗。 7. 压片法的改进：在盖波片上盖23层吸水纸，用拇指轻压，或用铅笔的橡皮端或玻璃滴管上的橡皮头，对准盖波片下的材料在盖波片上轻轻敲击，使根尖细胞均匀扩散成淡淡的云雾状。,1.（09江苏卷）有1位
7、同学做根尖有丝分裂实验，在显微镜中观察到的图像如图所示。造成这种情况的原因可能是 ( )取材位置不合适 取材时间不合适制片时压片力量不合适 解离时间不合适 视野选择不合适A. B.C. D.解析 此实验需找到呈正方形、排列紧密的分生区细胞，该视野中细胞多呈长方形，可能原因是取材位置不合适、取材时间不恰当或没有找到分生区。,C,2.(08江苏生物)29（7分）在完成了观察洋葱根尖分生区细胞有丝分裂实验后，教师给学生提供了2份资料。 资料一 一份“实验报告”的部分内容 （一）解离：剪取洋葱根尖5cm，放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液（体积比为1:1）的玻璃皿中，在室温下
8、解离35min。 （二）染色：把根尖放在盛有0.01g/mL龙胆紫溶液的玻璃皿中染色35cm。 （三）漂洗：将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。 （四）制片：将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上载玻片，用拇指轻轻按压载坡片,（1）请改正“资料一”中的3处错误。_,将“5cm”改成“23mm”；实验操作步骤应改为先漂洗后染色；将“盖上载玻片”改成“盖上盖玻片后，再加一片载玻片”,BD,4在下列实验中，实验材料必须始终保持生活状态的是A.在光学显微镜下观察植物细胞有丝分裂 B.在光学显微镜下观察植物细胞质的流动 C.在光学显微镜下观察马蛔虫受精卵的有丝分裂固定装片 D
9、.在光学显微镜下观察植物细胞质壁分离和质壁分离复原,5.对洋葱根尖分生区细胞的正确描述是A. 既小且方 B. 形态不规则 C. 细胞已经开始分化 D. 无间期细胞,6、在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”实验中，以下操作和结论正确的是A.剪取5cm根尖，用酒精和吡罗红混合液解离染色B.右图是高倍显微镜下调解细准焦螺旋看到的视野C.持续观察，视野中的K细胞将分裂成两个子细胞D.视野中，N细胞的染色体数目是M细胞的一半,B,7、实验材料的选择 （1）洋葱的根尖可用于观察 的实验，这是因为其根尖分生区细胞进行有丝分裂；而,植物细胞有丝分裂,细胞可用于观察植物细胞的质壁分离和复原的实验，这是因为其具有
10、 ，同时还可以利用洋葱鳞片叶内表皮观察 在细胞中的分布。（2）人的 可用于观察 及 在细胞内的分布情况，而观察 时则选用动物的精巢细胞作为实验材料。（3）观察叶绿体时常选用藓类的叶，因为 。,洋葱鳞片叶的外表皮,紫色大液泡,DNA和RNA,口腔上皮细胞,线粒体,DNA和RNA,细胞减 数分裂,藓类 植物的叶片薄而小，常是一层细胞，叶绿体清楚，易 于观察和操作,RNA,健那绿,蓝绿色,龙胆紫,红色,8、染色剂的使用,甲基绿,9、小鼠常被用作研究人类遗传病的模式动物。请填充观察小鼠细胞减分裂的实验步骤： 供选材料及试剂：小鼠的肾脏、睾丸、肝脏，苏丹染液、醋酸洋红染液、詹纳斯绿B（健那绿）染液，解离固定液。 取材：用_作实验材料 制片：取少量组织低渗处理后，放在_溶液中，一定时间后轻轻漂洗。 将漂洗后的组织放在载玻片上，滴加适量_。 一定时间后加盖玻片，_。,（小鼠）睾丸,解离固定液,醋酸洋红染液,压片,
