《黑龙江医药卫生职业学校-药学专业-天然药物化学实验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《黑龙江医药卫生职业学校-药学专业-天然药物化学实验（56页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验一 槐米中芦丁的提取工艺,一、实验目的, 通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。 通过芦丁的检识，了解黄酮类化合物定性研究的一般程序和方法。,二、实验原理,对酸性、碱性或两性化合物，可加入酸或碱以调节溶液的PH值，改变分子的存在状态（游离型或离解型），从而改变溶解度而实现分离。包括酸/碱法、碱/酸法。,一些酚酸性类物质如黄酮、蒽醌类等用碱性水从药材中提出后，加酸调至酸性，酚酸性成分可以从水中析出。（碱/酸法）,三、实验仪器与实验材料,1、实验仪器玻璃棒 布氏漏斗 滤纸 电子天平 电热套 烧杯,2、实验材料槐花米 石灰乳 硼砂 盐酸 水 PH试纸,四、试验方法1.槐米
2、药材的鉴定与前处理2.槐米中黄酮类化合物的提取（见下图）,芦丁的提取与分离流程图,五、实验指导1本实验讲解要点及注意事项 芦丁提取方法，重点介绍碱-酸法的原理及注意事项。 调温电热套使用说明：使用方法：接通电源，电源指示灯亮，然后打开调压旋钮开关，调节使用中，加热套功率随着调节方位的变动，产生不同的功率，工作电压表也随着显示不同的示数。顺时针调节会逐步增大功率，增加使用温度，否则反之。, 调温电热套使用的注意事项：1）第一次使用时，电热套内芯会出现烟雾，那是玻璃丝外表油脂在挥发。通电数次后就不会出现这种现象，即可正常使用。2）本产品遇潮后要缓慢升温，使其干燥后即可恢复良好的绝缘性能。3）如长时
3、间不用请放于干燥通风处。,2实验报告要求槐米药材的鉴定和前处理方法。碱-酸法提取芦丁的原理及提取工艺流程。,3思考题 中药材的前处理一般分为哪几个程序？ 在芦丁提取工艺中，为什么加石灰水而不是加氢氧化钾？ 在芦丁提取工艺中，为什么要加入硼砂水溶液？,六、 参考书1. 吴立军主编天然药物化学（第五版），人民卫生出版社，2007年2. 梁敬钰主编天然药物化学实验与指导，中国医药科技出版社，2003年3. 蔡少青主编生药学（第五版），人民卫生出版社，2007年4. 崔福德主编药剂学（第六版），人民卫生出版社，2007年,实验二 槐米水提物的浓缩和干燥工艺,一、实验目的, 学习应用旋转蒸发仪浓缩提取液
4、的原理及操作。 学习应用水域锅干燥药物浓缩液的基本操作。,二、实验原理,1. 蒸发浓缩可在沸点或低于沸点时进行，又可在减压或常压下进行，为提高蒸发效率，生产上蒸发浓缩均采用沸腾蒸发。2. 干燥过程分成两阶段，恒速阶段和降速阶段。在恒速阶段，干燥速率与物料湿含量无关；而在降速阶段，干燥速率近似地与物料湿含量成正比。,三、实验仪器与实验材料,1、实验仪器旋转蒸发器 恒温水浴锅 烧杯 坩埚 玻璃棒 试剂瓶,2、实验材料槐米水提液 盐酸 PH试纸 滤纸 滑石粉,四、试验方法1、槐米药材提取液的减压浓缩工艺流程，采用旋转蒸发仪对提取液进行浓缩。2、槐米药材浓缩液的常压干燥工艺流程，选用水浴锅对浓缩液进行
5、干燥。,五、实验指导1本实验讲解要点及注意事项 旋转蒸发仪的基本操作方法：1） 用胶管与冷凝水龙头连接，用真空胶管与真空泵相联。 2） 先将水注入加热槽。最好用纯水，自来水要放置1-2天再用。 3） 调正主机角度：只要松开主机和立柱连结螺钉。主机即可在0-45度之间任意倾斜。,4） 接通冷凝水，接通电源220V/50Hz，与主机连接上蒸发瓶（不要放手），打开真空泵使之达一定真空度松开手。 5） 调正主机高度：按压下位于加热槽底部的压杆，左右调节弧度使之达到合适位置后手离压杆即可达到所需高度。,6） 打开调速开关，绿灯亮，调节其左侧旁的转速旋钮，蒸发瓶开始转动。打开调温开关，绿灯亮，调节其左侧旁
6、的调温旋钮，加热槽开始自动温控加热，仪器进入试运行。温度与真空度一到所要求的范围，即能蒸发溶剂到接受瓶。 7） 蒸发完毕，首先关闭调速开关及调温开关，按压下压杆使主机上升，然后关闭真空泵，并打开冷凝器上方的放空阀，使之与大气相通，取下蒸发瓶，蒸发过程结束。, 旋转蒸发仪操作的注意事项： 1） 玻璃件应轻拿轻放，洗净烘干。 2） 加热槽应先注水后通电，不许无水干烧。 3） 所用磨口仪器安装前需均匀涂少量真空脂。 4） 贵重溶液应先做模拟试验。确认本仪器适用后再转 入正常使用。 5） 精确水温用温度计直接测量。 6） 工作结束，关闭开关，拔下电源插头。, 水浴锅的基本操作方法：1）往锅内注入干净的
7、水，水位至少达电热管上方1cm处；2）接通电源，打开开关开始加热；3）旋转温度调节旋钮，使旋钮上的刻度线指向工作所需的温度刻度；4）工作完毕将水放干。, 水浴锅使用的注意事项：1）用前必须先注入水，最低水位不得低于电热管以上1cm，水位过低会导致电热管表面温度过高而烧毁；使用过程要随时注意水位；2）如果需用沸水浴，加水量不宜过多，以免沸腾时溅出；,3）未加水到适当位置前，切勿接通电源； 4）温度控制器不可随意拆卸； 5）外壳必须接地； 6）控制箱内部应保持干燥，以防因受潮而导致漏电；应随 时注意水箱是否有渗漏现象。,2实验报告要求旋转蒸发仪的基本操作方法及注意事项。水浴锅的基本操作方法及注意事
8、项。,3思考题 中药材提取液的浓缩一般有那些方法，采用减压浓缩有什么好处？ 中药材浓缩液的干燥一般有那些方法，对于受热易分解或变质的化合物应采取那些措施？,六、 参考书1. 吴立军主编天然药物化学（第五版），人民卫生出版社，2007年2. 梁敬钰主编天然药物化学实验与指导，中国医药科技出版社，2003年3. 崔福德主编药剂学（第六版），人民卫生出版社，2007年,实验三 芦丁粗提物的显色反应和PC鉴别,一、实验目的, 学习黄酮类化合物理化性质和常用的显色方法。 学习用纸色谱法分离和鉴定黄酮类化合物的混合液。,二、实验原理,黄酮类化合物的颜色反应多与分子中的酚OH及吡喃酮环有关。,色原酮 2-苯
9、基色原酮,纸色谱法可视为溶质在固定相和流动相之间的连续分配(萃取)的过程。由于组分在两相间的分配系数不同，因而随展开剂迁移的速度不同而达到分离的目的。,三、实验仪器与实验材料,1、实验仪器滴管 试管 比色管 紫外分辨仪 玻璃棒,2、实验材料乙醇 0.1%NAOH 10%NAOH FeCl3 新华1号层析滤纸 25%醋酸水溶液 硫酸铝试剂 锌粒 氨水 滤纸,四、试验方法1. HCl- Zn粉反应：在样品的乙醇或甲醇溶液中加入少许镁粉振摇，再滴加几滴浓盐酸。（必要时在水浴上加热）2. 铝盐反应：在样品的乙醇或甲醇溶液中加入几滴AL2（SO4）3试剂，观察颜色变化，并在紫外灯下观察有无荧光现象。,3
10、.FeCl3反应：在样品的乙醇或甲醇溶液中加入几滴FeCl3试剂，观察颜色变化。4.性试剂显色反应：在样品的乙醇或甲醇溶液中加入几滴NAOH试剂，观察颜色变化。5. 纸色谱（PC）: 支持剂为新华1号层析滤纸；流动相为25%醋酸水溶液；显色剂为氨水。,五、实验指导1本实验讲解要点及注意事项 试管及滴定管的常规操作方法。 紫外灯下观察荧光现象的基本操作方法及注意事项。 层析纸条应防止污染，其工作部分不能用手触及。点样毛细管不要弄错。先在碎滤纸上进行点样练习，样点与样点和边缘与样点之间应有同等宽度的间隙。,纸层析纸条和层析管均要垂直安放，层析管可置于试管架上或自由夹固定，纸条不能触及管壁。样点与展
11、开剂液面至少相距0.5cm。层析完毕，取出纸条时，不要忘记立即在溶剂前沿处划记号。样点至溶剂前沿的距离以78cm为宜。用电吹风显色时，不可太近或过热，以免影响斑点及其颜色的观察。,2实验报告要求向供试液中加入显色试剂后的颜色变化，以及有无荧光反应。纸色谱法分离化合物的基本操作方法，以及色谱图分析。,3思考题 黄酮类化合物的显色反应有哪些，在物质鉴定中有何用途？ 应用纸色谱分离黄酮类化合物，如何能做到使斑点清晰？ 纸层析时，样点不能接触或浸入到展开剂液面以下，为什么？ 色谱分离技术中，Rf值的计算有何意义，本实验中Rf值大概是多少？,六、 参考书1. 吴立军主编天然药物化学（第五版），人民卫生出
12、版社，2007年2. 梁敬钰主编天然药物化学实验与指导，中国医药科技出版社，2003年3. 李发美主编分析化学（第六版），人民卫生出版社，2007年,实验四 六味地黄丸质量标准研究,一、实验目的, 学习中药质量的控制方法，中药质量标准的制定方法。 学习六味地黄丸质量标准的制定依据。 学习实验用硅胶板的铺板技术。,二、实验原理,六味地黄丸 【处方】熟地黄184g 山茱萸(制)92g 牡丹皮69g 山 药92g 茯 苓69g 泽 泻69g 蜂蜜(炼)550g 滑 石 粉 石 蜡 油 -1000g,【质量要求】1）水分 2）重量差异 3）装量差异 4）溶散时限 5）微生物限度【鉴别】取本品乙醚提取液
13、作为供试品溶液，另取丹皮对照药材作成对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录B)试验，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。,三、实验仪器与实验材料,1、实验仪器索氏提取器 旋转蒸发器 烧杯 漏斗 展开缸 显色瓶超声波提取器 玻璃棒 试剂瓶 电子天平 锥形瓶 研钵 玻璃板 布氏漏斗 真空泵 抽滤瓶,2、实验材料六味地黄丸 牡丹皮 乙醚 丙酮 氯化铁显色剂 硅胶 滤纸 环己烷 醋酸乙酯 乙醇 乙酸 CMC-Na 玻璃板,四、试验方法（1）取本品20丸，在电子天平下分别称取各丸质量，记录，求出平均值，并计算相对标准偏差。 （2）硅胶G薄层板的制备 1. CMC
14、Na溶液的配置：一般其浓度为0.30.5，根据自己经验而定（我习惯用0.4的）。具体方法如下：先将预用的水加热至6070，然后加入CMCNa，边加边搅拌，使之溶解，即得。,2. 与硅胶混合：CMCNa溶液与硅胶的比例为3：1。具体方法如下：先将CMCNa溶液倒入自动搅拌器或研钵中，然后加入硅胶，搅匀即可。若是在研钵中研磨，按一个方向研磨，自下而上，然后自上而下，以赶尽气泡为佳。,3. 铺板：手动或机械。手动铺出的板的薄厚与所加的混合后的硅胶量有关，而机械铺出的板的薄厚与机械所选用的钢板有关，可根据需要来定。此过程中最关键的是板子边缘铺得好坏，手动铺板一定要将玻璃板边缘硅胶涂匀（我习惯用两头掂法
15、，即板下方的中间垫一物体，两头悬空，两手均匀掂动）。而机械铺板要注意板与板之间平整性，或者由高到低排列。,4. 晾干：自然晾干。 5. 活化：将晾干的板子在105烘箱中干燥30min，取出，放入干燥器中，备用。,（3）取本品9g，研碎，加硅藻土4g，研匀。加乙醚120ml，用索氏提取器低温回流提取2小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮10 g，加乙醚20 ml在超声波提取器上震荡提取30分钟，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录B)试验，吸取上述两种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷一醋酸乙酯(31)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。,五、实验指导1本实验讲解要点及注意事项 中药质量标准制定及研究方法中各个细节问题。 电子天平的常规操作方法。 索氏提取器的基本操作方法及注意事项。 硅胶板制作的基本步骤和注意事项。,
