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1、专题2 微生物的利用,【知识梳理】 一、微生物的实验室培养 1.培养基: (1)概念:人们按照微生物对_的不同需求,配制出供其 _的营养基质。(2)成分(3)分类:按照物理性质可以分为_和固体培养基。,一般都含有水、_、_和无机盐 还要满足微生物生长对pH、_以及氧 气的要求,营养物质,生长繁殖,碳源,氮源,特殊营养物质,液体培养基,2.无菌技术: (1)含义:培养微生物的操作中,所有_的方法。 (2)关键:防止外来杂菌的污染。 (3)请将无菌技术的方法、类型和对象进行连线:,防止杂菌污染,3.大肠杆菌的纯化培养: (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基。 最常用的细菌培养基:牛肉膏蛋白胨培养基。
2、配制步骤:,计算,溶化,倒平板,(2)纯化大肠杆菌: 方法:平板划线法和_。 关键:接种。 原理:在培养基上得到由_的肉眼可见的 菌落,即可获得纯种。(3)菌种的保存,对于_的菌种，临时低温保藏 对于需要长期保存的菌种，_,稀释涂布平板法,一个细胞繁殖而来,频繁使用,甘油管藏,二、分解纤维素的微生物的分离 1.实验原理:,2.实验流程:,纤维素,选择培养,纤维,素分解菌,涂布平板,透,明圈,【盲点判断】 1.(2012新课标全国卷T5B)常用液体培养基分离获得细菌单 菌落。 ( ) 2.(2012北京高考T5C)将转基因植物的叶片接种到无菌培养 基上,应该进行严格的无菌操作。 ( ) 3.(2
3、012北京高考T5D)将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养 基上接种时,未进行严格的无菌操作影响较小。 ( ) 4.筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一碳源。( ),5.筛选分解纤维素的微生物的培养基中是以纤维素为唯一碳源 的选择培养基。 ( ) 6.(2013重庆高考T5A)消毒的原则是既杀死材料表面的微生 物,又减少消毒剂对细胞的伤害。 ( ) 7.在富含纤维素的培养基中加入刚果红染色剂,若出现周围存 在透明圈的菌落,则说明筛选到了分解纤维素的微生物。( ),【盲点判断点拨】 1.在液体培养基中不能形成单个、稳定形态的菌落,常用液体培养基培养细菌获得代谢产物,用固体培养基获得单菌落。
4、2.转基因植物叶片接种过程必须执行无菌操作,若培养过程中有杂菌污染,会导致培养的幼苗生长缓慢甚至培育失败。 3.土壤浸出液中本来就存在多种微生物,接种后在选择培养基的作用下,所有杂菌包括浸出液中原有的和操作过程中掺入的杂菌,都会被抑制生长。,4.筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基的唯一氮源,而非唯一碳源。 5.筛选分解纤维素的微生物的培养基是刚果红鉴别培养基,该培养基并不能阻止或抑制微生物的生长,但可以通过刚果红的显色反应,将能够分解纤维素的微生物筛选出来。 6.选择无菌技术方法原则是既要考虑效果,又要考虑被操作对象的承受能力。 7.刚果红染色剂能与纤维素结合发生颜色反应,形成红色复合物。分
5、解纤维素的细菌产生纤维素酶分解纤维素,在分解纤维素的细菌的周围出现透明圈。,【网络概览】,考点一 培养基成分及种类 1.培养基的成分:,2.培养基的种类: (1)按物理状态分类:,(2)按功能分类:,【高考警示】 (1)并不是所有培养基的营养成分都相同。 自养微生物能够利用空气中的CO2合成有机物,培养基中不需加入有机碳源(可加入无机碳源)。 固氮微生物能够固定空气中的N2,合成氨态氮,培养基中不需添加氮源。 (2)培养基中的不同营养成分不一定是不同物质提供。 培养基中不同的营养成分可以由同一物质提供,有些物质,如NH4HCO3,既是氮源也是某些自养生物的碳源。,【通关题组】 1.(培养基的种
6、类和功能)(2014马鞍山模拟)下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是 ( )A.从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基 B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨 C.该培养基缺少提供生长因子的物质 D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用,【解题指南】解答本题的切入点: (1)明确表格中各种物质的组成特点及功能。 (2)掌握伊红、美蓝所起作用。 【解析】选B。分析表中成分可知,该培养基中没有凝固剂,为液体培养基,该培养基的营养成分齐全,但存在伊红、美蓝等鉴别物质,属于鉴别培养基,A项错误;该培养基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄
7、糖是绝大多数生物最常利用的碳源,B项正确;该培养基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子,C项错误;培养基调节完pH还要进行灭菌等操作后,才能使用,D项错误。,【互动探究】 (1)蛋白胨能够为微生物的生长提供哪些营养成分? 提示:蛋白胨可以为微生物的生长提供碳源、氮源、维生素等营养成分。 (2)蛋白胨在不同培养基中起的主要作用是否相同?为什么? 提示:不相同。在不同的培养基中,由于与其他成分的相对含量不同,导致其所主要提供的营养成分不同。,2.(培养基的成分及培养条件)(2014连云港模拟)在农田土壤的表层自生固氮菌较多,用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养,可将自生固氮
8、菌与其他细菌分开,对培养基的要求是 ( ) 加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37恒温箱中培养 2830温度下培养 A. B. C. D.,【解题指南】解答本题需明确: (1)抗生素的作用是杀死细菌,包括自生固氮菌。 (2)自生固氮菌能够固氮,但不属于自养生物。 【解析】选C。细菌对抗生素敏感,故培养基中应不加抗生素;自生固氮菌有固氮功能,故培养基中不需要加氮素;自生固氮菌是异养的,故培养基中应该加葡萄糖,其生长繁殖的适宜温度是2830。,【解题金手指】 根据培养基变化筛选微生物 (1)在培养基中加入某种化学物质。例如,加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌;加入高浓度的
9、食盐可以得到金黄色葡萄球菌。 (2)改变培养基的营养成分。例如,缺乏氮源时可以分离出固氮微生物;石油作为唯一碳源时,可以分离出能分解石油的微生物。 (3)改变微生物的培养条件。例如,将培养基放在高温环境下培养,可以得到耐高温的微生物。,【加固训练】(2014黄山模拟)现有两种固体培养基,已知其配制时所加的成分和含量如下表,用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物,你认为它们适于分离 ( ),A.甲培养基适于分离自养型自生固氮菌;乙培养基适于分离异养型自生固氮菌 B.甲培养基适于分离异养型自生固氮菌;乙培养基适于分离自养型自生固氮菌 C.甲培养基适于分离酵母菌;乙培养基适于分离真菌 D.甲培养
10、基适于分离自养型共生细菌;乙培养基适于分离异养型共生固氮菌 【解析】选B。固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌,甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物,则该培养基适于分离异养型的自生固氮菌;乙培养基中不含有机碳源,故可用来分离自养型的自生固氮菌。,考点二 微生物的纯化培养技术 1.原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。 2.微生物的接种方法: (1)平板划线法。,接种环的灼烧。 a.第一次划线前:杀死接种环上的微生物,避免污染培养物。 b.每次划线前:杀死残留菌种,保证每次划线菌种来自上次划线末端。 c.划线结束后:杀死残留菌种,避免污染环境和感
11、染操作者。 灼烧接种环之后,要冷却后再进行操作,以免温度太高杀死菌种。 划线时最后一区域不要与第一区域相连。 划线用力要大小适当,不能用力过大将培养基划破。,(2)稀释涂布平板法。 稀释操作时,每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰12 cm处。 涂布平板时。 a.涂布器用体积分数为70%的酒精消毒,取出时,让多余酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃。 b.不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。 c.酒精灯与培养皿距离要合适,移液管管头不要接触任何物体。,【通关题组】 1.(微生物的接种方法)(2014马鞍
12、山模拟)下列在微生物的 实验室培养过程中,关于平板划线操作的叙述正确的是( ) A.使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌 B.打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞 好棉塞 C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即 可 D.最后应将平板倒置,放入培养箱中培养,【解题指南】解答本题的突破口: (1)明确平板划线法的操作过程。 (2)明确消毒、灭菌的对象。 【解析】选D。使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程仍要灭菌;打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌,取出菌种后含菌种的试管需要通过火焰灭菌后再塞好棉塞;将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线后盖上皿
13、盖;最后应将平板倒置,放入培养箱中培养。,2.(无菌技术与接种方法)(2014南京模拟)从自然菌样中筛 选较理想生产菌种的一般步骤是:采集菌样选择培养纯种 分离性能测定。 (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是 从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培 养嗜盐菌的菌样应从 环境采集。 (2)选择培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境 条件,使其在群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物 的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的选择培养应选择_ _的培养基,并在 条件下培养。,(3)下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后 培养的效果图解,请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是 ,获得图B效果的接种方法 是 。 (4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行 , 接种前要进行 ,在整个微生物的分离和培养中, 一定要注意在 条件下进行。,
