《凝血与耐药相关基因多态性与非创伤性股骨头坏死的关联研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《凝血与耐药相关基因多态性与非创伤性股骨头坏死的关联研究（24页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、凝血与耐药相关基因多态性与非创伤性股骨头坏死的关联研究 Association Studies of Coagulation and Drug Resistance SNPs in the Avascular Necrosis of the Femoral Head,北京协和医院骨科 张笑,缺血性骨坏死(avascular necrosis AVN),由于各种原因(机械、生物等)使骨循环中断、骨的活性成分死亡及随后修复的一系列复杂病理过程。国际骨循环学会(ARCO),病理研究,微循环血栓形成和血管内凝血局部骨内压升高和动脉缺血骨坏死,血栓形成通路,Virchow 血栓形成三要素假说,血管壁损伤
2、,高凝状态,血流淤滞,内皮细胞,血流动力学变化,凝血因子、纤溶和抗纤溶因子,高凝状态,N5N10- 亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) 677CT 缬氨酸取代丙氨酸 高半胱胺酸血症Glueck CJ, Freiberg RA, Fontaine RN, et al. Clin Orthop Relat Res, 2001, (386): 19- 33 Zalavras CG, Malizos KN, Dokou E, et al. Haematologica, 2002, 87: 111 -112.,高凝状态,凝血因子(factor Leiden) 1691GA 精氨酸谷氨酰胺 Va 对APC
3、抵抗 凝血酶原(prothrombin) 20210GA mRNA翻译水平增加,Bjrkman A, Svensson PJ, Hillarp A, et al. Clin Orthop Relat Res. 2004 Aug;(425):168-72. Ekmekci Y, Keven K, Akar N, et al. Nephrol Dial Transplant. 2006 Dec;21(12):3555-8. Chang JD, Hur M, Lee SS, et al. Clin Orthop Relat Res. 2008 May;466(5):1041-6.,血管损伤,血管内皮
4、细胞一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS) NO合成减少 血管收缩，血小板聚集，血管生成减少 骨新生减少 T-786C的基因多态性 Glueck CJ, Freiberg RA, Oghene J, et al. J Bone Joint Surg Am. 2007 Nov;89(11):2460-8.,血管损伤,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF) C-634G基因多态性 Kim TH, Hong JM, Lee JY, et al. Osteoarthritis Carti
5、lage. 2008 Mar;16(3):287-91.,药物转载蛋白 P糖蛋白(P-glycoprotein),多重耐药基因ABCB1第26位外显子的C3435T和第21位外显子的G2677T/A基因多态性 P糖蛋白的活性较高 减少某些特殊组织细胞内激素的浓度 Asano T, Takahashi KA, Fujioka M, et al. Pharmacogenetics. 2003 Nov;13(11):675-82.,研究思路,收集非创伤性股骨头坏死病例，按不同原因分组； 对凝血和激素相关候选基因上的SNPs的筛查； 对SNPs基因型在患者不同分组分布的研究； SNP位点研究结果与已有
6、不同种族对比。,实验结果流行病学,病例分组标准,激素组：患者有明确的激素使用史，激素用量在4周内折合强的松用量1800mg； 酒精组：患者每周饮酒量，折合乙醇消耗量800ml； 特发组：患者除外已知股骨头坏死的高危因素，包括创伤、激素及酒精滥用等。,候选SNP位点,实验过程,DNA提取（QIAGEN公司DNA提取试剂盒） DNA定量 DNA扩增 DNA片段化 DNA沉淀 DNA重悬 DNA与芯片杂交 芯片的延伸与染色 芯片的扫描,芯片扫描,芯片解码,芯片分析GenomeStudio,数据分析PLINK,基因型频率分布的Hardy-Weinberg(H-W)平衡检验 拟合优度2检验（Goodne
7、ss-of-fit Chi-square test） 对照组中，所有位点P值均0.05，符合H-W平衡，即正常对照组可以代表大规模人群,数据分析PLINK,基于等位基因的“病例-对照”关联分析四格表2检验,数据分析PLINK,基于等位基因的“病例-对照”关联分析 校正检验Bonferroni校正法,数据分析PLINK,基于基因型的“病例-对照”关联分析 DD、Dd、dd DD versus Dd versus dd DD,Dd versus dd DD versus Dd,dd 均未发现阳性结果,保守SNP位点,结论,基因多态性分布与种族及地域相关7号染色体ABCB1基因的rs2188526位点上的等位基因A，为非创伤性股骨头坏死的保护性位点,谢谢大家,
